ジンクフィンガーヌクレアーゼを用いたカイコセリシン遺伝子のノックアウト

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23580083
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用昆虫学
• 研究機関: 独立行政法人農業生物資源研究所
• 研究代表者: 高須 陽子 独立行政法人農業生物資源研究所, 新機能素材研究開発ユニット, 研究員 (00414912)
• 連携研究者: 瀬筒 秀樹 独立行政法人農業生物資源研究所, 遺伝子組換え研究センター遺伝子組換えカイコ研究ユニット, ユニット長 (70342805)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: カイコ / TALEN / ノックアウト / セリシン

研究概要

カイコの繭に含まれるセリシンタンパク質をコードする2種類の遺伝子Ser1およびSer3遺伝子をそれぞれ部位特異的な人工ヌクレアーゼを用いてノックアウトした。得られたノックアウト系統のカイコは、それぞれのセリシンタンパク質を完全に欠損する繭を作った。今後、これらの遺伝子の特定の部位を欠失させるなどの方法で、さまざまな物性を示すセリシンを作出することが期待できる。たとえば、セリシンの除去が障害になっている絹糸腺を利用した物質生産や新たな機能を付加した絹製品の製造に適したセリシン変異系統として利用できる。

研究成果

• [雑誌論文] The use of TALENs for nonhomologous end joining mutagenesis in silkworm and fruitfly (2014)
  • 著者名/発表者名: Takasu Y, Tamura T, Sajwan S, Kobayashi I, Zurovec M
  • 巻: (Methods in press)
• [雑誌論文] Efficient TALEN construction for Bombyx mori gene targeting (2013)
  • 著者名/発表者名: Takasu Y, Sajwan S, Daimon T, Osanai-Futahashi M, Uchino K, Sezutsu H, Tamura T, Zurovec M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e73458
• [雑誌論文] Efficient disruption of endogenous Bombyx gene by TAL effector nucleases (2013)
  • 著者名/発表者名: Sajwan S, Takasu Y, Tamura T, Uchino K, Sezutsu H, Zurovec M
  • 雑誌名: Insect Biochemistry and Molecular Biology 巻: 43 ページ: 17-23
• [学会発表] セリシンノックアウトカイコの作出と繭層セリシンの分析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高須陽子・田村俊樹・内野恵郎・瀬筒秀樹
  • 学会等名: 第60回日本シルク学会研究発表要旨集15
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] カイコに挿入したry標的配列に対する変異導入効率 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高須陽子・田村俊樹・小林功・内野恵郎・瀬筒秀樹・Michal Zurovec
  • 学会等名: 日本蚕糸学会関東支部第63回大会講演要旨11
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] TALEヌクレアーゼを用いたカイコ遺伝子ノックアウトの試み (2012)
  • 著者名/発表者名: 高須陽子・田村俊樹・小林功・内野恵郎・瀬筒秀樹・Suresh Sajwan・Michal Zurovec
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第82回大会講演要旨61
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] ジンクフィンガーヌクレアーゼによるカイコ遺伝子のターゲティングの現状と問題点 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高須陽子・小林功・瀬筒秀樹・飯塚哲也・内野恵郎・田村俊樹・Suresh Sajwan・Michal Zurovec
  • 学会等名: 日本蚕糸学会支部合同大会講演要旨2
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] ジンクフィンガーヌクレアーゼを用いたカイコ遺伝子のノックアウト, (COMPLEX ADAPTIVE TRAITS Newsletter)
  • 著者名/発表者名: 高須陽子
  • 学会等名: 新学術領域「複合適応形質進化の遺伝子基盤解明」若手ワークショップ
• [産業財産権] カイコのセリシン1変異系統 (2013)
  • 発明者名: 高須陽子・田村俊樹・飯塚哲也・亀田恒徳・桑名芳彦
  • 権利者名: 独立行政法人農業生物資源研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2013-244477
  • 出願年月日: 2013-11-27
  • 外国