キナーゼ抗体ライブラリーを用いた新規口腔がん治療標的分子の探索

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23390469
• 研究機関: 独立行政法人国立がん研究センター
• 研究代表者: 本田 一文 独立行政法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (10260936)
• 研究分担者: 森 泰昌 独立行政法人国立がん研究センター, 中央病院, 医員 (00296708) ; 関根 茂樹 独立行政法人国立がん研究センター, 中央病院, 医長 (10321879) ; 平岡 伸介 独立行政法人国立がん研究センター, 中央病院, 科長 (40276217) ; 出雲 俊之 東京医科歯科大学, 歯学部附属病院, 准教授 (80322709) ; 渡部 幸央 東京歯科大学, 歯学部, その他 (50733490)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 抗体基盤プロテオミクス / キノーム / 口腔扁平上皮がん

研究実績の概要

1I/II期舌扁平上皮がんを搭載した組織マイクロアレイを作製し、キナーゼ抗体を含めた1000種類程度抗体を用いて蛍光免疫染色を行った。タンパク質発現は国立がん研究センター研究所でインハウスで開発された組織マイクロアレイ抗原発現定量ソフトウエアのヒストロカリキュレータを用いて、患者毎にプロファイルし、口腔扁平上皮がんの予後に関わるキナーゼ3種類と、転移に係わるアクチン結合タンパク質1種類を同定した。
同定されたキナーゼ候補に内の1種類は、EGFRシグナル活性抑制に関わることが頭頸がん以外のがん種で報告されているキナーゼで、本キナーゼ活性を抑制することにより抗EGFR抗体治療抵抗性患者の薬効増強に貢献する可能性を考えている。現在、本分子を強制発現するベクターを構築中で、分子生物学的アッセイの開発を行っている。
アクチン結合タンパク質については、タンパク質強発現症例のうちの30％程度に染色体上での遺伝子コピー数の増加が確認された。FISH法を用いて、国立がん研究センターおよび東京歯科大学で舌部分切除術を施行さた症例の病理標本を用いて遺伝子コピー数を確認したところ、遺伝子増幅症例は、ノーマルコピー数の症例に比べて極端に全生存期間が短かった。さらに台北医科大学と協力して、台北医科大学の手術標本で免疫染色を行い、タンパク質発現状況と予後との相関を、日本のコホートのみならず、国外の検体で検証した。本分子のリン酸化が転移活性の増強に関与することが報告されている。現在、本分子をリン酸化に関与する責任酵素とリン酸化部位をプロテオミクスに手法を用いて探索している。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

舌がんと唾液腺がんの組織マイクロアレイを作製した。舌がんの組織マイクロアレイを抗体を用いてキノームプロファイルを取得し、創薬候補を同定した。候補のうち1つは現在臨床で応用されているEGFRシグナルに抑制的に働く可能性が報告されている分子であった。本分子は、非小細胞肺がんのゲフェイチニブの抵抗性に関わる可能性が報告されているが、口腔がんでの発現に言及された報告はない。さらに本分子を高発現する口腔扁平上彼がんの全生存期間は、発現が認められない症例に比較して統計学的に有意に短く、治療標的としての可能性も高い。

今後の研究の推進方策

臨床材料を用いて検討は着実に進んでいるが、理論的に根拠となる分子生物学的な表現系解析を本年度は重点的に行う予定である。
また、抗EGFR抗体であるセツキシマブに対する薬効との相関解析や本分子阻害薬との併用による増殖抑制についても検討する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Activating GNAS and KRAS mutations in gastric foveolar metaplasia, gastric heterotopia, and adenocarcinoma of the duodenum. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsubara A, Ogawa R, Suzuki H, Oda I, Taniguchi H, Kanai Y, Kushima R, Sekine S.
  • 雑誌名: Br J Cancer. 巻: Apr 14;112(8) ページ: 1398-404.
  • DOI: 10.1038/bjc.2015.104.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Alternatively Spliced Actinin-4 Variant as a Prognostic Marker for Metastasis in Small-cell Lung Cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Okamoto N, Suzuki H, Kawahara K, Honda K, Miura N, Hirashima T, Tamiya M, Morishita N, Shiroyama T, Tanaka A, Tani E, Hamaguchi M, Kitani M, Yamada T, and Kawase I.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: Mar;35(3) ページ: 1663-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] ACTN4 copy number increase as a predictive biomarker for chemoradiotherapy of locally advanced pancreatic cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Ueno H, Watabe Y, Hiraoka N, Morizane C, Itami J, Okusaka T, Miura N, Kakizaki T , Kakuya T, Kamita M, Tsuchida A, Nagakawa Y, Wilber H, Yamada T and Honda K
  • 雑誌名: Br J Cancer 巻: Feb 17;112(4) ページ: 704-13
  • DOI: 10.1038/bjc.2014.623.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Malignant transformation of oral leukoplakia with a focus on low-grade dysplasia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watabe Y, Nomura T, Onda T, Yakushiji T, Yamamoto N, Ohata H, Takano N, Shibahara T
  • 雑誌名: Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, Medicine, and Pathology. 巻: In press ページ: In press
  • DOI: 10.1016/j.ajoms.2015.02.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adult-onset inflammatory myofibroblastic tumour of the stomach with a TFG-ROS1 fusion. Histopathology. (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujita H, Yoshida A, Taniguchi H, Katai H, Sekine S.
  • 雑誌名: Histopathology 巻: Mar;66(4) ページ: 610-2
  • DOI: 10.1111/his.12575.
  • 査読あり
• [雑誌論文] .Frequent MED12 mutations in phyllodes tumours of the breast (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshida M, Sekine S, Ogawa R, Yoshida H, Maeshima A, Kanai Y, Kinoshita T, Ochiai A
  • 雑誌名: Br J Cancer 巻: In press ページ: In press
  • DOI: 10.1038/bjc.2015.116.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histological growth pattern of and alpha-actinin-4 expression in thyroid cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka N, Yamashita T, Yamamoto S, Matsunobu T, Tsuda H, Honda K, Yamada T, Tamai S, Shiotani A.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: Jun;34(6) ページ: 3157-63
• [雑誌論文] Alternative mammalian target of rapamycin (mTOR) signal activation in sorafenib-resistant hepatocellular carcinoma cells revealed by array-based pathway profiling. (2014)
  • 著者名/発表者名: Masuda M, Chen WY, Miyanaga A, Nakamura Y, Kawasaki K, Sakuma T, Ono M, Chen CL, Honda K, Yamada T
  • 雑誌名: Mol Cell Proteomics. 巻: Jun;13(6) ページ: 1429-38
  • DOI: 10.1074/mcp.M113.033845.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Copy number increase of ACTN4 is a prognostic indicator in salivary gland carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watabe Y, Mori T, Yoshimoto S, Nomura T, Shibahara T, Yamada T, Honda K.
  • 雑誌名: Cancer Med 巻: Jun;3(3) ページ: 613-22.
  • DOI: 10.1002/cam4.214.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Multilayer-omics analysis of renal cell carcinoma, including the whole exome, methylome and transcriptome (2014)
  • 著者名/発表者名: Arai E, Sakamoto H, Ichikawa H, Totsuka H, Chiku S, Gotoh M, Mori T, Nakatani T, Ohnami S, Nakagawa T, Fujimoto H, Wang L, Aburatani H, Yoshida T, Kanai Y.
  • 雑誌名: Int J Cancer 巻: 135(6): ページ: 1330-42
  • DOI: 10.1002/ijc.28768
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of EpCAM and prognosis in early-stage glottic cancer treated by radiotherapy (2014)
  • 著者名/発表者名: Murakami N, Mori T, Yoshimoto S, Ito Y, Kobayashi K, Ken H, Kitaguchi M, Sekii S, Takahashi K, Yoshio K, Inaba K, Morota M, Sumi M, Itami J.
  • 雑誌名: Laryngoscope. 巻: Nov;124(11): ページ: E431-E436
  • DOI: 10.1002/lary.24839
  • 査読あり
• [雑誌論文] Utility of PAX8 mouse monoclonal antibody in the diagnosis of thyroid, thymic, pleural and lung tumours: a comparison with polyclonal PAX8 antibody (2014)
  • 著者名/発表者名: Murakami N, Mori T, Yoshimoto S, Ito Y, Kobayashi K, Ken H, Kitaguchi M, Sekii S, Takahashi K, Yoshio K, Inaba K, Morota M, Sumi M, Itami J.
  • 雑誌名: Histopathology. 巻: Oct;65(4): ページ: 465-72
  • DOI: 10.1111/his.12405
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequent lack of GNAS mutations in colorectal adenocarcinoma associated with GNAS-mutated villous adenoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sekine S, Ogawa R, Oshiro T, Kanemitsu Y, Taniguchi H, Kushima R, Kanai Y.
  • 雑誌名: Genes Chromosomes Cancer 巻: Apr;53(4) ページ: 366-72.
  • DOI: 10.1002/gcc.22147.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Consistent absence of HER2 expression, regardless of HER2 amplification status, in neuroendocrine carcinomas of the stomach. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishida M, Sekine S, Taniguchi H, Fukagawa T, Katai H, Kushima R.
  • 雑誌名: Histopathology 巻: Jun;64(7) ページ: 1027-31
  • DOI: 10.1111/his.12348.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential diagnostic biomarkers: differential expression of LMP2/β1i and cyclin B1 in human uterine leiomyosarcoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Horiuchi A, Sano K, Hiraoka N, Ichimura T, Sudo T, Ishiko O, Yaegashi N, Aburatani H, Konishi I.
  • 雑誌名: Tumori 巻: Jul-Aug;100(4): ページ: 99e-106e
  • DOI: 10.1700/1636.17918.
  • 査読あり
• [雑誌論文] PHLDA3 is a novel tumor suppressor of pancreatic neuroendocrine tumors. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ohki R, Saito K, Chen Y, Kawase T, Hiraoka N, Saigawa R, Minegishi M, Aita Y, Yanai G, Shimizu H, Yachida S, Sakata N, Doi R, Kosuge T, Shimada K, Tycko B,Tsukada T, Kanai Y, Sumi S, Namiki H, Taya Y, Shibata T, Nakagama H.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A 巻: Jun 10;111(23) ページ: E2404-13
  • DOI: 10.1073/pnas.1319962111
  • 査読あり
• [雑誌論文] 肺がんの予後予測と遺伝子シグナチャー (特集 がん分子診断のパラダイムシフト) (2014)
  • 著者名/発表者名: 山田哲司， 野呂林太郎， 本田一文
  • 雑誌名: 最新医学 巻: 69 (12) ページ: 2512-2519
• [雑誌論文] 臨床材料を用いたアレイ基盤プロテオミクスを用いた創薬標的・バイオマーカーの開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林信， 山田哲司， 本田一文
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 巻: 251 (10) ページ: 980-983
• [雑誌論文] プロテオーム解析による膵癌診断方法の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 三 浦奈美、紙田正博、本田一文、山田哲司
  • 雑誌名: 膵癌治療 up-to-date 2015 巻: なし ページ: 91-98
• [学会発表] がん個別化医療・早期診断バイオマーカーの開発と実用化 (2015)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 文部科学省 がんプロフェッショナル養成基盤推進プラン－高度がん医療開発を先導する専門家の養成－4大学合同事業：慶應義塾大学・東海大学・東京歯科大学・信州大学 公開講座
  • 発表場所: 新宿NSビル東京都
  • 年月日: 2015-02-08
  • 招待講演
• [学会発表] シスプラチン耐性克服に向けた創薬を目指して-進行卵巣がんのシスプラチン耐性腫瘍に対する創薬- (2015)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 日本医療研究開発機構設立準備委員会、医薬基盤研、理化学研究所、産業総合研究所主催【オールジャパンの創薬支援－創薬立国日本に向けて】
  • 発表場所: グランフロント大阪 ナレッジシアター 大阪市
  • 年月日: 2015-01-16
  • 招待講演
• [学会発表] プロテオミクス総括 (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 第1回トランスオミクス研究会
  • 発表場所: 東北メディカルメガバンク 仙台市
  • 年月日: 2014-12-06
  • 招待講演
• [学会発表] 唾液腺がん組織マイクロアレイを用いた予後予測バイオマーカーの同定 (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 日本口腔外科学会・日本口腔病理学会・日本歯科放射線学会、口腔3学会シンポジウム
  • 発表場所: 幕張国際会議場 千葉市
  • 年月日: 2014-10-18
  • 招待講演
• [学会発表] Possible Detection of Early-Stage Pancreatic Cancer by Measuring Plasma Apolipoprotein-AII isoforms. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kazufumi Honda, Michimoto Kobayashi, Giman Jung, Tesshi Yamada.
  • 学会等名: Scientific Workshop, National Cancer Institute (NCI), Early Detection Research Network (EDRN)
  • 発表場所: Hyatt Regency Bethesda ML, USA.
  • 年月日: 2014-10-10
• [学会発表] 膵臓がんの早期発見 –膵がん検診の効率化を目指した血液バイオマーカーの実用化- (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: パープルリボン医療セミナージャパン東京2014
  • 発表場所: 星陵会館 東京
  • 年月日: 2014-10-05
  • 招待講演
• [学会発表] がん個別化医療バイオマーカーの開発と実用化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 第62回重粒子医科学センター研究交流会
  • 発表場所: 独立行政法人 放射線医学研究所 千葉市
  • 年月日: 2014-09-04
  • 招待講演
• [学会発表] がん個別化医療選択のためのバイオマーカー開発と実用化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: 第27回青森呼吸器研究会
  • 発表場所: ホテル青森 青森市
  • 年月日: 2014-08-31
• [学会発表] アレイ技術・抗体基盤・質量分析基盤プロテオミクスの融合-がんバイオマーカー探索と検証に向けて- (2014)
  • 著者名/発表者名: 本田一文
  • 学会等名: アレイ技術・抗体基盤・質量分析基盤プロテオミクスの融合-がんバイオマーカー探索と検証に向けて-
  • 発表場所: つくば国際会議場 つくば市
  • 年月日: 2014-07-18
  • 招待講演
• [学会発表] Gene amplification of ACTN4 is a predictor of cancer metastasis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kazufumi Honda, and Tesshi Yamada
  • 学会等名: Gene amplification of ACTN4 is a predictor of cancer metastasis.
  • 発表場所: German Cancer Research Center. Dkfz. Heidelberg Germany.
  • 年月日: 2014-06-30