胚盤胞補完法による１００％サル肝臓を持つラット－サル異種動物間キメラの作出

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23390036
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 松永 民秀 名古屋市立大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (40209581)
• 研究分担者: 大森 栄 信州大学, 医学部附属病院, 教授 (70169069) ; 成松 鎭雄 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (20113037)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 胚盤胞補完法 / サルiPS細胞 / 異種動物間キメラ / ラットiPS細胞 / カニクイザル / マーモセット / ラット / tk-NOGマウス

研究概要

サルiPS細胞は、線維芽細胞に初期化因子を遺伝子導入することにより樹立した。樹立した細胞は、三胚葉への分化能有していた。異種動物キメラの作出は、マウスの胚盤胞にラット由来のiPS細胞を注入し、これを偽妊娠マウスへ移植することにより行った。作出されたマウスの中にラットiPS細胞由来の細胞を持つことが確認されたことから、作出したマウスはラットiPS細胞由来細胞を持つキメラマウスであることが明らかとなった。キメラマウスは、臓器によりラットiPS細胞の寄与率が異なっており、心臓や膵臓への寄与は高いが、肝臓への寄与は低かった。

研究成果

• [雑誌論文] Differentiation into pharmacokinetically functional enterocyte-like cells from human induced pluripotent stem cells using a simple method (2014)
  • 著者名/発表者名: Iwao T, Toyota M, Miyagawa Y, Okita H, Kiyokawa N, Akutsu H, Umezawa A, Nagata K, Matsunaga T
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 29 ページ: 44-51
• [雑誌論文] Selective culture method for hepatocyte-like cells differentiated from human induced pluripotent stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Yoshihashi S, Mimori K, Ogihara R, Kanehama Y, Maki Y, Enosawa S, Kurose K, Iwao T, Nakamura K, Matsunaga T
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet
  • DOI: 10.2133/dmpk.DMPK-14-RG-022
• [雑誌論文] Differentiation of monkey embryonic stem cells to hepatocytes by feeder-free dispersion culture and expression analyses of cytochrome P450 enzymes responsible for drug metabolism (2013)
  • 著者名/発表者名: Maruyama J, Matsunaga T, Yamaori S, Sakamoto S, Kamada N, Nakamura K, Kikuchi S, Ohmori S
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: 36 ページ: 292-298
• [雑誌論文] Hepatocyte nuclear factor 6 activates the transcription of CYP3A4 in hepatocyte-like cells differentiated from human induced pluripotent stem cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Sasaki T, Takahashi S, Numata Y, Narita M, Tanaka Y, Kondo Y, Matsunaga T, Ohmori S, Nagata K
  • 雑誌名: Drug Metabol Pharmacokinet 巻: 28 ページ: 250-259
• [雑誌論文] Clinical evidence of the pharmacokinetics change in thalidomide therapy (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakamura K, Matsuzawa N, Ohmori S, Ando Y, Yamazaki H, Matsunaga T
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 28 ページ: 38-43
• [雑誌論文] Establishment and directed differentiation of induced pluripotent stem cells from glycogen storage disease type Ib patient (2013)
  • 著者名/発表者名: Satoh D, Maeda T, Ito T, Nakajima Y, Ohte M, Ukai A, Nakamura K, Enosawa S, Toyota M, Miyagawa Y, Okita H, Kiyokawa N, Akutsu H, Umezawa A, Matsunaga T
  • 雑誌名: Genes Cells 巻: 18 ページ: 1053-1069
• [雑誌論文] An efficient method for differentiation of human induced pluripotent stem cells into hepatocyte-like cells retaining drug metabolizing activity (2013)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Iwao T, Nakamura K, Sasaki T, Takahashi S, Kamada N, Matsubara T, Gonzalez FJ, Akutsu H, Miyagawa Y, Okita H, Kiyokawa N, Toyoda M, Umezawa A, Nagata K, Matsunaga T, Ohmori S
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet
  • DOI: 10.2133/dmpk.DMPK-13-RG-104
• [雑誌論文] Influence of Cytochrome P450 2C19 Gene Variations on Pharmacokinetic Parameters of Thalidomide in Japanese Patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsuzawa N, Nakamura K, Matsuda M, Ishida F, Ohmori S
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: 35 ページ: 317-320
• [雑誌論文] 薬物動態研究におけるヒト多能性幹細胞の活用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岩尾岳洋, 松永民秀
  • 雑誌名: 薬剤学 巻: 72 ページ: 88-94
• [雑誌論文] Evaluation of human embryonic stem cell-derived hepatocyte-like cells for detection of CYP1A inducers (2012)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya H, Matsunaga T, Aikawa K, Kamada N, Nakamura K, Ichikawa H, Sasaki K, Ohmori S
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 27 ページ: 598-604
• [雑誌論文] Mechanisms of CYP3A induction by glucocorticoids in human fetal liver cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsunaga T, Maruyama M, Matsubara T, Nagata K, Yamazoe Y, Ohmori S
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 27 ページ: 653-657
• [雑誌論文] 薬物動態研究における実験材料及び評価系開発の最近の動向 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 26 ページ: 5-6
• [雑誌論文] 実験材料及び評価系開発の最近の動向(第1回) 幹細胞の分化と薬物動態研究への応用 ヒトESおよびiPS 細胞から肝細胞様細胞および腸管組織への分化誘導 (2011)
  • 著者名/発表者名: 岩尾岳洋, 松永民秀
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 26 ページ: 7-14
• [学会発表] ヒトiPS 細胞由来肝細胞及び腸管上皮細胞の作成と応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀
  • 学会等名: 第87回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20140300
• [学会発表] 糖原病Ib 型患者由来iPS細胞を用いた好中球モデルにおけるPKCを介したNOX2 活性化機序の解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大手万理子, 佐藤大介, 前田 徹, 中村克徳, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140300
• [学会発表] カニクイザル皮膚繊維芽細胞からのiPS 細胞の樹立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小野里太智, 佐藤大介, 小枝暁子, 中村克徳, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140300
• [学会発表] 胚盤胞注入によるラットiPS 細胞由来細胞をもつキメラマウスの作出 (2014)
  • 著者名/発表者名: 奥村啓樹, 鵜飼 茜, 佐藤大介, 宮本智美, 三好一郎, 平林真澄, 中村克徳, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140300
• [学会発表] 複数の低分子化合物はヒトiPS 細胞から機能性を持った小腸上皮細胞様細胞への分化効率を改善する (2013)
  • 著者名/発表者名: 小玉菜央, 岩尾岳洋, 壁谷知樹, 堀川隆司, 丹羽卓朗, 黒瀬光一, 中村克徳, 松永民秀
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131200
• [学会発表] Human small intestinal epithelial cells differentiated from adult intestinal stem cells - A novel system for the evaluation of oral drug absorption (2013)
  • 著者名/発表者名: Takenaka T, Harada N, Kuze J, Chiba M, Matsunaga T
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131000
• [学会発表] Pharmacokinetic function of hepatocyte-like cells differentiated from human iPS cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Iwao T, Ogihara R, Sasaki T, Nagata K, Kurose K, Horikawa T, Niwa T, Yamaori S, Ohmori S, Nakamura K Matsunaga T
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131000
• [学会発表] Small-molecule compounds enhance the differentiation of human induced pluripotent stem cells into enterocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwao T, Kondo Y, Kodama N, Nakamura K, Horikawa T, Niwa T, Kurose K, Matsunaga T
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131000
• [学会発表] Guiding the differentiation of human induced pluripotent stem cells into definitive endoderm using a combination of small-molecule compounds (2013)
  • 著者名/発表者名: Ogihara R, Kondo Y, Iwao T, Yamaori S, Ohmori S, Nakamura K, Matsunaga T
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131000
• [学会発表] Expectation toward human iPS cells as a good tool to use for examination of pharmacokinetics (2013)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131000
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞の肝細胞への分化における変法L-15 培地及び血清の効果 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀, 近藤祐樹, 荻原留理, 岩尾岳洋, 永田 清, 黒瀬光一, 堀川隆司, 丹羽卓朗, 山折 大, 大森 栄, 中村克徳
  • 学会等名: フォーラム2013 : 衛生薬学・環境トキシコロジー
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20130900
• [学会発表] 再生医療・創薬研究の新規材料として期待されるiPS 細胞 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀
  • 学会等名: 平成25年度製剤機械技術学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130600
• [学会発表] ヒトiPS 細胞由来腸管上皮細胞様細胞におけるUDP-グルクロン酸転移酵素の発現解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 畠山和久, 埴岡伸光, 黒瀬光一, 松永民秀, 成松鎭雄
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20130300
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞の肝細胞への分化における変法L-15 培地及び血清の効果 (2012)
  • 著者名/発表者名: 吉橋幸美, 近藤祐樹, 三森佳代, 荻原留理, 岩尾岳洋, 金濱吉範, 牧与志幸, 松永民秀
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20121200
• [学会発表] ヒトiPS 細胞由来肝細胞の剥離・凍結保存法の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三森佳代, 近藤祐樹, 吉橋幸美, 荻原留理, 岩尾岳洋, 松永民秀
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20121200
• [学会発表] ペプチド輸送機能を有するヒトiPS 細胞由来腸管細胞の作製 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岩尾岳洋, 中村克徳, 永田 清, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第27回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20121100
• [学会発表] 低分子化合物はヒト人工多能性幹細胞から肝細胞への分化を促進する (2012)
  • 著者名/発表者名: 近藤祐樹, 岩尾岳洋, 吉橋幸美, 三森佳代, 杉山留理, 佐々木崇光, 永田 清, 黒瀬光一, 丹羽卓朗, 山折 大, 大森 栄, 中村克徳, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第27回年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20121100
• [学会発表] Differentiation into functional enterocyte-like cells from human induced pluripotent stem cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Iwao T, Nagata K, Matsunaga T
  • 学会等名: 19th Microsomes and Drug Oxidations (MDO) and 12th European Regional International Society for the Study of Xenobiotics (ISSX) Meeting
  • 発表場所: Noordwijk aan Zee, The Netherlands
  • 年月日: 20120600
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞から分化させた肝細胞様細胞による薬物代謝酵素の酵素誘導評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村克徳, 近藤祐樹, 杉山留理, 相川香織, 松永民秀, 大森 栄
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞から肝細胞への分化に対する低分子化合物の効果 (2011)
  • 著者名/発表者名: 近藤祐樹, 杉山留理, 三森佳代, 吉橋幸美, 岩尾岳洋, 黒瀬光一, 松永民秀
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111200
• [学会発表] Effect of quercetin on differentiation into hepatocyte-like cells from human induced pluripotent stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 近藤祐樹, 岩尾岳洋, 斎藤昌良, 丹羽卓朗, 黒瀬光一, 永田 清, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第26回年会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111100
• [学会発表] Differentiation into the enterocyte-like cells from human induced pluripotent stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 岩尾岳洋, 永田 清, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第26回年会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111100
• [学会発表] Enzymatic properties of cynomolgus monkey and marmoset CYP2B6s : Comparison with human CYP2B6 (2011)
  • 著者名/発表者名: Mayumi K, Hanioka N, Masuda K, Koeda A, Naito S, Miyata A, Narimatsu S
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第26回年会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111100
• [学会発表] Expression of CYP and UGT mRNAs in human induced pluripotent stem cell-derived hepatocyte-like cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Hanafusa H, Matsunaga T, Kurose K, Saito Y, Hanioka N, Narimatsu S
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第26回年会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111100
• [学会発表] ヒト組織由来iPS 細胞の樹立とその機能評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤大介, 張本伸彦, 前田 徹, 松永民秀
  • 学会等名: 日本薬学会東海支部合同学術大会2011
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20110700
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞からの肝細胞への効率的な分化方法の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 近藤祐樹, 岩尾岳洋, 三森佳代, 吉橋幸美, 大森 栄, 松永民秀
  • 学会等名: 第57回日本薬学会東海支部総会・大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20110700
• [学会発表] ヒト iPS 細胞の肝細胞様細胞への分化と薬物代謝酵素の発現 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松永民秀, 近藤祐樹, 岩尾岳洋, 大森 栄
  • 学会等名: 日本法中毒学会第30年会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 20110600
• [学会発表] ヒト iPS 細胞由来分化肝細胞様細胞におけるCYP及びUGT mRNA発現解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 花房弘之, 埴岡伸光, 松永民秀, 成松鎭雄
  • 学会等名: 第52回日本生化学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20110500
• [学会発表] マイクロ空間プレートを用いた 3次元培養 HepG2 細胞における UGT 発現解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊豆野祥太郎, 埴岡伸光, 江尻洋子, 細田雅也, 内藤真策, 成松鎭雄
  • 学会等名: 第52回日本生化学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20110500
• [産業財産権] 人工多能性幹細胞を肝細胞へ分化誘導する方法 (2012)
  • 発明者名: 松永民秀, 岩尾岳洋, 近藤祐樹, 吉橋幸美
  • 権利者名: 公立大学法人名古屋市立大学
  • 産業財産権種類: 特願
  • 産業財産権番号: 2012-247010
  • 出願年月日: 2012-11-09