エジプトとタイにおける家畜・家きん由来インフルエンザウイルス性状変化追跡調査研究

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23406017
• 応募区分: 海外学術
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 生田 和良 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60127181)
• 研究分担者: 高橋 和郎 大阪府立公衆衛生研究所, 副所長 (10171472) ; 渡邊 洋平 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (50452462) ; 中屋 隆明 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80271633)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 鳥インフルエンザウイルス / エジプト / タイ / アレキサンドリア大学 / ダマンフール大学 / マヒドン大学 / ヒト病原性 / 迅速診断キット

研究概要

高病原性鳥インフルエンザウイルスは、現在では、東南アジアに加えて、エジプトにおいてもヒトへの感染例が多くなってきている。特に、エジプトへは2006年に最初に侵入し、その後速やかに摘発淘汰とワクチンプログラムを実施したが、この初期の制圧に失敗した。その結果、2008年にはアウトブレイクが断続的に発生し、2009年以降には世界で最もヒト感染例が多い特異な国となってしまっている。したがって、エジプトのニワトリやアヒルにおける鳥インフルエンザウイルスH5N1のサーベイランスがきわめて重要な状況となっている。
そこで、エジプトのニワトリおよびアヒルからのH5N1検索用サンプルを入手し、その遺伝子解析を進めた結果、これまでに徐々に遺伝子変異を起こし、進化の跡が認められた。さらに、レセプター糖鎖特異性について検討した結果、ヒトの呼吸器領域への結合性を容易にする変異株の存在が認められた。また、ウイルス表面タンパク上の抗原性に変化が生じていることを見出した。
一方、2009年の豚に由来するインフルエンザウイルスH1N1pdm(2009)に対する迅速診断キットを作製し、その検査の有用性について、日本およびタイ（マヒドン大学熱帯医学部）において検討した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本事業における研究目的は、高病原性鳥インフルエンザウイルスH5N1の常在国であり、近年ヒトへの偶発感染事例が際立って多いエジプトにおいて、H5N1ウイルスの包括的な疫学調査と遺伝子・ウイルス性状解析を実施することで、同国におけるウイルス感染状況と進化動態を把握することであった。したがって、これまでに実施し、得られた成果から、概ね計画通り達成されたと考えられる。これらの結果の一部は、PLoS Pathogens やJournal of General Virologyに報告した。また、これらの成果に関して、総説依頼があり、Trends in Microbiology、EMBO Reportsに執筆した。

今後の研究の推進方策

これまでに日本側研究者はエジプトを数回訪問し、また、エジプト側研究者を日本に数回招聘した。エジプトでは、Joint Scientific Forum on Avian InfluenzaやWorkshop on Rapid Diagnosis of Influenzaを開催してきた。このような企画をアレキサンドリア大学やダマンフール大学と合同開催することで、密接な情報・意見交換の機会を設けることができた。また、現地における獣医領域と医学領域の連携が重要であることが再認識される結果となった。したがって、今後もできるだけ多くの機会をこのような企画に充てたいと考えている。尚、平成24年度にエジプトにて開催を予定していたJoint Scientific Forum on Avian Influenzaについては、北エジプトの社会情勢悪化を考慮して実施を見送り、日本国内での実験を優先的に推進した。

研究成果

• [雑誌論文] Human monoclonal antibodies broadly neutralizing against influenza B virus. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasugi, M., Kubota-Koketsu, R., Yamashita, A., Kawashita, N., Du, A., Sasaki, T., Nishimura, M., Misaki, R., Kuhara, M., Boonsathorn, N., Fujiyama, K., Okuno, Y., Nakaya, T., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: PLoS Pathog. 巻: 9 ページ: e1003150
  • DOI: 10.1371/journal.ppat.1003150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of anti-influenza immunity by modified GFP carrying hemagglutinin-derived epitope structure. (2013)
  • 著者名/発表者名: Inoue, Y., Kubota-Koketsu, R., Ideno, S., Nakamura, H., Ono, K., Okuno, Y., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 288 ページ: 4981-4990
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.420547
  • 査読あり
• [雑誌論文] Control of endemic influenza virus H5N1 in view of viral and host diversity. (2013)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Ibrahim, M.S., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: EMBO Rep. 巻: 14 ページ: 117-122
  • DOI: 10.1038/embor.2012.212
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequency of D222G and Q223R hemagglutinin mutants of pandemic (H1N1) 2009 influenza virus in Japan between 2009-2010. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yasugi, M., Nakamura, S., Daidoji, T., Ramadhany R., Yang, C.-S., Yasunaga, T., Iida, T., Horii, T., Ikuta, K., Takahashi, K., and Nakaya, T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e30946
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0030946
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tropism of pandemic 2009 H1N1 influenza A virus. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ramadhany, R., Yasugi, M., Nakamura, S., Daidoji, T., Watanabe, Y., Takahashi, K., Ikuta, K., and Nakaya, T.
  • 雑誌名: Front. Microbiol. 巻: 3 ページ: 128
  • DOI: 10.3389/fmicb.2012.00128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antigenic analysis of highly pathogenic avian influenza virus H5N1 sublineage co-circulating in Egypt. (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Ibrahim, M.S., Ellakany, H.F., Kawashita, N., Daidoji, T., Takagi, T., Yasunaga, T., Nakaya, T., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: J. Gen. Virol. 巻: 93 ページ: 2215-2226
  • DOI: 10.1099/vir.0.044032-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significant neutralizing activities against H2N2 influenza A viruses in human intravenous immunoglobulin lots manufactured from 1993 to 2010. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kubota-Koketsu, R., Yunoki, M., Okuno, Y., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: Biologics 巻: 6 ページ: 245-247
  • DOI: 10.2147/BTT.S33495
  • 査読あり
• [雑誌論文] Discrimination of influenza virus-infected nasal fluids by Vis-NIR spectroscopy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakudo, A., Baba, K., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: Clin. Chim. Acta 巻: 414C ページ: 130-134
  • DOI: 10.1016/j.cca.2012.08.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of Vis-NIR spectra changes to measure the inflammatory response in the nasal mucosal region of influenza A and B virus-infected patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakudo, A., Baba, K., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: J. Clin. Virol. 巻: 55 ページ: 334-338
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2012.08.015
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reliability of a newly-developed immunochromatography diagnostic kit for pandemic influenza A/H1N1pdm virus: Implications for drug administration. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, T., Kubota-Koketsu, R., Takei, M., Hagihara, T., Iwamoto, S., Murao, T., Sawani, K., Fukae, D., et al.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e50670
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0050670
  • 査読あり
• [雑誌論文] The changing nature of avian influenza A virus (H5N1). (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Ibrahim, M.S., Suzuki, Y., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: Trends Microbiol. 巻: 20 ページ: 11-20
  • DOI: 10.1016/j.tim.2011.10.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of influenza virus using a lateral flow immunoassay for amplified DNA by a microfluidic RT-PCR chip. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nagatani, N., Yamanaka, K., Ushijima, H., Koketsu, R., Sasaki, T., Ikuta, K., Saito, M., Miyahara, T., and Tamiya, E.
  • 雑誌名: Analyst. 137, 3422-3426, 2012. 巻: 137 ページ: 3422-3426
  • DOI: 10.1039/c2an16294f
  • 査読あり
• [学会発表] エジプトにおけるH5N1高病原性鳥インフルエンザウイルスの多様化について (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡辺洋平
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
  • 招待講演
• [学会発表] 高病原性鳥インフルエンザウイルスH5N1はヒト呼吸器上皮細胞に対して広いトロピズムを示す (2012)
  • 著者名/発表者名: 大道寺智、Ibrahim M.S.、渡辺洋平、安木真世、丸山央峰、増田泰輔、新井史人、大場誠介、本田文江、生田和良、中屋隆明
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [学会発表] 高病原性鳥インフルエンザウイルスのヒト型レセプター結合性変異監視デバイス (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡辺洋平、伊藤哲男、Madiha S. Ibrahim、Hany F. Ellakany、Nongluk Sriwilaijaroen、平松宏明、林司、高橋忠伸、鈴木隆、生田和良、鈴木康夫
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [学会発表] ヘマグルチニン由来構造を分子表面に導入したGFPを用いたインフルエンザＡウイルスに対する免疫誘導 (2012)
  • 著者名/発表者名: 井上雄嗣、纐纈律子、生田和良
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [学会発表] インフルエンザウイルスに対して広い反応性を示すヒト型モノクローナル抗体の分離 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金井祐太、安木真世、潘洋、Naphatsawan Boonsthorn、小野健一郎、生田和良
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [備考] 大阪大学微生物病研究所ウイルス免疫分野
  • URL: http://virology.biken.osaka-u.ac.jp/
• [産業財産権] MONOCLONAL ANTIBODIES BROADLY PROTECTIVE (2013)
  • 発明者名: 生田和良、ほか
  • 権利者名: 大阪大学、ほか
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: ＧＰ１２－１００２ＰＣＴ
  • 出願年月日: 2013-01-13
  • 外国