下垂体隆起葉に発現する新規代謝型受容体とスプライシング変異による分泌蛋白の解析

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23390045
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生理学一般
• 研究機関: 生理学研究所
• 研究代表者: 久保 義弘 生理学研究所, 分子生理研究系, 教授 (80211887)
• 研究協力者: 山本 泉 生理学研究所, ポスドク研究員 ; 山本 友美 生理学研究所, 技術職員 ; 宮川 剛 藤田保健衛生大学, 教授 ; 服部 聡子 藤田保健衛生大学, 助教 ; 岡戸 晴生 東京都医学総合研究所, 副参事研究員 ; 西藤 泰昌 東京都医学総合研究所, 技術スタッフ ; 渡辺 雅彦 北海道大学, 大学院・医学系研究科, 教授 ; 今野 幸太郎 北海道大学, 大学院・医学系研究科, 助教 ; 平林 真澄 生理学研究所, 准教授 ; 三宝 誠 生理学研究所, 技術職員 ; 深田 正紀 生理学研究所, 教授 ; 深田 優子 生理学研究所, 准教授 ; 横井 紀彦 生理学研究所, 特任助教 ; 崎村 建司 新潟大学脳研究所, 教授 ; 周 麗 新潟大学脳研究所, ポスドク研究員 ; 夏目 理恵 新潟大学, 脳研究所, 技術職員
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 生理学 / 神経科学 / 生体分子 / 代謝型受容体 / オーファン

研究概要

Prrt3 は、オーファン代謝型受容体である。我々は、分子機能の解明に向けて、ノックアウト(KO)マウスを作製した。KOホモは低い生存率を示し数の確保が困難だったため、KOヘテロを用いて行動解析を行ったところ、空間学習記憶の長期保持、恐怖条件付け記憶の長期保持に低下がみられた。特異抗体を作成し、脳内発現パターンを解析したところ、視床、大脳皮質、海馬、黒質等で、強い発現が見られた。海馬での発現パターンから、Prrt3タンパク質は、細胞体ではなく神経突起に発現していることが示された。特異抗体を用いたwestern blot 解析から、N末端細胞外領域が切断されたタンパク質が存在することが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Analyses of the effects of Gq protein on the activated states of the muscarinic M3 receptor and the purinergic P2Y1 receptor (2013)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 雑誌名: Physiological Reports 巻: 1(5) ページ: e00134
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of Gq protein stabilizes the activated state of the muscarinic receptor type 1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 雑誌名: Neuropharmacology 巻: 65 ページ: 173-181
  • 査読あり
• [雑誌論文] KCNQ1 subdomains involved in KCNE modulation revealed by an invertebrate KCNQ1 orthologue (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakajo K, Nishino A, Okamura Y, Kubo Y
  • 雑誌名: Journal of General Physiology 巻: 138 ページ: 521-535
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nano-environmental changes by KCNE proteins modify KCNQ channel function (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakajo K, Kubo Y
  • 雑誌名: Channels 巻: 5 ページ: 397-401
  • 査読あり
• [雑誌論文] The intra-molecular activation mechanisms of the dimeric metabotropic glutamate receptor 1 differ depending on the type of G proteins (2011)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 雑誌名: Neuropharmacology 巻: 61 ページ: 832-841
  • 査読あり
• [学会発表] Comprehensive behavioral battery analyses of the gene targeted mice of prrt3, an orphan metabotropic receptor (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto T, Hattori S, Kiyonari H, Nakao K, Miyakawa T, Kubo Y
  • 学会等名: 第91回日本生理学会大会
  • 発表場所: 鹿児島大学郡元キャンパス, 鹿児島県
  • 年月日: 2014-03-16
• [学会発表] Expression patterns of an orphan metabotropic receptor Prrt3 in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto I, Konno K, Yamamoto T, Watanabe M, Kubo Y
  • 学会等名: 第91回日本生理学会大会
  • 発表場所: 鹿児島大学郡元キャンパス, 鹿児島県
  • 年月日: 2014-03-16
• [学会発表] Stabilizing effects of G protein on the active conformation of the adenosine receptor type1a differ depending on the type of G protein (2014)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 学会等名: 第91回日本生理学会大会
  • 発表場所: 鹿児島大学郡元キャンパス, 鹿児島県
  • 年月日: 2014-03-16
• [学会発表] Binding of the Gq protein stabilizes the active conformation of the M1R and M3R, but not of P2Y1R (2013)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: タワーホール船堀, 東京都
  • 年月日: 2013-03-28
• [学会発表] Effects of the Gq coupling on the activated states of the receptor differ depending on the type of the receptors (2012)
  • 著者名/発表者名: Tateyama M, Kubo Y
  • 学会等名: 第35回日本神経科学大会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場, 愛知県
  • 年月日: 2012-09-18