研究課題
１．複製開始タイミング制御分子メカニズムの解明：テロメア配列依存的にタイミング制御される複製開始点ではテロメア結合因子Taz1と Rif1の二重変異によるタイミング脱抑制が加算的にならないことから、両因子が同一の経路で機能すると結論した。また、Taz1が関与せずRif1のみが制御する複製開始点の存在から、Rif1はテロメア配列-Taz1と独立してタイミング制御にはたらくしくみがあると考えられる。分裂酵母細胞からRif1タンパク質を回収し質量分析解析した結果、蛋白質脱リン酸化酵素PP1の構成因子がRif1による制御に関与する可能性が考えられた。いっぽう、テロメア配列-Taz1が制御する後期複製開始点の核内局在を解析した結果、核膜近傍に局在し、細胞周期特異的にテロメアと近接することを見いだした。核膜近傍局在ないしはテロメアとの隣接が複製タイミング制御に関与する可能性が示唆された。２．Sgo2による複製タイミング制御機構：M期セントロメアでの染色体分配制御に関与するShugosin2 (Sgo2)がサブテロメアの広範囲に局在し、複製タイミング制御に関わるメカニズムを解析した。Sgo2は、Spindleチェックポイント制御キナーゼBab1によるヒストンH2Aリン酸化に依存して、間期においてもセントロメアとサブテロメアに局在し、複製開始を抑制することを見いだした。sgo2 rif1二重変異株の解析から、Sgo2はRif1と別経路で複製開始を制御すると結論した。クロマチン免疫沈降法による解析から、Sgo2による制御は、Taz1-Rif1経路が制御するDDK依存的なSld3の複製開始点への結合段階ではなく、CDK依存的なGINSの結合段階であることを見いだした。これらの結果から、染色体の複製タイミングプログラムは、領域特異的な複数システムにより多重的に制御されていることが示唆された。
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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Mol. Cell. Biol.
巻: 33 ページ: 1175-1187
10.1128/MCB.01713-12
http://www.bio.sci.osaka-u.ac.jp/dbs01/re-paper-temp.php?id=14
http://www.bio.sci.osaka-u.ac.jp/bio_web/lab_page/masukata/thesis/index.html
