| 研究課題/領域番号 |
21J00718
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
小川 哲史 国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 特別研究員(PD)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-28 – 2024-03-31
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| キーワード | 寄生植物 / 屈性 / ストリゴラクトン / 菌根菌共生 / KAI2 |
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| 研究実績の概要 |
植物は周囲の他者を認識し共生関係や寄生関係を築くことで、栄養確保に役立てている。本研究では植物における菌根菌の認識と寄生植物における宿主植物の認識に共通する分子機構の解明を試みている。まず寄生植物が宿主を認識し接近する屈性のメカニズムを、主にハマウツボ科のコシオガマおよびストライガを用いて解明してきた。昨年度までに、宿主由来のストリゴラクトン（SL）がコシオガマ並びにストライガの屈性を誘導すること、SLはコシオガマの根において植物ホルモンのオーキシンに対する応答を左右非対称に引き起こし屈性を誘導すること、その応答はアンモニウムイオンにより阻害されることを発見した。本年度はさらに、コシオガマやストライガがSLに対して特異的に屈性を示すことを明らかにした。また、イネにおいて菌根菌との共生を負に制御するタンパク質のホモログがコシオガマに存在することに着目し、そのタンパク質が屈性を抑制していることを発見した。これにより、寄生植物におけるSLへの屈性は菌根菌と共生するためのシステムから改変された戦略である可能性を提唱した。
本年度はさらに、植物の菌根菌認識の分子機構を解明するため、菌根菌との共生に必要なKAI2 ligand (KL) という未知の植物内生物質に着目し研究を進めた。KLの生合成遺伝子を決定するため、カリフォルニア大学リバーサイド校のNelson教授の研究室に滞在し、KLを過剰蓄積していると考えられるシロイヌナズナの株に変異原を処理した種子をスクリーニングした。その結果、約56,000個の種子よりKLの蓄積が損なわれたと考えられる表現型を示す植物体を38株得た。今後はこれらの株を全ゲノムシークエンシング解析に供し、KLの生合成遺伝子の候補を絞り込んで解析を進める。メタボローム解析や受容体との結合能の測定により、KL生合成遺伝子およびKLの化学構造を明らかにする予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の研究通り、ハマウツボ科寄生植物における宿主発見のための分子メカニズムの解明を行なった後、カリフォルニア大学リバーサイド校のDavid Nelson教授の研究室に滞在し植物が菌根菌を認識するメカニズムの解明を進めた。Nelson教授らが作成したKLを過剰蓄積していると考えられるシロイヌナズナをもとに、変異原により遺伝子変異を導入したライブラリーについてスクリーニングを進め、KLの蓄積が欠失したと考えられる変異株の選抜をおおむね完了させた。既に全ゲノムシークエンシングによるKL生合成遺伝子の候補の選抜を開始しており、おおむね当初の計画通りに研究が進展している。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究当初に提唱した「寄生植物は進化の過程でKL受容体をSL受容体に改変し、既存の共生メカニズムを寄生に転用するための新たなSLの生理機能を獲得した」という仮説を検証するため、最終年度はKLの生合成遺伝子の同定およびKLの化学構造の同定を試みるとともに、菌根菌共生におけるKLの役割を調べる。KL生合成遺伝子の候補について、野生型株をもとに遺伝子欠損株および相補株を作成し、胚軸長などの表現型を観察する。これによりKL生合成への寄与の有無を調べ、KL生合成遺伝子を同定する。得られたKL生合成遺伝子欠損株について、野生型株およびKLを過剰蓄積していると考えられる変異体kuf1（Nelson教授らが作成）とメタボローム比較を行い、蓄積量に差が見られる代謝物を同定する。得られた代謝物について、シロイヌナズナへの処理によりKL蓄積と同等の表現型が得られるかを調べるとともに化学構造を決定し、KLを同定する。さらに、イネにおいてKLが菌根菌の共生に与える影響を解析する。以上の解析により得られた結果をもとに、「植物におけるKLの認識から菌根菌共生に至るまでのメカニズム」と「寄生植物におけるSLの認識から宿主への寄生に至るまでのメカニズム」を比較することで、両者に共通する分子機構を明らかにする。
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| 備考 |
小川哲史. “寄生植物が宿主に接近するための分子機構の解明”、第14回 理研研究奨励賞（桜舞賞）、国立研究開発法人理化学研究所, 2023
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