Ｘ線結晶構造解析による血栓症発症機構の解明

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23570155
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 独立行政法人国立循環器病研究センター
• 研究代表者: 秋山 正志 独立行政法人国立循環器病研究センター, 研究所, 室長 (30298179)
• 研究分担者: 小亀 浩市 (40270730) ; 武田 壮一 独立行政法人国立循環器病研究センター, 研究所, 室長 (80332279)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: ADAMTS13 / von Willebrand因子 / 結晶構造

研究概要

日本人の10人に1人がヘテロで持つADAMTS13遺伝子のP475S多型変異は保因者のプラズマVWF切断活性の低下を引き起こす。その分子機構を解明するため、P475S変異型DTCS領域の結晶構造を決定した。その結果、本変異は変異部位が存在するループに局所的な構造変化をもたらし、ループ構造が不安定化すること、酵素学的実験からVWFとの相互作用が低下し切断効率が低下すると考えられた。変異型酵素のずり応力下でのVWFマルチマー切断活性は正常型の7割程度で、P475S変異は先天性血栓性血小板減少性紫斑病の原因変異ではないというこれまでの結果と一致した。

研究成果

• [雑誌論文] Crystal structure and enzymatic activity of an ADAMTS-13 mutant with the East Asian-specific P475S polymorphism (2013)
  • 著者名/発表者名: Akiyama M, Nakayama D, Takeda S, Kokame K, Takagi J, Miyata T.
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 11 ページ: 1399-1406
  • 査読あり
• [雑誌論文] 東アジア人特有のP475S変異を持ADAMTS13の立体構造と機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 秋山正志、武田壮一、宮田敏行
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 24 ページ: 613-618
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13 safeguards the myocardium in a mouse model of acute myocardial infarction (2012)
  • 著者名/発表者名: Doi M, Matsui H, Takeda H, Saito Y, Takeda M, Matsunari Y, Nishio K, Shima M, Banno F, Akiyama M, Kokame K, Miyata T, Sugimoto M.
  • 雑誌名: Thromb Haemost 巻: 108 ページ: 1236-1238
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of von Willebrand factor cleaving protease ADAMTS13 to Lys-plasmin(ogen) (2012)
  • 著者名/発表者名: Shin Y, Akiyama M, Kokame K, Soejima K, Miyata T.
  • 雑誌名: J Biochem 巻: 152 ページ: 251-258
  • 査読あり
• [雑誌論文] プラスミノーゲンの立体構造 (2012)
  • 著者名/発表者名: 秋山正志、平井秀憲、宮田敏行
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 23 ページ: 516-519
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13研究の最先端 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行、小亀浩市、秋山正志、坂野史明、中山大輔、武田壮一
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 53 ページ: 672-679
  • 査読あり
• [学会発表] 哺乳類細胞を用いたADAMTS13ドメインの一過性大量発現 (2013)
  • 著者名/発表者名: 平井秀憲, 秋山正志, 宮田敏行
  • 学会等名: 第13回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 鳥取市
  • 年月日: 20130612-14
• [学会発表] ADAMTS13の正常な分泌にはシクロフィリンBによるプロリン残基異性化が必要である (2013)
  • 著者名/発表者名: 小亀浩市, 秋山正志, 宮田敏行
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形市
  • 年月日: 20130530-0601
• [学会発表] マウス急性心筋梗塞モデルにおけるADAMTS13の心筋保護作用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 土井政明, 松井英人, 竹田征治, 斎藤能彦, 武田麻衣子, 松成泰典, 西尾健治, 嶋緑倫, 坂野史明, 秋山正志, 小亀浩市, 宮田敏行, 杉本充彦
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形市
  • 年月日: 20130530-0601
• [学会発表] Protective role of ADAMTS13 for myocardium in mouse model of experimental myocardial infarction (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaaki Doi, Hideto Matsui, Yukiji Takeda, Yoshihiko Saito, Maiko Takeda, Yasunori Matsunari, Kenji Nishio, Midori Shima, Fumiaki Banno, Masashi Akiyama, Koichi Kokame, Toshiyuki Miyata, Mitsuhiko Sugimoto.
  • 学会等名: 54th American Society of Hematology, Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Atlanta, USA.
  • 年月日: 20121208-11
• [学会発表] ADAMTS13 improving the cell engraftment efficacy in mouse model of bone marrow transplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Hideto Matsui, Masaaki Doi, Yasunori Matsunari, Maiko Takeda, Kenji Nishio, Midori Shima, Kenji Soejima, Fumiaki Banno, Masashi Akiyama, Koichi Kokame, Toshiyuki Miyata, Mitsuhiko Sugimoto.
  • 学会等名: 54th American Society of Hematology, Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Atlanta, USA
  • 年月日: 20121208-11
• [備考]
  • URL: http://www.ncvc.go.jp/res/divisions/etiology/index.html