研究課題
本研究は細菌におけるtmRNAによるトランス翻訳機構の （1）分子機構の詳細と、（2）新しい生理機能の解明を目的としている。（１） トランス翻訳の分子機構の解明を、主にtmRNA、SmpBとリボソームとの相互作用の面から、ヒドロキシラジカル反応等を用いて解析を行い一定の成果を出してきた。トランス翻訳は タンパク質合成が停滞したリボソームを解放する働きを持つが、本年度はそれと同様の働きを持つことが示唆されているArfAに関してもtmRNA-SmpBの場合と同様の解析を行った。すなわち、各反応のステップを精製した成分を用いてin-vitro系で再現し、各ステップでのArfAのリボソーム上での相互作用位置を ヒドロキシラジカル反応等で決定した。その結果ArfAはmRNAのない30SリボソームのA-site側のmRNA-channelにRF2の結合後に結合することを明らかにした。また同様の働きを持つYaeJについても解析中である。（２）我々が単離した枯草菌のtmRNA依存性温度感受性株(セリルtRNA合成酵素遺伝子(SerS)の変異でtmRNA存在下でのみ増殖が阻害 される)は、その新奇の表現系を従来のトランス翻訳の働きでは説明することが難しい。昨年度はこの変異株から回復株(高温での増 殖が回復する)を多数単離し、それらの変異を(1)tmRNA遺伝子、(2)SerS遺伝子、および(3)それ以外の部位の変異に分類した。本年 度は、それらのうち(3)のintergenic suppressor変異に焦点をしぼり、transformationの手法を用いてその変異部位(遺伝子)の特定 を行った。まだ最終結果は出ていない。
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 オープンアクセス 5件、 謝辞記載あり 5件) 学会発表 (3件)
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