| 研究課題/領域番号 |
23390485
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| 研究機関 | 日本歯科大学 |
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研究代表者 |
八重垣 健 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (40166468)
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| 研究分担者 |
中原 貴 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (10366768)
石川 博 日本歯科大学, 生命歯学部, 客員教授 (30089784)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 膵臓 / 再生医療 / 歯髄幹細胞 / 移植 |
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| 研究概要 |
CD117陽性ヒト乳歯幹細胞を2%FBS を含むDMEM に20 ng/ml HGFと10 ng/ml FGFを加え5日間培養し、次にαMEM に20 ng/ml HGF、20 ng/ml EGF、10 ng/ml FGF、1%ETFを加え7日間培養した。その後、20 ng/ml HGF、10mM Nicotinamid、1%ETFを加えた 培地Mで 7日培養し膵臓様分画を得た。分化レベルはインスリン、グルカゴンなどのマーカーで判定した。次に膵臓様細胞のヌードラットへの移植を行った、5匹の免疫抑制ラットのspleenにに注射器で移植した。対照にはPBSを注入した。血糖、インスリン分泌を監視しながら4週間後、脾臓を切除し病理学的検討を行いβ細胞として機能していたとの根拠を得た。対照の10匹は、全くの無反応であった。膵臓マーカーの免疫組織学的精査を行ったところ、Anti-human insulin、anti-human glucagon、anti-human somatostatin, anti-human pancreatic polypeptide （R&D Systems)で陽性細胞が一定以上みられたものの、定着率が低かった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
免疫組織学的精査を行ったところ、anti-human insulin、anti-human glucagon、anti-human somatostatin, anti-human pancreatic polypeptide （R&D Systems)で陽性細胞が一定以上みられたものの、定着率が低かった。これが遅れの理由である。現在、移植前の分化方法の再検討を行っている。
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| 今後の研究の推進方策 |
CD117陽性ヒト乳歯幹細胞を2%FBS を含むDMEM に20 ng/ml HGFと10 ng/ml FGFを加え5日間培養し、次にαMEM に20 ng/ml HGF、20 ng/ml EGF、10 ng/ml FGF、1%ETFを加え7日間培養した。その後、20 ng/ml HGF、10mM Nicotinamide、1%ETFを加えた培地で7日培養し膵臓様分画を得た。しかし移植では良い結果が見られなかったため、新たな分化方法を検討する。
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