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2011 年度 実績報告書

微小重力環境を用いた下垂体幹細胞の培養技術の開発―人工下垂体への応用を目指して

研究課題

研究課題/領域番号 23390350
研究機関広島大学

研究代表者

栗栖 薫  広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 教授 (70201473)

研究分担者 富永 篤  広島大学, 病院, 講師 (60274049)
弓削 類  広島大学, 保健学研究科, 教授 (20263676)
濱 聖司  広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 研究員 (40397980)
西本 武史  広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 研究員 (40450580)
キーワード微小重力環境 / 下垂体腫瘍 / 幹細胞 / primary culture / 下垂体ホルモン
研究概要

本年度の目標として、下垂体幹細胞の手法の確立がある。そこで、ラット培養細胞を無血清培地で培養してみた。すると細胞塊(sphere)は形成され、ホルモン産生能の低下を示した。しかし、他のホルモン産生細胞への分化はされなかった。つぎに3Dクリノスタットを用いた微小重力環境(0G)下と通常の環境(1G)で培養した下垂体細胞(ラット下垂体腺腫培養細胞GH3、ATt-20)が、生物学的に変化するかどうかについて、検討した。すると、ホルモン産生能や細胞分裂能において、有意な差を認めなかった。そこで、現在、細胞濃度や微小重力環境の期間を調整するなどの再検討をおこなっているところである。
同時に下垂体腺腫の手術摘出組織から下垂体幹細胞の培養手法の確立を目指している。良性腫瘍である下垂体腺腫はprimary cultureが一般的に難しいとされているが、現在、効率的な細胞の解離・回収が可能となり、pirmary cultureの手技が確立されつつある。
また、下垂体の分化過程に関係あるとされるLIF(leukemia inhibitor factor)のヒト下垂体における役割を検討した。するとLIFによりプロラクチンの産生が抑制されていることがわかり、非機能性下垂体腺腫における高プロラクチン血症は、LIFが関与している可能性が示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

浮遊系細胞である下垂体腺腫細胞の効率的な分離培養が接着系細胞と比べ、技術的に困難な点があるため。

今後の研究の推進方策

幹細胞の分離をCell lineを用いた培養と手術摘出組織からprimary cultureを継代した系の両面から行う。微小重力環境をもちいて、効率的な幹細胞の採取をおこない、FACS(Fluorescence-activated cell sorting)をもちいたソーティングをおこなう。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2011 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] Masked hyperprolactinemia: tumor-derived factors inhibiting prolactin secretion caused by pituitary-stalk damage.2011

    • 著者名/発表者名
      Kinoshita Y
    • 雑誌名

      J Clin Neurosci.

      巻: 18(12) ページ: 1651-1655

    • DOI

      10.1016/j.jocn.2011.03.029

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Post-operative hyponatremia in patients with pituitary adenoma: post-operative management with a uniform treatment protocol.2011

    • 著者名/発表者名
      Kinoshita Y
    • 雑誌名

      Endocr J.

      巻: 58(5) ページ: 373-379

    • DOI

      10.1507/endocrj.K10E-352

    • 査読あり
  • [学会発表] 先端巨大症の父親をもち GH 基礎値が低値にもかかわらず高 IGF-I 血症を示す一例

    • 著者名/発表者名
      碓井 智
    • 学会等名
      第7回アクロメガリー フォーラム
    • 発表場所
      東京
  • [学会発表] TSH産生下垂体腺腫の特徴と問題点

    • 著者名/発表者名
      碓井 智
    • 学会等名
      日本脳神経外科学会 第70回学術総会
    • 発表場所
      横浜
  • [学会発表] 非機能性下垂体腺腫におけるFSH分泌能の検討

    • 著者名/発表者名
      碓井 智
    • 学会等名
      第84回日本内分泌学会学術総会
    • 発表場所
      神戸
  • [学会発表] 再発した鞍上部くも膜嚢胞の一例

    • 著者名/発表者名
      碓井 智
    • 学会等名
      第18回日本神経内視鏡学会
    • 発表場所
      岡山

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公開日: 2014-07-24  

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