細胞内品質管理プロセスを用いた次世代蛋白質生産システム創製

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23360371
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 大政 健史 徳島大学, ソシオテクノサイエンス研究部, 教授 (00252586)
• 研究分担者: 鬼塚 正義 徳島大学, 大学院・ソシオテクノサイエンス研究部, 助教 (80571174) ; 白井 昭博 徳島大学, 大学院・ソシオテクノサイエンス研究部, 助教 (40380117) ; 間世田 英明 徳島大学, 大学院・ソシオテクノサイエンス研究部, 准教授 (10372343)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 小胞体ストレス応答 / チャイニーズハムスター卵巣細胞 / 蛋白質医薬品 / 糖鎖 / 細胞培養

研究概要

抗体医薬を代表とする蛋白質医薬品は、世界の製薬産業の成長エンジンとなっている。我が国で上市されている蛋白質性医薬品のうち、26％がチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞を用いて生産されており、CHO細胞は10g/Lを超える高レベル生産も可能である。特に本課題では、CHO細胞内における品質管理プロセスに着目し、品質管理機構の解明と制御を通して次世代型蛋白質を高度に生産可能な次世代の蛋白質生産システムを構築するための基盤的研究を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Improved antibody production in Chinese hamster ovary cells by ATF4 overexpression (2013)
  • 著者名/発表者名: Ahmad M. Haredy, Akitoshi Nishizawa, Kohsuke Honda, Tomoshi Ohya, Hisao Ohtake, Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: Vol. 65 ページ: 993-1002
  • DOI: 10.1007/s10616-013-9631-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of high-producing cell lines by overexpression of cell division cycle 25 homolog A in Chinese hamster ovary cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Kyoung Ho Lee, Tomomi Tsutsui, Kohsuke Honda, Ryutato Asano, Izumi Kumagai, Hisao Ohtake, Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bioengineering 巻: Vol. 116 ページ: 754-760
  • DOI: 10.1016/j.jbiosc.2013.05.032
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid construction of transgene-amplified CHO cell lines by cell cycle checkpoint engineering (2013)
  • 著者名/発表者名: Kyoung Ho Lee, Masayoshi Onitsuka, Kohsuke Honda, Hisao Ohtake, Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Applied Microbiology and Biotechnology 巻: Vol. 97 ページ: 5731-5741
  • DOI: 10.1007/s00253-013-4923-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction of BAC-based physical map and analysis of chromosome rearrangement in Chinese hamster ovary cell lines (2012)
  • 著者名/発表者名: Yihua Cao, Shuichi Kimura, Takayuki Itoi, Kohsuke Honda, Hisao Ohtake, and Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Biotechnology and Bioengineering 巻: Volume 109, No.6 ページ: 1357-1367
  • DOI: 10.1002/bit.24347
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescence in situ hybridization using bacterial artificial chromosome (BAC) clones for the analysis of chromosome rearrangement in Chinese hamster ovary cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Yihua Cao, Shuichi Kimura, Takayuki Itoi, Kohsuke Honda, Hisao Ohtake, and Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Methods 巻: Volume 56 ページ: 418-423
  • DOI: 10.1016/j.ymeth.2011.11.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of sialylation on humanized IgG-like bispecific antibody by overexpression of α 2,6-sialytransferase derived from Chinese hamster ovary cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Onitsuka, Wook-Dong Kim, Hiroyuki Ozaki, Akira Kawaguchi, Kohsuke Honda, Hiroyuki Kajiura, Kazuhito Fujiyama, Ryutato Asano, Izumi Kumagai, Hisao Ohtake, Takeshi Omasa
  • 雑誌名: Applied Microbiology and Biotechnology 巻: Vol. 94 ページ: 69-80
  • DOI: 10.1007/s00253-011-3814-1
  • 査読あり
• [学会発表] Efficient Construction of Transgene-Amplified CHO Cell Lines by Cell Checkpoint Engineering (2014)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Omasa
  • 学会等名: Pep Talk 2014
  • 発表場所: Palm Springs Convention Center (USA)
  • 年月日: 2014-01-12
• [学会発表] 細胞周期エンジニアリングによる Chinese hamster ovary (CHO)細胞における効率的な遺伝子増幅システムの構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 筒井智美, 他
  • 学会等名: 日本動物細胞工学会2013年度大会
  • 発表場所: ホテルフジタ福井(福井県)
  • 年月日: 20130718-19
• [学会発表] 抗体生産 CHO 細胞株における NFKBIZ 発現の影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木下幸恵, 他
  • 学会等名: 日本動物細胞工学会 2013年度大会
  • 発表場所: ホテルフジタ福井(福井県)
  • 年月日: 20130718-19
• [学会発表] CHO 細胞における小胞出芽関連因子Arf のクローニングと発現制御によるタンパク質生産への影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松村しずか, 他
  • 学会等名: 日本動物細胞工学会 2013年度大会
  • 発表場所: ホテルフジタ福井(福井県)
  • 年月日: 20130718-19
• [学会発表] Chemical chaperone suppresses the antibody aggregation in CHO cell culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Noda, et al
  • 学会等名: ESACT Meeting 2013
  • 発表場所: Congress Centre of Lille (France)
  • 年月日: 20130623-26
• [学会発表] Rapid construction of transgene-amplified CHO cell lines by cell cycle checkpoint engineering (2013)
  • 著者名/発表者名: Kyoung Ho Lee, et al
  • 学会等名: ESACT Meeting 2013
  • 発表場所: Congress Centre of Lille (France)
  • 年月日: 20130623-26
• [学会発表] 遺伝子組換え製剤 : 生産動物細胞株の作成の現状と課題 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大政健史
  • 学会等名: バイオプロセス講演・見学会
  • 発表場所: 東和薬品工業株式会社 山形工場(山形県)
  • 年月日: 20130522-23
  • 招待講演
• [学会発表] NFKBIZ発現による高生産CHO細胞株の構築と解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木下幸恵, 他
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 大阪大学(大阪府)
  • 年月日: 20130317-19
• [学会発表] レクチンを用いた抗体糖鎖の迅速検出とその応用の可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鬼塚正義, 他
  • 学会等名: 第5回先導技術交流会
  • 発表場所: 機械振興会館(東京都)
  • 年月日: 2013-01-21
• [学会発表] Deglycosylation induces antibody aggregation in culture process of Chinese hamster ovary cell (2012)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Onitsuka, et al
  • 学会等名: The 18th Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC)
  • 発表場所: 徳島大学(徳島県)
  • 年月日: 20121026-28
• [学会発表] Construction of high-producing CHO cell lines by controlling cell cycle checkpoint (2012)
  • 著者名/発表者名: Kyoungho Lee, et al
  • 学会等名: The 18th Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC)
  • 発表場所: 徳島大学(徳島県)
  • 年月日: 20121026-28
• [学会発表] Expression profiling in UPR-engineered Chinese hamster ovary cell line (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomomi Tsutsui, et al
  • 学会等名: The 18th Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC)
  • 発表場所: 徳島大学(徳島県)
  • 年月日: 20121026-28
• [学会発表] バイオ医薬品生産におけるプロダクションサイエンス (2012)
  • 著者名/発表者名: 大政健史
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
  • 年月日: 20121023-26
• [学会発表] ATF-4 高発現 CHO 細胞における遺伝子発現解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 筒井智美, 他
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
  • 年月日: 20121023-26
• [学会発表] Rapid construction of transgene-amplified CHO cell lines by cell cycle regulator engineering (2012)
  • 著者名/発表者名: Kyoungho Lee, et al
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
  • 年月日: 20121023-26
• [学会発表] 糖鎖構造が細胞培養過程の抗体凝集形成に与える影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 鬼塚正義, 他
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
  • 年月日: 20121023-26
• [学会発表] バイオ医薬品生産におけるCHO細胞基盤情報とその応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大政健史
  • 学会等名: 化学工学会第44回秋季大会
  • 発表場所: 東北大学(宮城県)
  • 年月日: 2012-09-21
• [学会発表] Chromosome Identification and Its Application in Chinese Hamster Ovary Cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Omasa, et al
  • 学会等名: ESACT Meeting 2011 in Vienna
  • 発表場所: Vienna Hofburg Congress Centre (Austria)
  • 年月日: 2011-05-15
• [図書] 化学便覧 応用化学編 第7版「8.2.6 染色体工学」 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大政健史(分担執筆)
  • 総ページ数: 469-471
  • 出版者: 丸善出版
• [図書] 新機能抗体開発ハンドブック「第1編2章5節大量調製-細胞培養」, 「第2編4章1節培養技術の進歩」 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大政健史(分担執筆)
  • 総ページ数: 36-40,213-216
  • 出版者: エヌ・ティー・エス
• [図書] 抗体医薬品の開発と市場 開発編「第 3 章 抗体医薬品生産技術の基礎～動物細胞生産株の樹立,培養,スケールアップからダウンストリームまで～」 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大政健史(分担執筆)
  • 総ページ数: 27-39
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] バイオ医薬品製造の効率化と生産基材の開発「第II編第1章CHO細胞におけるタンパク質生産性向上技術,ベクター開発」 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大政健史(分担執筆)
  • 総ページ数: 36-41
  • 出版者: シーエムシー出版