遺伝子改変酵母を用いた食品成分代謝物調製技術の開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23580179
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 食品科学
• 研究機関: 富山県立大学
• 研究代表者: 生城 真一 富山県立大学, 工学部, 准教授 (50244679)
• 研究分担者: 榊 利之 富山県立大学, 工学部, 教授 (70293909)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: 機能性成分 / ポリフェノール / グルクロン酸抱合 / 硫酸抱合

研究概要

本研究では食品中機能性成分であるポリフェノールの代謝産物を合成するために、哺乳動物由来UDP-グルクロン酸転移酵素（UGT）及び硫酸基転移酵素(SULT)の出芽酵母発現系の構築を行なった。グルクロン酸抱合についてはUGT及びUDP-グルコース脱水素酵素(UGDH)の同時発現株を構築し、静止菌体における部位特異的なケルセチン抱合体の合成に成功した。また、ヒト由来SULT発現酵母株を用いて硫酸化ケルセチン合成にも成功した。ヒトを含めた哺乳動物由来UGT及びSULT発現出芽酵母株を用いた食品成分代謝物調製技術はポリフェノールなどの機能性を評価する上で重要なツールとして有用である。

研究成果

• [雑誌論文] Comparison of Serotonin Glucuronidation Activity of UDP- glucuronosyltransferase 1a6a (Ugt1a6a) and Ugt1a6b : Evidence for the Preferential Expression of Ugt1a6a in the Mouse (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchihashi S, Nishikawa M., Sakaki T., and Ikushiro S.
  • 雑誌名: Brain Drug Metab Pharmacokinet 巻: 28 ページ: 260-264
• [雑誌論文] UV-dependent production of 25-hydroxyvitamin D2 in the recombinant yeast cells expressing human CYP2R1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasuda K, Endo M, Ikushiro S,Kamakura M, Ohta M, Sakaki T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 434 ページ: 311-315
• [雑誌論文] The critical role of amino acid residue at position 117 of mouse UDP- glucuronosyltransfererase 1a6a and 1a6b in resveratrol glucuronidation (2012)
  • 著者名/発表者名: Uchihashi S, Nishikawa M., Sakaki T., and Ikushiro S.
  • 雑誌名: J.Biochem 巻: 152 ページ: 331-340
• [雑誌論文] Human UGT expression in insect cells; the ratio of active to inactive recombinant proteins and the effects of a C-terminal His-tag on glucuronidation kinetics (2012)
  • 著者名/発表者名: Zhang H., Patana A., Mackenzie PI., Ikushiro S., Goldman A., and Finel M.
  • 雑誌名: Drug Metabolism and Disposition 巻: 40 ページ: 1935-1944
• [雑誌論文] Multiple isoform dependent glucuronidation of a selective c-Fos/activator protein-1 inhibitor T-5224 (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchihashi, S.,Fukumoto, H., Onoda, M., Hayakawa, H., Ikushiro, S., and Sakaki, T.
  • 雑誌名: Drug Metabolism and Disposition 巻: 39 ページ: 803-813
• [雑誌論文] Sequential metabolism of sesamine by cytochrome P450 and UGT-glucuronosyltransferase in human liver (2011)
  • 著者名/発表者名: Yasuda K, Ikushiro S, Kamakura M, Munetsuna E, Ohta M, Sakaki T.
  • 雑誌名: Drug Metabolism and Disposition 巻: 39 ページ: 1538-1545
• [学会発表] ラットを用いたセサミンと医薬品の相互作用の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上野千来、安田佳織、西川美宇、生城真一、鎌倉昌樹、榊利之
  • 学会等名: 第18回日本フードファクター学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131109-10
• [学会発表] Whole cell-dependent production of polyphenol conjugates using genetically engineered budding yeast (2013)
  • 著者名/発表者名: S. Ikushiro, M. Nishikawa, T. Sakaki
  • 学会等名: 第6回国際ポリフェノール学会
  • 発表場所: ブエノスアイレス
  • 年月日: 20131016-19
• [学会発表] 異物抱合酵素発現酵母を用いたフラボノイド抱合体の調製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 生城真一、長谷川嵩、黒田将司、西川美宇、鎌倉昌樹、榊利之
  • 学会等名: 日本農芸化学会2013年度大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20130325-28
• [学会発表] 遺伝子改変出芽酵母を用いた食品成分代謝物調製技術の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 生城真一、西川美宇、増山優香、鎌倉昌樹、榊利之
  • 学会等名: 第17回日本フードファクター学会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20121110-11
• [学会発表] Whole cell-dependent production of dietary conjugated metabolites using genetically engineered budding yeast ICoFF2011 (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Ikushiro, Miyu Nishikawa, Yuuka Masuyama, Masaki Kamakura, and Toshiyuki Sakaki
  • 学会等名: 第5回食品因子国際会議
  • 発表場所: 台北
  • 年月日: 20111119-23
• [学会発表] 出芽酵母発現系を用いた硫酸抱合体調製技術の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 生城真一、西川美宇、布目基倫、増山優香、鎌倉昌樹、榊利之
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20110921-24
• [備考] ホームページ:
  • URL: http://www.pu-toyama.ac.jp/BR/sakaki/
• [産業財産権] 出芽酵母形質転換体 (2013)
  • 発明者名: 生城真一、榊利之、安田佳織
  • 権利者名: 富山県
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 5207201
  • 取得年月日: 2013-03-13
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