免疫寛容という立場から正常妊娠、異常妊娠を再考する

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23390386
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 齋藤 滋 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教授 (30175351)
• 研究分担者: 瀧澤 俊広 日本医科大学, 医学(系)研究科(研究部), 教授 (90271220) ; 田渕 圭章 富山大学, 生命科学先端研究センター, 准教授 (20322109)
• キーワード: 流産 / 妊娠高血圧症候群 / 制御性T細胞 / 制御性NK細胞 / 妊娠維持機構 / miRNA / 胎盤 / 早産

研究概要

異物である胎児を許容するため、制御性T細胞(Treg)が重要であることは知られているが、これまで父親抗原特異的Tregについては十分に検討されてこなかった。我々は独自に父親抗原特異的Treg(PA-Treg)に同定するシステムを構築した。マウスの系において、(1)PA-Tregは着床する前に、すでに子宮の領域リンパ筋に集族していること、(2)着床すると直ちに子宮へ移動すること、(3)精嚢腺除去したマウスでは精漿がないが精子が存在するため妊娠するが、妊娠効率が悪く、PA-Tregが子宮領域リンパ節や妊娠子宮に集族しないことを見い出した。さらにPA-TregにはCCR4、CCR5を高発現することを見い出した。(4)Treg以外に妊娠子宮に増加するCD25+NK細胞が樹状細胞(DC)上のMHC classII抗原発現を減弱させ、MLR反応を減少させることを発見した。流産マウスNK細胞ではstathminlが低下していることを証明した。
ヒトの臨床検体において流産を胎児染色体正常と異常に大別したところ、(1)Tregは胎児染色体正常例で著しく減少していたこと、(2)着床近傍部で特に胎児染色体正常例ではTreg細胞が減少していたことから、免疫異常が正常胎児を流産に陥らせている可能性を示した。(3)また妊娠高血圧腎症(PE)ではトレランスを誘導するgalectin1発現が末梢血T細胞、甑細胞で減少していること、(4)PEではCD25^+Foxp3^+TregもCD25-Foxp3^+Tregも減少すること、(5)PEでは児の性別が女児であることが多いこと、(6)双胎では胎児抗原量が2倍になるためPEのリスクが高まること、(7)PEではNK細胞のgranulysinが増加しTh1型免疫となること、(8)肥満例ではNK細胞、T細胞中のgranulysinが増加してTh1型免疫となっていることを見い出した。つまリヒト流産でも胎児染色体が正常であれば免疫が関与する流産が存在すること、妊娠高血圧腎症では胎児許容機構が破綻していることが明らかとなった。さらにナノシリカが自然免疫を活性化させ、流産・死産、IUGRをきたすこともマウスモデルで明らかにした。(8)分娩前の妊婦の単核球、NK細胞において胎盤特異的miRNAが検出され、分娩後4日目には、これら細胞において検出量が有意に低下または消失し、クリアランスされることがわかった。一方、Treg細胞では、胎盤特異的miRNAの取り込みがほとんど認められなかった。胎盤由来のmiRNAがNK細胞に取り込まれ、その遺伝子制御に関わる可能性を示唆する新知見を得た。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

マウスの実験で精漿のプライミングが父親抗原特異的トレランスに必要という新知見を得ることができた。またヒトを用いた臨床例においても、胎児染色体正常例流産でのTregの減少や妊娠高血圧腎症でのトレランスの破綻を明らかにすることができた。

今後の研究の推進方策

現在、父親抗原特異的TregとCD25^+NK細胞の純化を行っており、細胞をストックしている。mRNA発現をアレイ解析する目前まで達している。また流産例脱落膜、末梢血からT細胞、NK細胞を分離している状態にある。2～3ヶ月後にはmiRNAの発現パターンを網羅的に行い、胎盤由来のmiRNAが取り込まれていないかを検討する状態にある。またアレー解析の結果から、ヒトにおいても、父親抗原特異的Tfeg細胞を同定するマーカーを本年度中に行ない、臨床評価する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Depletion of Invariant NKT Cells Reduces Inflammation-Induced Preterm Delivery in Mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Li LP, Fang YC, Dong GF, Lin Y, Saito S
  • 雑誌名: J Immunol 巻: (in press)
  • DOI: doi:10.4049/jimmunol.1102628
  • 査読あり
• [雑誌論文] The frequency of peripheral blood CD4+CD25high FoxP3+ and CD4+CD25-FoxP3+ regulatory T cells in normal pregnancy and preeclampsia (2012)
  • 著者名/発表者名: Toldi G., Saito S, Shima T., Halmos A., Veresh Z., Vasarhelyi B., Rigo J., Molvarec A.
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol. 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] The balance of the immune system between T cells and NK cells in miscarriage (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakashima A, Shima T, Inada K, Ito M, Saito S
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol. 巻: 67 ページ: 304-310
  • DOI: doi:10.1111/j.1600-0897.2012.01115.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of DNA-dependent protein kinase promotes ultrasound-induced cell death including apoptosis in human leukemia cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Furusawa Y, Fujiwara Y, Hassan MA, Tabuchi Y, Morita A, Enomoto A, Kondo T
  • 雑誌名: Cancer Lett. 巻: (in press)
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2012.02.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] TGF-beta-activated kinase 1 promotes cell cycle arrest and cell survival of X-ray-irradiated HeLa cells dependent on p21 induction but independent of NF-kB, p38 MAPK and ERK phosphorylations (2012)
  • 著者名/発表者名: Furusawa Y, Wei ZL, Sakurai H, Tabuchi Y, Li P, Zhao QL, Nomura T, Saiki I, Kondo T
  • 雑誌名: Rad.Research 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gene networks related to the cell death elicited by hyperthermia in human oral squamous cell carcinoma HSC-3 cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi Y, Wada S, Furusawa Y, Ohtsuka K, Kondo T
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 巻: 29 ページ: 380-386
  • DOI: doi:10.3892/ijmm.2011.862.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Micro array and Gene Ontology analyses reveal downregulation of DNA repair and apoptotic pathways in diethylstilbestrol-exposed testicular Leydigcells (2012)
  • 著者名/発表者名: Warita K, Mitsuhashi T, Tabuchi Y, Ohta K, Suzuki S, Hoshi N, Miki T, Takeuchi Y
  • 雑誌名: J.Toxicol.Sci. 巻: 37 ページ: 287-295
  • DOI: doi:10.2131/jts.37.287
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitochondria-Targeted Superoxide Dismutase (SOD2) Regulates Radiation Resistance and Radiation Stress Response in HeLa Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Hosoki A, Yonekura s, Zhao QL, Wei ZL, Takasaki I, Tabuchi Y, Wang LL, Hasuike S, Nomura T, Tachibana A, Hashiguchi K, Yonei S, Kondo T, Zhang-Akiyama QM
  • 雑誌名: J Radiat Res (Tokyo) 巻: 53 ページ: 58-71
  • DOI: doi:10.1269/jrr.11034
  • 査読あり
• [雑誌論文] DNA double-strand breaks induced by cavitational mechanical effects of ultrasound in cancer cell lines (2012)
  • 著者名/発表者名: Furusawa Y, Fujiwara Y, Campbell P, Zhao QL, Ogawa R, Ali Hassan M, Tabuchi Y, Takasaki I, Takahashi A, Kondo T
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e29012
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0029012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of checkpoint kinase 1 abrogates G2/M checkpoint activation and promotes apoptosis under heat stress (2012)
  • 著者名/発表者名: Furusawa Y, Iizumi T, Fujiwara Y, Zhao QL, Tabuchi Y, Nomura T, Kondo T
  • 雑誌名: Apoptosis 巻: 17 ページ: 102-112
  • DOI: doi:10.1007/s10495-011-0660-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hydroxysteroid (17-β)dehydrogenase 1 is dysregulated by miR-210 and miR-518c that are aberrantly expressed in preeclamptic placentas : a novel marker for predicting preeclampsia (2012)
  • 著者名/発表者名: Osamu Ishibashi
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 59 ページ: 265-273
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.111.180232
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduced stathmin-1 expression in NK cells associated with spontaneous abortion (2011)
  • 著者名/発表者名: Lin Y., Li C., Shan B., Wang W., Saito S., Xu J., Di J., Zhong Y., Li D.J.
  • 雑誌名: Am J Pathol. 巻: 178 ページ: 506-514
  • DOI: doi:10.1016/j.ajpath.2010.10.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction of exact delivery time in patients with preterm labor and intact membranes at admission by amniotic fluid interleukin-8 level and preterm labor index (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoneda S., Shiozaki A., Shima T., Ito M., Yamanaka M., Hidaka T., Sumi S., Saito S.
  • 雑誌名: J Obstet Gynecol.Res. 巻: 37 ページ: 861-866
  • DOI: doi:10.1111/j.1447-0756.2010.01453.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peripheral blood galectin-1-expressing T and natural killer cells in normal pregnancy and preeclampsia (2011)
  • 著者名/発表者名: Molvarec A, Blois M S, Stenczer B, Toldi G, Tirado-Gonzalez I, Ito M, Shima T, Yoneda S, Vasarhelyi B, Rigo J., Saito S
  • 雑誌名: Clin.Immunol 巻: 139 ページ: 48-56
  • DOI: 10.1016/j.clim.2010.12.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Silica and titanium dioxide nanoparticles cause pregnancy complications in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamashita K., Yoshioka Y., Higashisaka K., Mimura K., Morishita Y., Nozaki M., Yoshida T., Ogura T., Nabeshi H., Nagano K., Abe Y., Kamada H., Monobe Y., Imazawa T., Aoshima H., Shishido K., Kawai Y., Mayumi T., Tsunoda S., Itoh N., Yoshikawa T., Yanagihara I., Saito S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Nature Nanotechnology 巻: 6 ページ: 321-328
  • DOI: doi:10.1038/NNANO.2011.41
  • 査読あり
• [雑誌論文] Future directions of studies for recurrent miscarriage associated with immune etiologies (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito S., Nakashima A., Shima T.
  • 雑誌名: J Reprod Immunol. 巻: 90 ページ: 91-95
  • DOI: 10.1016/j.jri.2011.03.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of fetal sex on pregnancy-induced hypertension/pre-eclampsia in Japan (2011)
  • 著者名/発表者名: Shiozaki A., Matsuda Y., Satoh S., Saito S.
  • 雑誌名: J Reprod Immunol. 巻: 89 ページ: 133-139
  • DOI: 10.1016/j.jri.2010.12.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased prevalence of peripheral blood granulysin-producing cytotoxic T lymphocytes in preeclampsia (2011)
  • 著者名/発表者名: Molvarec A., Shiozaki A., Ito M., Toldi G., Stenczer B., Szarka A., Nakashima A., Vasarhelyi B., Rigo J.Jr., Saito S.
  • 雑誌名: J Reprod Immunol. 巻: 91 ページ: 56-63
  • DOI: 10.1016/j.jri.2011.03.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical implication of recent advances in our understanding of IL-17 and reproductive immunology (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito S, Nakashima A, Ito M, Shima T
  • 雑誌名: Expert Rev Clin Immunol. 巻: 7 ページ: 649-657
  • DOI: doi:10.1586/ECI.11.49
  • 査読あり
• [雑誌論文] First trimester pregnancy decidual natural killer cells contain and spontaneously release high quantities of granulysin (2011)
  • 著者名/発表者名: Vujaklija DV, Gulic T, Sucic S, Nagata K, Ogawa K, Laskarin G, Saito S, Haller H, Rukavina D
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol. 巻: 66 ページ: 363-372
  • DOI: doi:10.1111/j.1600-0897.2011.01015.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increase in the plasma levels of protein Z-dependent protease inhibitor in normal pregnancies but not in non-pregnant patients with unexplained recurrent miscarriage (2011)
  • 著者名/発表者名: Souri M, ugiura-Ogasawara M, Saito S, Kemkes-Matthes B, Meijers J, Ichinose A
  • 雑誌名: Thromb Haemost. 巻: 107 ページ: 507-512
  • DOI: 10.1160/TH11-08-0591
  • 査読あり
• [雑誌論文] Silencing heat shock transcription factor 1 using small interfering RNA enhances heat stress sensitivity in human oral squamous carcinoma cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi Y., Furusawa Y., Wada S., Ohtsuka K., Kondo T.
  • 雑誌名: Thermal Med. 巻: 27 ページ: 99-108
  • 査読あり
• [雑誌論文] Distinct Roles of Transforming Growth Factor-{beta}-activated Kinase 1 (TAK1)-c-Rel and Interferon Eegulatory Factor 4 (IRF4) Pathways in Human T Cell Lymphotropic Virus 1-transformed T helper 17 Cells Producing Interleukin-9 (2011)
  • 著者名/発表者名: Refaat A, Zhou Y, Suzuki S, Takasaki I, Koizumi K, Yamaoka S, Tabuchi Y, Saiki I, Sakurai H
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 286 ページ: 21092-9
  • DOI: DOI10.1074/jbc.M110.200907
  • 査読あり
• [雑誌論文] Telmisartan Improves Insulin Resistance and Modulates Adipose Tissue Macrophage Polarization in High-Fat-Fed Mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujisaka S, Usui I, Kanatani Y, Ikutani M, Takasaki I, Tsuneyama K, Tabuchi Y, Bukhari A, Yamazaki Y, Suzuki H, Senda S, Aminuddin A, Nagai Y, Takatsu K, Kobayashi M, Tobe K
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 152 ページ: 1789-1799
  • DOI: doi:10.1210/en.2010-1312
  • 査読あり
• [学会発表] Regulatory T cells and regulatory NK cells play very important role for maintenance of pregnancy (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito S.
  • 学会等名: Australian Society for Immunology International Conference
  • 発表場所: Adelaide(招待講演)
  • 年月日: 20111211-20111215
• [学会発表] 制御性T細胞は精漿のプライミングにより子宮内に増加し,着床および初期の妊娠維持に重要な役割を果たす (2011)
  • 著者名/発表者名: 島友子, 稲田貢三子, 中島彰俊, 齋藤滋
  • 学会等名: 第56回日本生殖医学会学術講演会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111208-20111209
• [学会発表] オートファジーの胎盤形成および妊娠高血圧症候群への関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊, 島友子, 稲田貢三子, 塩崎有宏, 齋藤滋
  • 学会等名: 第26回日本生殖免疫学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20111202-20111203
• [学会発表] 精漿によるプライミングにより着床直前から父親抗原特異的制御性T細胞が増加する (2011)
  • 著者名/発表者名: 島友子, 稲田貢三子, 中島彰俊, 齋藤滋
  • 学会等名: 第26回日本生殖免疫学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20111202-20111203
• [学会発表] The balance of immune system between Treg cells and NK cells in spontaneous abortion (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakashima T., Shima T., Inada K., Saito S.
  • 学会等名: The First Clinical Reproductive Immunology Symposium, American Society for Eeproductive Immunology
  • 発表場所: Providence(招待講演)
  • 年月日: 20111118-20111120
• [学会発表] 可溶型エンドリンによるオートファジー抑制を介した妊娠高血圧症候群発症への関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊, 島友子, 稲田貢三子, 齋藤滋
  • 学会等名: 第32回日本妊娠高血圧学会
  • 発表場所: 石川(学術奨励賞)
  • 年月日: 20111021-20111022
• [学会発表] シンポジウム「胎盤にかかわる免疫の関与」オートファジーから見た胎盤形成と妊娠高血圧症候群との関連性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊, 島友子, 稲田貢三子, 齋藤滋
  • 学会等名: 第19回日本胎盤学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110930-20111001
• [学会発表] シンポジウム「細胞内ロジスティックスの融合研究」オートファジーの胎盤形成および妊娠高血圧症候群への関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊, 島友子, 稲田貢三子, 齋藤滋
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20110921-20110924
• [学会発表] 母体背景,新生児予後の観点から見た単胎例における妊娠高血圧と妊娠高血圧腎症との相違点-日産婦DBからの解析- (2011)
  • 著者名/発表者名: 塩崎有宏, 松田義雄, 佐藤昌司, 齋藤滋
  • 学会等名: 第32回日本妊娠高血圧学会学術集会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 20110921-20110922
• [学会発表] 妊娠高血圧症候群ならびに妊娠高血圧腎症に与える胎児性別の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 塩崎有宏, 齋藤滋, 松田義雄
  • 学会等名: 第63回日本産科婦人科学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110829-20110831
• [学会発表] シンポジウム「流産の原因と対策」免疫学的異常による流産原因の解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊
  • 学会等名: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110829-20110831
• [学会発表] 妊娠時における父親抗原特異的制御性T細胞の変動とその役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 島友子, 稲田貢三子, 中島彰俊, 齋藤滋
  • 学会等名: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110829-20110831
• [学会発表] 可溶型エンドリンによるオートファジーを介した胎盤形成不全への関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島彰俊, 島友子, 稲田貢三子, 齋藤滋
  • 学会等名: 第16回日本病態プロテアーゼ学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110826-20110827
• [学会発表] 厚生労働研究『早産・低出生体重児増加要因の分析とその結果に基づく予知・予防対策に関する研究』(岡井班内斎藤班):日本における妊娠34週未満の早産予知因子の検討-多施設共同前方視的早産研究- (2011)
  • 著者名/発表者名: 塩崎有宏
  • 学会等名: 第47回日本周産期・新生児医学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20110710-20111012
• [学会発表] To detect intrauterine inflammation and to evaluate intra-amniotic infection predict the prognosis of preterm labor cases (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito S., Yoneda S., Yoneda N.
  • 学会等名: 31^<st> Annual Meeting of The American Society for Eeproductive Immunology
  • 発表場所: Salt Lake City(招待講演)
  • 年月日: 20110519-20110522
• [学会発表] 胎児染色体正常流産例では,着床部において制御性T細胞(Treg)が有意に低下する (2011)
  • 著者名/発表者名: 稲田貢三子, 島友子, 中島彰俊, 齋藤滋
  • 学会等名: 第26回日本生殖免疫学学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-12-03
• [学会発表] エクソソームmicroRNAを介した胎盤-リンパ球間コミュニケーション:培養細胞を用いたモデル解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 瀧澤俊広
  • 学会等名: 第26回日本生殖免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: ウィンクあいち(名古屋)
  • 年月日: 2011-12-03
• [学会発表] 胎盤特異的microRNA (2011)
  • 著者名/発表者名: アリ モハメド
  • 学会等名: 第56回日本人類遺伝学会
  • 発表場所: 幕張メッセ(千葉)
  • 年月日: 2011-11-10
• [学会発表] 妊娠高血圧腎症(preeclampsia)の病態と予測因子 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋, 中島彰俊, 塩崎有宏, 佐々木泰, 島友子, Molvarec A
  • 学会等名: 日本高血圧学会合同シンポジウム
  • 発表場所: 宇都宮(招待講演)
  • 年月日: 2011-10-20
• [学会発表] 胎盤由来エクソソームを介した胎盤-母体間コミュニケーション (2011)
  • 著者名/発表者名: 菊池邦生
  • 学会等名: 第19回日本胎盤学会学術集会/第29回日本絨毛性疾患研究会
  • 発表場所: 東京ステーションコンファレンス(東京)
  • 年月日: 2011-10-01
• [学会発表] 胎盤由来のエクソソーム:胎盤特異的microRNAはエクソソームを介して母体循環に分泌される (2011)
  • 著者名/発表者名: 瀧澤俊広
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2011-09-22
• [学会発表] 制御性T細胞、制御性NK細胞からみた妊娠維持機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋, 島友子, 中島彰俊
  • 学会等名: 免疫疾患学会連合2011合同シンポジウム2
  • 発表場所: 東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-16
• [学会発表] アロ妊娠維持には制御性T(Treg)細胞のみならず制御性NK(NKreg)細胞も重要な役割を果たす (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋
  • 学会等名: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-08-29
• [学会発表] 不育症に関する新たな知見 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋
  • 学会等名: 第18回産婦人科MEセミナー
  • 発表場所: 大阪(招待講演)
  • 年月日: 2011-07-03
• [学会発表] 不育症治療の実際 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋
  • 学会等名: 第6回はびきやま産婦人科セミナー
  • 発表場所: 大阪(招待講演)
  • 年月日: 2011-06-29
• [学会発表] 不育症治療に関する再評価と新たなる治療法の開発に関する研究 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤滋
  • 学会等名: 厚生労働科学研究費補助金成育疾患克服等次世代育成基盤研究推進事業講演会
  • 発表場所: 東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-03-01
• [図書] E-Book. Chapter "Pregnancy Disorders and Perinatal Outcomes" (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito S.
  • 総ページ数: 74-87
  • 出版者: Immune System and Perinatal Outcomes