革新的新規治療法開発のための基盤創出-消化器癌幹細胞と宿主細胞の再プログラム

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23390199
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 石井 秀始 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座教授 (10280736)
• 研究分担者: 森 正樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (70190999)
• キーワード: 癌幹細胞 / マイクロRNA / ニッチ / 消化器癌

研究概要

国民の悲願である消化器癌の克服に向けて、外科学を最大の武器とし、新技術(体細胞リプログラミング)を革新的な癌の診断・治療法の開発に応用し、その実現へ向けて基盤を構築することにより、新世紀に相応しい医学の進歩に大きく貢献することが目的であり意義である。2本の骨子から成る計画を実施した。1)革新的・低侵襲の癌治療法の開発:革新的な消化器癌医療の具現化を目指して、新しいリプログラミング技術を導入し、新規の癌治療法を開発。癌幹細胞および免疫担当細胞等の宿主細胞を標的化。2)臨床応用に向けた基盤構築:小動物実験を経て将来の臨床試験に向けて基盤を構築。初年度は、癌細胞側と宿主側の双方を標的とした新しい医療の創出を目指して、試験管内実験と動物実験を有機的に組み合わせて未来医療の基盤の構築を目指した。【成果】1)「消化器癌幹細胞(CSC)」に対するリプログラミング(RP)。試験管内実験として上細胞株および新鮮臨床材料から消化器癌幹細胞(CSC)を精製、ゲノム挿入変異がないセンダイウイルス・合成オリゴマイクロRNAによりRPの詳細な実験した。その結果、癌幹細胞分画は活性酸素の濃度が低く、リプログラミングに適した細胞内環境であることが明らかとなった。動物実験として免疫不全マウスの同所移植および異所移植を実施。既知の癌遺伝子群、癌抑制遺伝子群の網羅的PATHWAY解析をqRCR、蛋白質から分子機構を究明した。高感度のゲルプロテオミクス解析の結果、リプログラミング効率を格段に向上させるための鍵分子を同定した。2)ゲノム変異のないマイクロRNA単独によるRP。高精度の誘導条件として時系列に動態を検討し、癌細胞および宿主細胞に対する最適の誘導条件を明らかにした。血清中のTGFbの濃度を低く保つまたは阻害することが上皮間葉系転換を抑制してリプログラミング効率を向上させた。標的となる下流遺伝子群の解明した。癌遺伝子-rasと癌抑制遺伝子p53の重要性を明らかにした。マイクロRNAの作用が収束される重要なハブ因子を同定し、miPS誘導に関わる新たなネットワーク解析を実施し候補分子を同定した。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

低酸素応答を含めて癌幹細胞の代謝特性を究明するための新規分子探索な順調に推移し、標的シーズまで開発が進捗している。

今後の研究の推進方策

癌幹細胞の代謝特性の国際競争はきわめて激しいので、計画に沿ってぶれる事なく迅速に目標を達成する。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of recurrence-related microRNAs in the bone marrow of breast cancer patients (2011)
  • 著者名/発表者名: Ota, D., Mimori, K., Yokobori, T., Iwatsuki, M., Kataoka, A., Masuda, N., Ishii, H., Ohno, S., Mori, M
  • 雑誌名: Int. J. Oncol 巻: 38(4) ページ: 955-962
  • DOI: 10.3892/ijo.2011.926
• [雑誌論文] The future prospects and subject of the liver cancer stem cells study for the clinical application (2011)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi N., Ishii H., Nagano H., Doki Y., Mori M.
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: (Epub)
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA-125a-5p is an independent prognostic factor in gastric cancer, and inhibits the proliferation of human gastric cancer cells in combination with trastuzumab (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishida N, Mimori K, Fabbri M, Yokobori T, Sudo T, Tanaka F, Shibata K, Ishii H, Doki Y, Mori M
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 巻: 1;17 ページ: 2725-2733
  • DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-10-2132
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combination use of anti-CD133 antibody and SSA lectin can effectively enrich cells with high tumorigenicity (2011)
  • 著者名/発表者名: Moriwaki K, Okudo K, Haraguchi N, Takeishi S, Sawaki H, Narimatsu H, Tanemura M, Ishii H, Mori M, Miyoshi E
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 102 ページ: 1164-70
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2011.01923.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gain-of-function oncogenic mutations in TP53 enhance defined factor-mediated cellular reprogramming (2011)
  • 著者名/発表者名: Moon JH., Ishii H., Dewi DL., Kano Y., Yamamoto K., Nishikawa S., Fujiwara Y., Doki Y., Mori M.
  • 雑誌名: Nat Preceding
  • DOI: 10.1038/npre.2011.5681.1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Absence of CD71 transferrin receptor characterizes human gastric adenosquamous carcinoma stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohkuma M., Haraguchi N., Ishii H., Mimori K., Tanaka F., Kim HM., Shimomura M., Hirose H., Yanaga K., Mori M.
  • 雑誌名: Ann Surg.Oncol 巻: (Epub)
  • DOI: 10.1245/s10434-011-1739-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance of Lgr5(+ve) Cancer Stem Cells in the Colon and Rectum (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Ishii H, Nishida N, Takemasa I, Mizushima T, Ikeda M, Yokobori T, Mimori K, Yamamoto H, Sekimoto M, Doki Y, Mori M.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 18 ページ: 1166-1174
  • DOI: 10.1245/s10434-010-1373-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] STC2 : A Predictive Marker for Lymph Node Metastasis in Esophageal Squamous-Cell Carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Kita Y, Mimori K, Iwatsuki M, Yokobori T, Ieta K, Tanaka F, Ishii H, Okumura H, Natsugoe S, Mori M
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 18 ページ: 261-272
  • DOI: 10.1245/s10434-010-1271-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] The significance of PITX2 overexpression in human colorectal cancer (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirose H., Ishii H., Mimori K., Tanaka F., Takemasa I., Mizushima T., Ikeda M., Yamamoto H., Sekimoto Doki, Y., Mori, M.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 18 ページ: 3005-3012
  • DOI: 10.1245/s10434-011-1653-z
  • 査読あり
• [学会発表] 肝臓癌幹細胞の分離・同定と治療標的化へ向けた検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口直紹, 石井秀始, 永野浩昭, 土岐祐一郎, 森正樹
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会学術集会
  • 発表場所: 京都市国際交流会館(京都府)
  • 年月日: 2011-06-26
• [学会発表] 癌・固形腫瘍の診断・治療 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石井秀始、大重英行
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会学術集会
  • 発表場所: 京都市国際交流会館(京都府)
  • 年月日: 2011-06-25
• [学会発表] 転移性大腸癌患者における骨髄中細胞の分画分析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山下晋也, 石井秀始, 山本浩文, 三森功士, 友國晃, 西田尚弘, 原口直紹, 西村潤一, 竹政伊知郎, 水島恒和, 池田正孝, 関本貢嗣, 土岐祐一郎, 森正樹
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会学術集会
  • 発表場所: 京都市国際交流会館(京都府)
  • 年月日: 2011-06-25
• [学会発表] 肝細胞癌の再発・転移を制御するmicroRNAの探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 友國晃, 三森功士, 和田浩志, 小林省吾, 丸橋繁, 江口英利, 種村匡弘, 石井秀始, 永野浩昭, 土岐祐一郎, 森正樹
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会学術集会
  • 発表場所: 京都市国際交流会館(京都府)
  • 年月日: 2011-06-25