再現性の高い免疫性不妊モデルの樹立とその予防・治療の試み

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23500504
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 伊藤 正裕 東京医科大学, 医学部, 教授 (00232471)
• 研究分担者: 川本 英一 東京医科大学, 医学部, 准教授 (20074718) [辞退] ; 内藤 宗和 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (10384984) ; 佐々木 啓 順天堂大学, スポーツ健康科学部, 助教 (20384969) [辞退] ; 寺山 隼人 東海大学, 医学部, 講師 (00384983) [辞退] ; 平井 宗一 東京医科大学, 医学部, 講師 (70516054) [辞退] ; 曲 寧 東京医科大学, 医学部, 講師 (70527952) ; 池田 あゆみ 東京医科大学, 医学部, 助教 (90617515) [辞退] ; 畑山 直之 東京医科大学, 医学部, 助教 (80534792) ; 林 省吾 東京医科大学, 医学部, 准教授 (60349496)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2015-03-31
• キーワード: マウス / 精子抗原 / 精巣 / 自己免疫疾患 / 抗原解析

研究実績の概要

近年、自己免疫性精巣炎は、ヒト男性不妊症の原因として注目されている。男性不妊症の一つモデルとして、実験的自己免疫性精巣炎（EAO）は最初、guinea pigで行われたが、その後、rat, rabbit, mouseにおいてもEAOが誘導されることが明らかにされた。マウスにおいて、我々は同系生殖細胞(TGC)の皮下注射のみによって、EAOを誘導した。同系TGCの皮下注射により誘導されたmouse-EAOにも現在2次元電気泳動の解析で抗原同定が進んだ。平成26年度は、異種であるrat /guinea pigのTGCの皮下注射することで、マウスの精巣に自己免疫応答が起こるかどうかを検討した。マウスにrat-TGCを感作したところ、マウスに抗マウスTGC自己抗体が検出され、EAOが誘導された。一方、guinea pig-TGCを感作したマウスにはEAOが誘導されなかった。2次元電気泳動の銀染色により、正常mouse/rat /guinea pig生殖細胞に共通のタンパク質を検出した。また、正常mouse生殖細胞のタンパク質を2次元電気泳動で分離した後、各実験群の血清を用いてウエスタンブロッティングを行ったところ、mouse-TGC群とrat-TGC群に共通spotsが見られたが、guinea pig-TGC群には見られなかった。このことは、guinea pigには存在しないmouseとratとの共通TGC抗原がマウス自己免疫性精巣炎の原因タンパクとなっていることを示唆する。2次元電気泳動の解析においても、これを支持する結果が得られた。将来的にMS解析を用いて共通TGC抗原のタンパク同定が可能になり、EAOを誘導する抗原の特定に繋がると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Busulfan pretreatment for transplantation of rat spermatogonia differentially affects immune and reproductive systems in male recipient mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hirayanagi Y, Qu N, Hirai S, Naito M, Terayama H, Hayashi S, Hatayama N, Kuramasu M, Ogawa Y, Itoh M.
  • 雑誌名: Anat Sci Int. 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Contribution of IL-12/IL-35 common subunit p35 to maintaining the testicular immune privilege (2014)
  • 著者名/発表者名: Terayama H, Yoshimoto T, Hirai S, Naito M, Qu N, Hatayama N, Hayashi S, Mitobe K, Furusawa J, Mizoguchi I, Kezuka T, Goto H, Suyama K, Moriyama H, Sakabe K, Itoh M.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e96120
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0096120. eCollection 2014.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Chronological changes of delayed-type hypersensitivity in mice immunised with testicular germ cells alone. (2014)
  • 著者名/発表者名: Qu N, Naito M, Terayama H, Hirai S, Musha M, Itoh M.
  • 雑誌名: Andrologia 巻: 46 ページ: 556-563
  • DOI: 10.1111/and.12116.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Neonatal estrogen treatment with β-estradiol 17-cypionate induces in post-pubertal mice inflammation in the ductuli efferentes, epididymis, and vas deferens, but not in the testis, provoking obstructive azoospermia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Hirai S, Terayama H, Qu N, Hayashi S, Hatayama N, Kawamura H, Nakano T, Itoh M.
  • 雑誌名: Med Mol Morphol. 巻: 47 ページ: 21-30
  • DOI: 10.1007/s00795-013-0034-z.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 微量カドミウム曝露は自己免疫障害を増悪させる (2014)
  • 著者名/発表者名: 小川夕輝, 倉升三幸, 曲 寧, 平井宗一, 林 省吾, 畑山直之, 伊藤正裕
  • 学会等名: 第29回日本生殖免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-12-13 – 2014-12-13
• [学会発表] ブスルファン処置マウスの精子形成障害における牛車腎気丸の治療効果 (2014)
  • 著者名/発表者名: 曲 寧, 平栁淑恵, 林 省吾, 平井宗一, 畑山直之, 倉升三幸, 小川夕輝, 伊藤正裕
  • 学会等名: 第29回日本生殖免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-12-12 – 2014-12-13
• [学会発表] 進化と発生からみた「ヒト精子の生きにくさ」 (2014)
  • 著者名/発表者名: 伊藤 正裕
  • 学会等名: 第32回日本受精着床学会総会・学術講演会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-07-31 – 2014-08-01
  • 招待講演
• [学会発表] Contribution of IL-35 to maintaining the testicular immune privilege (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺山隼人, 内藤宗和, 善本隆之, 平井宗一, 曲 寧, 倉升三幸, 金沢輝久, 隅山香織, 坂部 貢, 伊藤正裕
  • 学会等名: アンドロロジー学会第33回学術大会および第20回精子形成・精巣毒性研究会
  • 発表場所: 長野
  • 年月日: 2014-06-12 – 2014-06-13