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2013 年度 実績報告書

Pho85サイクリン依存性キナーゼによる環境ストレス応答と細胞周期制御の同調機構

研究課題

研究課題/領域番号 23570214
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

西沢 正文  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20218150)

キーワード細胞周期 / リン酸化 / ストレス応答
研究概要

これまでにPho85がアルカリストレス応答に機能する機構について、(i) Pho85がその標的であるPho4、Rim101、Crz1およびCLN2発現を抑制するWhi5の活性を抑制することでCLN2発現を制御しており、(ii) Pho4によるCLN2発現抑制にはRpd3が関与していること、(iii) アルカリ条件下でCln2タンパク質の顕著な安定性変化はみられない、という結果が得られている。
Rpd3 HDACの関与について、CLN2プロモーター領域のクロマチン構造をPrimer extension法により高解像度で解析したところ、Rpd3の有無、アルカリ条件、Pho4過剰発現のいずれによってもヌクレオソームの配置変化を観察することはできなかった。また、ヌクレオソーム構造の変化に関与するNap1を欠失させてもCLN2発現への影響は見られなかった。Rpd3S複合体のサブユニットの一つであるRco1を欠失させると、CLN2発現上昇がアルカリ条件下でも観察される一方、Pho4過剰発現によるCLN2発現の低下は観察されなかった。一方、Rpd3L複合体のサブユニットの一つであるSds3を欠失させるとCLN2発現には変化がなかったが、Pho4過剰発現によるCLN2発現の低下をRco1欠失よりも更に抑圧することができた。しかしながらCLN2発現回復の程度はRpd3欠失よりも低かった。これらの結果は、Rpd3によるCLN2発現制御には2種の複合体が関与しているが、その機構はクロマチン構造の変化を介していないと考えられる。そこで、CLN2発現制御に関与する可能性が考えられる、WHI5転写を促進するHCM1、MBFおよびSBFを活性化するMSA1、そしてCln3を安定化するAZF1、それぞれの発現に対するPho85-Pho4の影響を調べたが、いずれの場合も顕著な変化は観察されなかった。
アルカリストレスによる細胞周期制御に Pho85-Pho4の系が関わる機構についての遺伝学的解析を進めることで、ここに記したような新しい知見が得ることができた。ただ、分子機構の解明は今後の課題として残されている。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2013 その他

すべて 学会発表 (3件) (うち招待講演 1件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [学会発表] Pho85-Pho4 system functions in the regulation of G1 cyclin expression under alkaline stress conditions2013

    • 著者名/発表者名
      Masafumi Nishizawa
    • 学会等名
      26th International Conference on Yeast Genetics and Molecular Biology
    • 発表場所
      Goethe University (Frankfurt, Germany)
    • 年月日
      20130829-20130903
  • [学会発表] アルカリストレス応答におけるPho85-Pho4の標的

    • 著者名/発表者名
      西沢正文
    • 学会等名
      酵母遺伝学フォーラム研究報告会
    • 発表場所
      東北学院大学(宮城県)
  • [学会発表] 酵母が教えてくれるストレスマネージメント

    • 著者名/発表者名
      西沢正文
    • 学会等名
      日本生物工学会大会
    • 発表場所
      広島国際会議場(広島県)
    • 招待講演
  • [図書] 酵母の生命科学と生物工学2013

    • 著者名/発表者名
      西沢正文
    • 総ページ数
      31-50, 183-196
    • 出版者
      化学同人
  • [備考] 西沢酵母分子遺伝学研究グループ

    • URL

      http://square.umin.ac.jp/masyeast/

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公開日: 2015-05-28  

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