オキサゾロン連続クラスター損傷に関する突然変異および修復反応の解析

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23510069
• 研究機関: 徳島文理大学
• 研究代表者: 喜納 克仁 徳島文理大学, 薬学部, 准教授 (70360534)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2015-03-31
• キーワード: 連続クラスター損傷 / グアニン酸化損傷

研究実績の概要

本課題の研究目的は、「グアニン連続配列を酸化することで、オキサゾロン(Oz)連続クラスター損傷を作成する。このOz連続クラスター損傷を用いて、DNAポリメラーゼによる塩基取り込み解析と伸長効率の解析などを行う。」ことである。一昨年度は、その前の年度で検討した方法を変更し、グアニンを含む6merと13mer、11merと相補鎖30merを混合した状態でライゲーションを行い、目的の30merを合成することに成功した。昨年度は、目的の実験を行うため、量を増やすことを検討した。しかしながら不幸なことに、原料を合成するためのDNA合成機が故障し、研究を遂行することができなかった。３月末にようやく修理され、本年度に延長申請することで、引き続き研究を遂行し、本年度、研究に必要なオリゴマー量を確保することに成功した。
その上で、DNAポリメラーゼαやβ、クレノーフラグメントで解析を行い、さらに乗り越え修復と関連するDNAポリメラーゼζ、η、REV1で解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Transcriptional Regulation of Tal2 Gene by All-trans Retinoic Acid (atRA) in P19 Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi, T., Suzuki, M., Morikawa, M., Kino, K., Tanuma, S., Miyazawa, H.*
  • 雑誌名: Biol. Pharm. Bull. 巻: 38 ページ: 248-256
  • DOI: http://doi.org/10.1248/bpb.b14-00617
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Calculating distortions of short DNA duplexes with base pairing between an oxidatively damaged guanine and a guanine. (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M., Kino K.*, Morikawa M., Kobayashi T., Miyazawa H.
  • 雑誌名: Molecules 巻: 19 ページ: 11030-11044
  • DOI: 10.3390/molecules190811030
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Formation of a flavin-linked peptide. (2014)
  • 著者名/発表者名: Morikawa M., Kino K.*, Senda T., Suzuki M., Kobayashi T., Miyazawa H.
  • 雑誌名: Molecules 巻: 19 ページ: 9552-9561
  • DOI: 10.3390/molecules19079552
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Direct analysis of guanine oxidation products in double-stranded DNA and proposed guanine oxidation pathways in single-stranded, double-stranded or quadruplex DNA. (2014)
  • 著者名/発表者名: Morikawa M., Kino K.*, Oyoshi T., Suzuki M., Kobayashi T., Miyazawa H.
  • 雑誌名: Biomolecules 巻: 4 ページ: 140-159
  • DOI: 10.3390/biom4010140
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] N'-[2-(7,8-Dimethyl-2,4-dioxo-3,4-dihydrobenzo[g]pteridin-10(2H)-yl) ethylidene]-4-nitrobenzohydrazide. (2014)
  • 著者名/発表者名: Morikawa M., Kino K.*, Asada E., Katagiri K., Mori-Yasumoto K., Suzuki M., Kobayashi T., Miyazawa H.
  • 雑誌名: Molbank 巻: 2014 ページ: M836
  • DOI: 10.3390/M836
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Tal2 expression is induced by all-trans retinoic acid in P19 cells prior to acquisition of neural fate. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T., Komori R., Ishida K., Kino K., Tanuma S.-I., Miyazawa H.*
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 4 ページ: 4935
  • DOI: 10.1038/srep04935
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Analysis of nucleobases incorporated opposite an oxidative guanine damage by human REV1 (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M., Kawada T., Morikawa M., Kobayashi T., Miyazawa H., Kino K.*
  • 雑誌名: Photomed. Photobiol. 巻: 36 ページ: 39-40
• [雑誌論文] Effects of stability of base pairs containing an oxazolone on DNA elongation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, M., Ohtsuki, K., Kino, K.* , Kobayashi, T., Morikawa, M., Kobayashi, T., Miyazawa, H.
  • 雑誌名: J Nucleic Acids. 巻: 2014 ページ: 178350
  • DOI: 10.1155/2014/178350
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] P19 細胞神経分化誘導初期に観察されるTal2 遺伝子 の転写機構 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小林隆信, 森川雅行, 鈴木雅代, 喜納克仁, 宮澤宏
  • 学会等名: 日本薬学会 135年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-03-25 – 2015-03-27
• [学会発表] REV1とDNAポリメラーゼζによるグアニン酸化損傷に対する損傷乗り越えDNA合成 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鈴木雅代、川田大周、森川雅行、小林隆信、宮澤宏、喜納克仁
  • 学会等名: 第43回日本環境変異学会
  • 発表場所: 一橋大学
  • 年月日: 2014-12-04 – 2014-12-05
• [学会発表] REV1とDNA polymeraseζのグアニン酸化損傷に対する塩基の取り込み解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鈴木雅代、川田大周、喜納克仁、森川雅行、小林隆信、宮澤宏
  • 学会等名: 日本分子生物学会 第37回年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] グアニン酸化損傷に対するDNAポリメラーゼκの損傷乗り越え反応 (2014)
  • 著者名/発表者名: 川田大周、鈴木雅代、喜納克仁、森川雅行、小林隆信、宮澤宏
  • 学会等名: 第53回日本薬学会 中四国支部学術大会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-11-08 – 2014-11-09
• [学会発表] atRAによるTal2遺伝子の転写調節 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林隆信、喜納克仁、森川雅行、鈴木雅代、宮澤宏
  • 学会等名: 第53回日本薬学会 中四国支部学術大会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-11-08 – 2014-11-09
• [学会発表] REV1を用いたグアニン酸化損傷に対する塩基取り込み解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鈴木雅代、川田大周、森川雅行、小林隆信、宮澤宏、喜納克仁
  • 学会等名: 第36回日本光医学・光生物学会
  • 発表場所: 大阪大学
  • 年月日: 2014-07-25 – 2014-07-26
• [備考] 徳島文理大学 香川薬学部 薬科学科 分子生物学講座
  • URL: http://kp.bunri-u.ac.jp/kph04/index.html