| 研究概要 |
本研究では、in vivoでの雌性生殖組織・器官再構成系において、その一要素である幹細胞に対して時空間的に遺伝子改変・細胞位置改変といった介入をすることにより、正常と異常(疾患)の再構成とその技術の臨床応用を目指す。
平成23年度は、我々が確立した子宮内膜再構成・子宮内膜症モデルとイメージングシステム(Masuda,et al,PNAS,2007)をさらにブラッシュアップしていくとともに、内膜幹細胞(Masuda,et al.,PLoS ONE,2010)のみをマーキングし非幹細胞とともに移植することで、幹細胞が子宮内膜の各細胞成分(腺上皮、間質、血管など)へどのように分化あるいは貢献していくかを、免疫組織化学も含めた細胞トラッキング技術を用いて調べた。これまでの再構成系は移植部位であるマウス腎臓を穿通させて行っていたが、極めて高度の技術を要し困難を極めた。そこで、本年度は穿通させずに移植する方法の開発に着手し、その技術を確立し得た。続いて、内膜幹細胞の候補集団である内膜SP細胞および非内膜幹細胞にそれぞれマーカー遺伝子を導入してそれぞれを標識した。これらを、大多数の非標識内膜細胞と混在させて、前述した方法を用いて重度免疫不全マウスの腎被膜下に移植し内膜再構成を行った。その結果、標識SP細胞の移植によって再構築された内膜では、標識蛋白陽性細胞が内膜の各構成細胞(腺上皮、血管内皮、間質など)に認められたが、標識非幹細胞の移植によって再構築された内膜では、標識細胞は腺上皮や血管内皮には存在せず、主に間質のみにしか認められなかった。以上より、内膜SP細胞の多分化能が示され真の内膜幹細胞の特性を有することが明らかになった。さらに、本トラッキングシステムが想定通りに機能したことで、幹細胞特性のin vivo評価システムとしての有用性も示された。
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