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2012 年度 実績報告書

トランスポゾンを用いた方法論に基づく脊椎動物フェノーム解析の基盤形成

研究課題

研究課題/領域番号 23241063
研究機関国立遺伝学研究所

研究代表者

川上 浩一  国立遺伝学研究所, 個体遺伝研究系, 教授 (70195048)

研究期間 (年度) 2011-04-01 – 2015-03-31
キーワードゲノム / 遺伝学 / 遺伝子 / 神経科学 / 発生・分化
研究概要

(1)モデル脊椎動物ゼブラフィッシュにおいて、Gal4を組み込んだ遺伝子トラップコンストラクトを用いたスクリーニングを行い、細胞・組織・器官特異的にGal4を発現するトランスジェニックフィッシュを、新たに100系統作製することに成功した。これらをかけあわせ、分子生物学的解析を行うことにより、単一挿入をもつ系統を樹立し、トランスポゾン挿入部位を決定した。
(2)これまでに我々が作製してきたトランスジェニックフィッシュを用いて、初期発生研究、器官形成研究、神経科学研究を行った。側線神経細胞が誕生日に依存してサブタイプを決定すること(Lopez-Schier博士との共同研究)、前腎形成のメカニズム(横山博士との共同研究)、付属肢(ヒレ)形成のメカニズム(田村博士との共同研究)、頭蓋顔面骨の詳細な形成過程(八田博士との共同研究)、感丘形成のメカニズム(和田博士との共同研究)、グリシン作動性シナプスの形成メカニズム(平田博士との共同研究)を明らかにした。
(3)UASの下流にチャンネルロドプシン、及び改良型GCaMPをつないだUASエフェクタートランスジェニックフィッシュ系統を開発した。前者を用いて、人為的に光刺激により神経細胞を活性化させることに成功した。後者を用いて視覚刺激に応答した脳の神経活動のリアルタイムイメージングに成功した。
(4)脳の様々な領域でGal4を特異的に発現するトランスジェニックゼブラフィッシュ系統約70系統について、UAS:GFP系統とかけあわせ、それらから脳の連続切片を作製し、脳領域得意的なGal4発現を同定した。これらは脳機能解析のための基盤となる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

申請時目標とした新規トランスジェニックフィッシュの作製数50系統を大幅に越えて新規系統の開発に成功した。またそれらに基づいて、我々自身の研究室および共同研究者の研究室から平成24年度中に関連論文計13報を発表することができたから。

今後の研究の推進方策

研究は当初の計画以上に進展しており、今後のさらなる発展を目指す。

  • 研究成果

    (57件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (13件) (うち査読あり 13件) 学会発表 (43件) (うち招待講演 10件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Glycinergic transmission and postsynaptic activation of CaMKII are required for glycine receptor clustering in vivo.2013

    • 著者名/発表者名
      Yamanaka, I.
    • 雑誌名

      Genes to Cells

      巻: 18 ページ: 211-224

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Real-time visualization of neuronal activity during perception2013

    • 著者名/発表者名
      Muto, A.
    • 雑誌名

      Current Biology

      巻: 23 ページ: 307-311

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A zebrafish model of intrahepatic cholangiocarcinoma by dual expression of hepatitis B virus X and hepatitis C virus core protein in liver2012

    • 著者名/発表者名
      Liu, W.
    • 雑誌名

      Hepatology

      巻: 56 ページ: 2268 - 2276

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Functional assessment of human coding mutations affecting skin pigmentation using zebrafish.2012

    • 著者名/発表者名
      Tsetskhladze, Z.R.
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 7 ページ: e47398

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The ciliary protein Nek8/Nphp9 acts downstream of Inv/Nphp2 during pronephros morphogenesis and left-right establishment in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Fukui, H.
    • 雑誌名

      FEBS letter

      巻: 586 ページ: 2273 - 2279

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Visualization and exploration of Tcf/Lef function using a highly responsive Wnt/β-catenin signaling-reporter transgenic zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Shimizu, N.
    • 雑誌名

      Developmental Biology

      巻: 370 ページ: 71 - 85

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Tol2-mediated gene transfer and in ovo electroporation of the otic placode: a powerful and versatile approach for investigating embryonic development and regeneration of the chicken inner ear2012

    • 著者名/発表者名
      Freeman, S.
    • 雑誌名

      Methods in Molecular Biology

      巻: 916 ページ: 127 - 139

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient genetic modification and germ-line transmission of primordial germ cells using piggyBac and Tol2 transposons2012

    • 著者名/発表者名
      Macdonald, J.
    • 雑誌名

      Proc. Natl. Acad. Sci. USA

      巻: 109 ページ: 1466 - 1472

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mechanism of pectoral fin outgrowth in zebrafish development2012

    • 著者名/発表者名
      Yano, T.
    • 雑誌名

      Development

      巻: 139 ページ: 2916 - 2925

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mixture of differentially tagged Tol2 transposons accelerates conditional disruption of a broad spectrum of genes in mouse embryonic stem cells2012

    • 著者名/発表者名
      Mayasari, N.I.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Research

      巻: 40 ページ: e97

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The medaka zic1/zic4 mutant provides molecular insights into teleost caudal fin evolution.2012

    • 著者名/発表者名
      Moriyama, Y.
    • 雑誌名

      Current Biology

      巻: 22 ページ: 601 - 607

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Neuronal birth order identifies a dimorphic sensorineural map2012

    • 著者名/発表者名
      Pujol-Marti, J.
    • 雑誌名

      The Journal of Neuroscience

      巻: 32 ページ: 2976 - 2987

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Transgenic line with gal4 insertion useful to study morphogenesis of craniofacial perichondrium, vascular endothelium-associated cells, floor plate, and dorsal midline radial glia during zebrafish development2012

    • 著者名/発表者名
      Nakayama, S.
    • 雑誌名

      Development, Growth & Differentiation

      巻: 54 ページ: 202 - 215

    • 査読あり
  • [学会発表] Genetic dissection of the adult zebrafish brain by the Gal4-UAS method2013

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      5th Strategic Conference of Zebrafish Investigators
    • 発表場所
      Asilomar, USA
    • 年月日
      20130119-20130123
    • 招待講演
  • [学会発表] Differential Role for Oct4 Nucleocytoplasmic Dynamics in Somatic Cell Reprogramming and Self-renewal of Embryonic Stem Cells2012

    • 著者名/発表者名
      Oka, M.
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      20121211-20121214
  • [学会発表] Functional Analysis of the Forebrain-forming Genes in Zebrafish Embryos by the GAL4-UAS System2012

    • 著者名/発表者名
      Taira, H.
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      20121211-20121214
  • [学会発表] Differential role for Oct4 nucleocytoplasmic dynamics in somatic cell reprogramming and self-renewal of embryonic stem cells2012

    • 著者名/発表者名
      Moriyama, T.
    • 学会等名
      The 35th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
    • 発表場所
      博多
    • 年月日
      20121211-20121214
  • [学会発表] Functional analysis of the forebrain-forming gene in zebrafish embryos by the Gal4-UAS system2012

    • 著者名/発表者名
      Taira, H.
    • 学会等名
      The 35th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
    • 発表場所
      博多
    • 年月日
      20121211-20121214
  • [学会発表] Genetic dissection of the adult zebrafish brain by the Gal4-UAS method2012

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      Imaging Structure and Function in the Zebrafish Brain
    • 発表場所
      London, UK
    • 年月日
      20121207-20121210
    • 招待講演
  • [学会発表] Trace active avoidance conditioning in the adult zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Tanabe, H.
    • 学会等名
      Imaging Structure and Function in the Zebrafish Brain
    • 発表場所
      London, UK
    • 年月日
      20121207-20121210
  • [学会発表] Tol2-mediated transgenesis, gene trapping, enhancer trapping and Gal4-UAS methods2012

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      Janelia workshop on zebrafish genetics, transgenesis, and systems biology
    • 発表場所
      Ashburn, VA, USA
    • 年月日
      20121101-20121102
    • 招待講演
  • [学会発表] Role of the L-type lectin VIPL/Lman2la in the development of escape locomotion in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Asakawa, K.
    • 学会等名
      Neuroscience 2012
    • 発表場所
      New Orleans, USA
    • 年月日
      20121013-20121017
  • [学会発表] Development of Tol2 transposon mediated gene trap method in zebrafish using MAZ transcription termination site2012

    • 著者名/発表者名
      Abe, G.
    • 学会等名
      Asia-Pacific Developmental Biology Conference 2012
    • 発表場所
      Taipei, Taiwan
    • 年月日
      20121005-20121008
  • [学会発表] Role of basement membrane in axogenesis of carebellar granule cells in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Hibi, M.
    • 学会等名
      Asia-Pacific Developmental Biology Conference 2012
    • 発表場所
      Taipei, Taiwan
    • 年月日
      20121005-20121008
  • [学会発表] The transposon-mediated genetic methods in zebrafish and their application to the study of functional neural circuits2012

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      Asia-Pacific Developmental Biology Conference 2012
    • 発表場所
      Taipei, Taiwan
    • 年月日
      20121005-20121008
    • 招待講演
  • [学会発表] The lateral habenula homolog regulates learning of active instrumental behavior in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Amo, R.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Exploration of Tcf/Lef function using a highly responsive Wnt/β-catenin signaling-reporter transgenic zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Shimizu, N.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Visualization of climbing fibers in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Sakagami, M.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Functional analysis of the forebrain-forming genes in zebrafish embryos by the Gal4-UAS system2012

    • 著者名/発表者名
      Taira, H.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Role of basement membrane in axogenesis of cerebellar granule cells2012

    • 著者名/発表者名
      Takeuchi, M.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Organ size control through a negative feedback loop mechanism during lateral line development in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Wada, H.,
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] National Bioresource Project Zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Okamoto, H.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] Role of L-type lectin VIPL/Lman2la in the escape locomation in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Asakawa, K.
    • 学会等名
      The 18th Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
    • 発表場所
      Kyoto
    • 年月日
      20120922-20120923
  • [学会発表] ゼブラフィッシュL型レクチンVIPLの逃避ロコモーションにおける機能2012

    • 著者名/発表者名
      浅川和秀
    • 学会等名
      第35回日本神経科学大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      20120918-20120921
  • [学会発表] ゼブラフィッシュ外側手綱核相同領域は能動的回避学習を制御する2012

    • 著者名/発表者名
      天羽龍之介
    • 学会等名
      第35回日本神経科学大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      20120918-20120921
  • [学会発表] IV型コラーゲンはゼブラフィッシュにおける小脳顆粒細胞の軸索伸長に必要である2012

    • 著者名/発表者名
      竹内未紀
    • 学会等名
      第35回日本神経科学大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      20120918-20120921
  • [学会発表] ゼブラフィッシュにおけるトランスポゾンを用いた遺伝学的方法論と機能的神経回路研究への応用2012

    • 著者名/発表者名
      川上浩一
    • 学会等名
      第13回 運動器科学研究会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120914-20120915
    • 招待講演
  • [学会発表] トランスジェニックゼブラフィッシュを用いた側線における細胞間相互作用の研究2012

    • 著者名/発表者名
      川上浩一
    • 学会等名
      再生医学・再生医療の 先端融合的 共同研究拠点「平成23年度 共同研究会」
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      20120914-20120915
    • 招待講演
  • [学会発表] Visualization of functional neural circuits in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Muto, A.
    • 学会等名
      10th International Congress of Neuroethology
    • 発表場所
      Maryland, USA
    • 年月日
      20120805-20120810
    • 招待講演
  • [学会発表] Real-time visualization of the neuronal activity in the brain during visual perception of a natural object.2012

    • 著者名/発表者名
      Muto, A.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
    • 招待講演
  • [学会発表] Visualization and exploration of Tcf/Lef function using a highly responsive Wnt/β-catenin signaling-reporter transgenic zebrafish.2012

    • 著者名/発表者名
      Shimizu, N.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] zTrap and NIGKOF: the databases for gene trap/enhancer trap lines and gene-knockout fish lines.2012

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
    • 招待講演
  • [学会発表] Functional assessment of human coding polymorphisms affecting skin pigmentation using zebrafish //albino// and //golden// mutants.2012

    • 著者名/発表者名
      Tsetskhladze, Z.R.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] "The Wnt/Planar cell polarity protein Vangl2 functions in floorplate cells to mediate motor neuron migration within the vertebrate brainstem."2012

    • 著者名/発表者名
      Sittaramane, V.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] Antagonistic roles of Akirin1 and Akirin2 in regulating muscle growth of zebrafish.2012

    • 著者名/発表者名
      Chen, C.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] Involvement of the lateral habenula homolog in the active avoidance learning in zebrafish.2012

    • 著者名/発表者名
      Amo, R.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] Role of type IV collagen in axogenesis of cerebellar granule cells in zebrafish.2012

    • 著者名/発表者名
      Takeuchi, M.
    • 学会等名
      10th International Conference Zebrafish Development and Genetics
    • 発表場所
      Madison, USA
    • 年月日
      20120620-20120624
  • [学会発表] Genetic control for neural circuit formation in teleost cerebellum2012

    • 著者名/発表者名
      Hibi, M.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] "Electrical coupling in muscle enables compensation of sporadic neural outputs to coordinate robust and efficient behavior during motor development."2012

    • 著者名/発表者名
      Hirata, H.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] Dickkopfs regulate organ growth during lateral line development in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Wada, H.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] Role of type IV collagen in axogenesis of cerebellar granule cells in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Takeuchi, M.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] "Producing fgf24BAC:GFP transgenic fish by using Tol2 transposon mediated BAC transgenesis in zebrafish"2012

    • 著者名/発表者名
      Abe, G.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] "Differential role for Oct4 nucleocytoplasmic dynamics in somatic cell reprogramming and self-renewal of embryonic stem cells"2012

    • 著者名/発表者名
      Oka, M.
    • 学会等名
      第45回日本発生生物学会・第64回日本細胞生物学会合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120528-20120531
  • [学会発表] Involvement of TGF-β1 in intrahepatic cholangiocarcinoma formation using HBx and HCV core dual transgenic zebrafish as a model2012

    • 著者名/発表者名
      Liu, W.
    • 学会等名
      the 2012 Cold Spring Harbor Asia Conference Zebrafish Disease Models
    • 発表場所
      Suzhou, China
    • 年月日
      20120416-20120420
  • [学会発表] Slow-twitch and fast-twitch muscle defects in zebrafish2012

    • 著者名/発表者名
      Hirata, H.
    • 学会等名
      the 2012 Cold Spring Harbor Asia Conference Zebrafish Disease Models
    • 発表場所
      Suzhou, China
    • 年月日
      20120416-20120420
  • [学会発表] The transposon-mediated genetic methods in zebrafish and their application to the study of functional neural circuits: transgenic tools for calcium imaging2012

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, K.
    • 学会等名
      The 2012 Cold Spring Harbor Asia Conference Zebrafish Disease Models
    • 発表場所
      Suzhou, China
    • 年月日
      20120416-20120420
    • 招待講演
  • [備考] Kawakami Lab

    • URL

      http://kawakami.lab.nig.ac.jp/

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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