| 研究概要 |
肝繊維化に及ぼす高硫酸化コンドロイチン硫酸／デルマタン硫酸の役割を解明するため、野生マウス及び高硫酸化コンドロイチン硫酸／デルマタン硫酸欠損マウス（GalNAc4S-6ST KOマウス）に四塩化炭素／ミネラルオイル混合溶液（四塩化炭素として2ml/kg）を週２回、全体で９回腹腔注射し、肝臓に繊維化を引き起こした。最後の四塩化炭素投与後通常飼育を９週間継続し回復過程を観察した。これらのマウス肝臓について、コラーゲン量変化、GAGの含量と組成、COL1a1, aSMA, TGFb1, TIMP-1, TIMP-2, MMP2, MMP9, mMCP6､GalNAc4S-6STのmRNA発現、血清中のALT, AST活性などを調べ、 Sirius redによるコラーゲン繊維の沈着、Decorin抗体による染色を行った。その結果繊維化に伴い野生型とGalNAc4S-6ST KOマウスの両方でコラーゲン量の増加、COL1a1, TIMP-1, TIMP-2, MMP2, MMP9のmRNA発現増加、血清中のAP, ALTの増加、組織へのコラーゲンの沈着とDecorinの増加を観察した。これらの変化は野生型とGalNAc4S-6ST KOマウスの間で顕著な違いは観察されなかった。回復過程の観察はまだ予備的段階であり次年度の実験で詳しく調べる。神経細胞の機能に及ぼす高硫酸化コンドロイチン硫酸の影響をみるため、培養したマウスDRG神経細胞の突起形成に及ぼす合成多価CSEと脳プロテオグリカンの影響を調べ実験により、合成多価CSE が高い阻害効果を示すだけでなく、GalNAc4S-6ST KOマウスの脳プロテオグリカンは野生型マウスの脳プロテオグリカンよりも有意に突起形成阻害効果が小さいことが示され、神経突起形成に高硫酸化コンドロイチン硫酸が働いていることが強く示唆された。
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