研究課題
核蛋白質53BP1は、クロマチンとの結合を介してDNA二重鎖切断部位に集積し、DNA損傷の修復に関与する。53BP1は、アポトーシス誘導因子p53に結合することからアポトーシスへの関与が予想されるが、アポトーシスにおける53BP1の機能についての解析は少ない。昨年度までに申請者は、siRNAによる53BP1発現抑制により、staurosporineにより誘導されるアポトーシスが抑制されることを見出した。本年度は、細胞へのX線照射後に、53BP1がp53の転写因子機能を調節することにより、アポトーシスを制御している可能性を調べた。siRNAを用いて53BP1の発現を抑制すると、X線照射後の細胞周期G1停止において中心的な役割を果たしているp21蛋白質の増加が強く抑制され、アポトーシス誘導において重要な役割を果たしているBax、Puma蛋白質についても増加の遅延がみられた。X線照射後のp21蛋白質増加が抑制される事に合致して、53BP1発現抑制細胞ではX線照射後のG1期停止が障害されていた。さらに53BP1発現抑制により、X線照射後のp21、Bax、PumaそれぞれのmRNAの増加が抑制された。このp53標的遺伝子mRNAの増加抑制の機序を明らかにするために、これらの遺伝子のプロモーター領域へのp53結合をクロマチン免疫沈降法（ChIPアッセイ）で調べたところ、プロモーター領域へのp53の結合は、53BP1発現抑制の有無にかかわらず、X線照射後同程度に増加した。一方、53BP1はX線照射前にもp21プロモーター領域に結合していたが、その結合量はX線照射後に変化することはなかった。以上より53BP1は、X線照射後プロモーター領域に結合したp53に起こる、何らかの修飾を制御することで、p53の転写活性化能を制御している可能性が示唆された。
25年度が最終年度であるため、記入しない。
すべて 2014 2013
すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (3件)
PLoS Pathog
巻: 10 ページ: e1004012
10.1371/journal.ppat.1004012
Cancer Lett
巻: 345 ページ: 115-123
10.1016/j.canlet.2013.11.008
Histochem Cell Biol
巻: 141 ページ: 101-109
10.1007/s00418-013-1135-4
Exp Biol Med
巻: 238 ページ: 889-897
10.1177/1535370213494646
PLoS One
巻: 8 ページ: e72253
10.1371/journal.pone.0072253
