単層培養からの自然発生スフェロイドの特性解明と阻害剤の探索研究

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23501310
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 臨床腫瘍学
• 研究機関: 岩手医科大学
• 研究代表者: 上原 至雅 岩手医科大学, 薬学部, 教授 (50160213)
• 研究協力者: 西谷 直之 岩手医科大学, 薬学部, 講師 (10286867) ; 奥 裕介 岩手医科大学, 薬学部, 助教 (50626843)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: 乳がん幹細胞 / CD133 / ALDH / Her2 / ドキソルビシン / TGF-beta / Wntシグナル / 次世代シーケンサー

研究概要

乳がん細胞株を高密度培養することにより生じた自然発生浮遊細胞塊では、がん幹細胞マーカーのCD133の発現が上昇した。次世代シークエンサーで遺伝子発現パターンを解析したところ、WntやTGF-βシグナルに関与する遺伝子群の発現変動が見られた。また、アルデヒドデヒドロゲナーゼ（ALDH）活性の上昇が観察された。一方、自発的浮遊細胞はドキソルビシンなどの抗がん剤に対して抵抗性を示すが、HER2のリン酸化が亢進しており、２種類のHER2阻害剤に対してnMオーダーの感受性を示した。

研究成果

• [雑誌論文] Multimodal Effects of Small Molecule ROCK and LIMK Inhibitors on Mitosis, and Their Implication as Anti-Leukemia Agents (2014)
  • 著者名/発表者名: Oku Y, Tareyanagi C, Takaya S, Osaka S, Ujiie H, Yoshida K, Nishiya N, Uehara Y
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9(3) (eCollection 2014) ページ: e92402
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0092402
• [雑誌論文] Zebrafish Chemical Suppressor Screening Identifies Small Molecule Inhibitors of the Wnt/ β -catenin Pathway (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishiya N, Oku Y, Kumagai Y, Sato Y, Yamaguchi E, Sasaki A, Shoji M, Ohnishi Y, Okamoto H, Uehara Y.
  • 雑誌名: Chem. Biol. 巻: 21 [Epub ahead of print] ページ: 530-540
  • DOI: 10.1016/j.chembiol.2014.02.015
• [雑誌論文] p38MAPK and Rho-dependent kinase are involved in anoikis induced by anicequol or 25-hydroxycholesterol in DLD-1 colon cancer cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka AR, Noguchi K, Fukazawa H, Igarashi Y, Arai H, Uehara Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 430 (Epub 2012 Dec 22) ページ: 1240-1245
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.12.067
• [雑誌論文] Identification of LY83583 as a specific inhibitor of Candida albicans MPS1 protein kinase (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsuda K, Nishiya N, Umeyama T and Uehara Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 409 (Epub 2011 May 8) ページ: 418-423
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2011.05.010
• [雑誌論文] Cytotoxic and EGFR tyrosine kinase inhibitory activities of aglycone derivatives obtained by enzymatic hydrolysis of oleoside-type secoiridoid glucosides, oleuropein and ligustroside (2011)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi M, Mano N, Uehara Y, Machida K, Kikuchi M
  • 雑誌名: J Nat Med 巻: 65 (Epub 2010 Nov 2) ページ: 237-240
  • DOI: 10.1007/s11418-010-0476-8
• [学会発表] A phenotype-based screening for chemical suppressors of the Wnt/beta-catenin pathway in zebrafish (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishiya, N., Kawano, T., Uehara, Y.
  • 学会等名: The 18th Japanese Foundation for Cancer Research-International Symposium on Cancer Chemotherapy
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2013-12-04
  • 招待講演
• [学会発表] ゼブラフィッシュ胚を用いたWnt/β-catenin 経路ケミカルサプレッサーの探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 西谷直之、河野富一、上原至雅
  • 学会等名: 日本薬学会生薬天然物部会主催・第5回食品薬学シンポジウム
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2013-11-02
  • 招待講演
• [学会発表] Geranylgeranyltransferase as a potential molecular target for Wnt/beta-catenin pathway inhibitors (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishiya, N., Oku, Y., Uehara, Y.
  • 学会等名: 日本癌学会第72回総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-10-03
• [学会発表] ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ阻害剤によるβ-catenin 核移行の阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 西谷直之、奥 裕介、上原至雅
  • 学会等名: 第17回日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2013-06-13
• [学会発表] ROCK-LIMK1はAurora A を活性化し、中心体の恒常性維持に寄与する (2013)
  • 著者名/発表者名: 奥 裕介、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第17回日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2013-06-13
• [学会発表] Geranylgeranyltransferase inhibitors attenuate the Wnt/beta-catenin signaling pathway (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishiya, N., Abe, S., Iwaoka, S., Ohmori, N., Ohnishi, Y., Sasaki, A., Shoji, M., Oku, Y, Uehara, Y.
  • 学会等名: FAOBMB mini symposium 2013
  • 発表場所: 矢巾
  • 年月日: 2013-04-06
• [学会発表] ROCK-LIMK1 axis activates Aurora A and participates in centrosome integrity (2013)
  • 著者名/発表者名: Oku, Y., Tareyanagi, C., Ujiie, H., Takaya, S., Yoshida, K., Nishiya, N., Uehara, Y.
  • 学会等名: FAOBMB mini symposium 2013
  • 発表場所: 矢巾
  • 年月日: 2013-04-06
• [学会発表] Wnt/β-catenin 経路阻害活性をもつGGTI-286 の作用機序の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大森紀和、阿部早織、岩岡ささの、大西亨美、佐々木朱里、庄司桃子、奥 裕介、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-28
• [学会発表] Rho-associated coiled coil kinase (ROCK)阻害剤による染色体不安定性の誘導 (2013)
  • 著者名/発表者名: 垂柳智秋、氏家悠貴、高谷真一、吉田健太郎、奥 裕介、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-28
• [学会発表] がん細胞と微小環境との相互作用の薬理学的制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上原至雅、奥 裕介、西谷直之
  • 学会等名: 日本農芸化学会2013年度大会シンポジウム「細胞骨格とシグナル伝達の理解からがんに迫る」
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2013-03-27
• [学会発表] IMU14 derivatives as novel Wnt/beta-catenin signaling inhibitors (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishiya, N., Kawano, T., Uehara、Y.
  • 学会等名: 日本癌学会 第71回総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-09-21
• [学会発表] タンパク質脂質修飾による選択的Wnt/β-cateninシグナル制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 西谷直之, 奥裕介, 上原至雅
  • 学会等名: 未来医療開発プロジェクト研究成果発表会
  • 発表場所: 岩手医科大学矢巾キャンパス
  • 年月日: 2012-08-09
• [学会発表] タンパク質の脂質修飾制御による選択的Wnt/β-catenin シグナル阻害 (2012)
  • 著者名/発表者名: 西谷直之、奥 裕介、上原至雅
  • 学会等名: 第16回日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 北九州
  • 年月日: 2012-06-29
• [学会発表] 新規Wnt/β-catenin シグナル阻害剤IMU1003 の同定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小松豊徳、三田地沙織、河野富一、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] カンジダMps1 キナーゼを標的とする新規抗真菌薬の探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 及川慎吾、加藤大器、今野拓哉、白鳥裕佳、森岡広記、吉池比香里、奥裕介、津田香代子、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] ゼブラフィッシュ胚を用いたWnt/β-catenin 経路阻害剤探索系の構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口英美、熊谷裕介、佐藤佑樹、西谷直之、上原至雅
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] ゼブラフィッシュ胚を用いたWnt/β-catenin シグナル阻害剤の探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 西谷直之、河野富一、津田香代子、上原至雅
  • 学会等名: 日本がん分子標的治療学会第15回学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-09-22
• [産業財産権] Wntシグナル阻害剤 (2013)
  • 発明者名: 西谷直之、上原至雅
  • 権利者名: 西谷直之、上原至雅
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2013-141555
  • 出願年月日: 2013-07-05
• [産業財産権] 胚の発生および/または分化を制御する方法 (2012)
  • 発明者名: 西谷直之、河野富一、畠中 稔、上原至雅
  • 権利者名: 西谷直之、河野富一、畠中 稔、上原至雅
  • 産業財産権種類: PCT
  • 産業財産権番号: JP2012/054585
  • 出願年月日: 2012-03-13
  • 外国