研究課題
昨年度の解析で、RECQL5 は組換え修復においてBRACA2の下流で機能し、Rad51フィラメント形成以降の過程でRad54とは独立に機能することが明らかになった。今年度は、RECQL5の機能の発現に、RECQL5のRad51との結合が必要であるかどうかを調べるとともに、シスプラチンによりRECQL5遺伝子破壊株に誘導される免疫グロブリン遺伝子の組換えを調べることによりRECQL5の機能を解析した。１）RECQL5遺伝子破壊株に、野生型あるいはRad51に結合できない変異RECQL5遺伝子を発現させたところ、変異遺伝子ではシスプラチン感受性は相補されなかったことから、RECQL5の機能の発現には、Rad51と結合することが必要であることが明らかになった。２）使用している細胞の免疫グロブリン遺伝子の組換えにはactivation-induced cytidine deaminase (AID)が関与していることが知られている。そこで、RECQL5/AID遺伝子２重破壊株を作製して解析したところ、シスプラチンにより誘導される組換えにもAIDが関与していることがわかった。３）シスプラチンにより誘導される免疫グロブリン遺伝子の組換えの正確さを、組換えられた遺伝子の塩基配列を決定することにより調べ、RECQL5が不正確な組換えを抑制していることが明らかになった。以上の結果とこれまでに得られた結果を考え合わせ、RECQL5は、２つあるRad51フィラメントの一つが相同性をもつDNA鎖に侵入して組換えが始まると、もう一つのRad51フィラメントを破壊することにより、不適切な組換えを抑制しているというモデルを提出することができた。
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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