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2011 年度 実施状況報告書

新旧両世界のウズラの遺伝資源の保存と活用

研究課題

研究課題/領域番号 23580367
研究機関信州大学

研究代表者

小野 珠乙  信州大学, 農学部, 教授 (10177264)

研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2015-03-31
キーワードコリンウズラ / ニホンウズラ / 遺伝資源 / 実験動物化 / 胚培養 / 新世界ウズラ / 旧世界ウズラ
研究概要

いわゆる「ウズラ」と呼称される種は,系統発生的にニホンウズラ等の旧世界ウズラとコリンウズラ等の新世界ウズラに分類される。実験動物は目的に応じて多くの種が用意されることが望ましいので,新たに新世界ウズラに属するコリンウズラ(成体重約250g)と新たに導入したブロイラータイプニホンウズラ(成体重約300g)において,飼育ケージの新規開発,代理卵殻を用いた培養法の樹立と,ニホンウズラと異科間キメラの作出をした。コリンウズラ胚の培養は,ニホンウズラ胚の二段階培養法を一部改変し,第一段階の培養時間(51~53,63~65時間),培養液{ニワトリ,ニホンウズラ,コリンウズラ水溶性卵白},第二段階の代理卵殻(ニワトリ約45g卵重, ニワトリ約38g, ニワトリ約25g, ブロイラータイプニホンウズラ約15g),第一段階の代理卵殻(ブロイラータイプニホンウズラ約15g)を孵化まで用いる培養法の簡略化について比較した。さらに,コリンウズラ胚培養法を活用して,伴性劣性アルビノウズラ胚盤葉解離細胞をコリンウズラ胚に導入した。その結果,ニワトリの水溶性卵白を培養液に用い,第一段階培養期間は63~65時間,代理卵殻はニワトリ38g卵殻(孵化率39%)あるいはウズラ15g卵殻(孵化率37%)が推奨された。但し,ニワトリ38gおよび25g卵殻は入手が困難であった。第一段階から代理卵殻を15gのウズラ卵殻で行い,移植をしない簡略化法では孵化率31%であった。キメラ胚においてドナー由来の羽装が確認され,ドナー由来のゲノムDNAの増幅産物が検出された。以上の結果より,二段階培養法におけるブロイラータイプニホンウズラ卵殻の可能性が示され,コリンウズラ胚培養における好適な培養条件が示された。新世界ウズラに属するカリフォルニアウズラ,ウロコウズラ,コリンウズラの白色変異体も新たに導入し育成した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

新旧両世界ウズラの生物学的特性を明らかにして実験動物化をするために,小規模研究室における飼育体制を開発することと,卵用ニホンウズラ,肉用ニホンウズラおよびコリンウズラの新鮮および凍結融解した生殖細胞の移植と個体発現を目指すことが目的であった。飼育ケージの新規設計をして,大型サイズのウズラ類飼育ができるようになった。生殖細胞の移植と個体発現に関しては,基礎段階である胚培養条件を比較検討して,良好な孵化率(30-40%)を得ることができるようになった。将来の生殖細胞を含む胚盤葉細胞を導入したが,生殖細胞の追跡は未完成であった。ニホンウズラとコリンウズラのゲノム識別可能なPCRプライマーは開発して,キメラ実験において同定できるようになった。新世界ウズラに属するカリフォルニアウズラ,ウロコウズラ,コリンウズラの白色変異体を導入することができたので,次年度の準備も整った。

今後の研究の推進方策

新たに導入した旧世界ウズラに属する大型に育種した肉用ニホンウズラおよび新世界ウズラに属するカリフォルニアウズラ,ウロコウズラ,白色系コリンウズラを増殖して,生物学的特性を明らかにし,実験動物としての特性を明らかにする。新旧両世界のウズラ類の始原生殖細胞の別個体へのの移植と個体発現を目指す。胚発生初期(始原生殖細胞血中循環期)の胚周縁静脈から血液を採取し,免疫磁気ビーズ法,ナイコデンツ濃度勾配遠心分離法,ACK赤血球溶血除去法で始原生殖細胞と血球を分離し,始原生殖細胞画分を液体窒素下で凍結保存する。レシピエントの生殖細胞除去として,孵卵前にブスルファン投与,孵卵前および始原生殖細胞血中循環期に軟X線照射することによりほとんど胚発生の正常な進行を阻害せずにレシピエント胚の始原生殖細胞を減少させる方法を新旧両世界ウズラ類に適用する。これまでの研究成果を国際学会(アジア太平洋州畜産学会,2012年11月)および日本家禽学会〔2013年3月)に発表し,国内外の研究者に新旧両世界のウズラ類を広く研究に活用してもらうよう広報する予定である。

次年度の研究費の使用計画

ウズラ類飼育のための飼料(40万円程度),飼育管理補助のための謝金(10万円程度),PCR用タックポリメラーゼ等の試薬・消耗品類(20万円程度),国内及び国際学会での研究発表のための旅費等(20万円程度)に使用する計画である。大型備品の購入計画はない。

  • 研究成果

    (17件)

すべて 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (14件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] X-irradiation removes endogenous primordial germ cells (PGCs) and increases germline transmission of donor PGCs in chimeric chickens2012

    • 著者名/発表者名
      Nakamura, Y., Usui, F., Miyahara, D., Mori, T., Ono, T., Kagami, H., Takeda, K., Nirasawa, K. and Tagami, T.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 58 ページ: 432-437

    • DOI

      10.1262/jrd.2012-045

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 体外における未成熟マウス精原細胞の分化2011

    • 著者名/発表者名
      船井咲知・(他5名)・小野珠乙・佐々木晋一・辻井弘忠・濱野光市
    • 雑誌名

      北信越畜産学会報

      巻: 102 ページ: 19-25

    • 査読あり
  • [学会発表] ニワトリ始原生殖細胞の低血清培養系樹立と移住能解析2012

    • 著者名/発表者名
      宮原大地・(他3名)・小野珠乙・韮澤圭二郎・田上貴寛・ 鏡味 裕
    • 学会等名
      日本家禽学会春季大会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      2012.3.30
  • [学会発表] 代理卵殻を用いたコリンウズラ胚培養法の樹立とコリンウズラ、ウズラ異科間キメラ作出の試み2012

    • 著者名/発表者名
      加藤淳・(他6名)・小野珠乙
    • 学会等名
      日本家禽学会春季大会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      2012.3.30
  • [学会発表] 顕微授精ウズラ胚の発生能に及ぼす精子抽出物と IP3 の効果2012

    • 著者名/発表者名
      水島秀成・笹浪知宏・佐藤暁・小野珠乙・島田清司
    • 学会等名
      第115回日本畜産学会大会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      2012.3.29
  • [学会発表] ウズラ卵子活性化における卵細胞質内Ca2+濃度の変化2011

    • 著者名/発表者名
      水島秀成・笹浪知宏・神作宜男・木村一郎・小野珠乙・ 島田清司
    • 学会等名
      第82回日本動物学会
    • 発表場所
      旭川市大雪クリスタルホール
    • 年月日
      2011.9.22
  • [学会発表] 幹細胞分化制御による鳥類生殖工学への応用2011

    • 著者名/発表者名
      鏡味裕・〔他8名)・小野珠乙・〔他2名)・田上貴寛
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      いわて県民情報交流センター
    • 年月日
      2011.9.15-17
  • [学会発表] Usefulness of avian embryos as a research model2011

    • 著者名/発表者名
      Ono, T.
    • 学会等名
      Biomodulation Symposium Proceedings(招待講演)
    • 発表場所
      Seoul National University, Seoul, Korea
    • 年月日
      2011.6.26
  • [学会発表] Application of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for fertilization and development in birds2011

    • 著者名/発表者名
      Shimada, K., Ono, T. and Mizushima, S.
    • 学会等名
      Biomodulation Symposium Proceedings(招待講演)
    • 発表場所
      Seoul National University, Seoul, Korea
    • 年月日
      2011.6.26
  • [学会発表] ニワトリ脂肪組織由来幹細胞の探索と分化誘導2011

    • 著者名/発表者名
      渡辺晴陽・(他10名)・小野珠乙・佐々木えりか・鏡味 裕
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2011.12.13
  • [学会発表] SP法によるニワトリ精巣由来の幹細胞の濃縮2011

    • 著者名/発表者名
      宮原大地・(他3名)・小野珠乙・鏡味 裕
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2011.12.13
  • [学会発表] 卵細胞質内注入法を用いて得られたウズラ胚の発生能とGFP 遺伝子発現効率に及ぼす精子処理法の効果2011

    • 著者名/発表者名
      佐藤暁・笹浪知宏・神作宣男・小野珠乙・島田清司・水島秀成
    • 学会等名
      第36回鳥類内分泌研究会
    • 発表場所
      箱根パークス吉野
    • 年月日
      2011.11.21-22
  • [学会発表] ニワトリ胚体外培養法の簡略化の試み2011

    • 著者名/発表者名
      大西翔・(他6名)・小野珠乙・鏡味裕
    • 学会等名
      第60回北信越畜産学会
    • 発表場所
      NOSAI長野会館
    • 年月日
      2011.11.11
  • [学会発表] 生殖系列ニワトリの新規作出法開発の試み2011

    • 著者名/発表者名
      田中健生・(他5名)・小野珠乙・鏡味裕
    • 学会等名
      第60回北信越畜産学会
    • 発表場所
      NOSAI長野会館
    • 年月日
      2011.11.11
  • [学会発表] 代理卵殻によるコリンウズラニワトリ初期胚の培養の検討2011

    • 著者名/発表者名
      加藤淳・(他5名)・小野珠乙
    • 学会等名
      第60回北信越畜産学会
    • 発表場所
      NOSAI長野会館
    • 年月日
      2011.11.11
  • [学会発表] 細胞育種への家禽幹細胞の応用2011

    • 著者名/発表者名
      鏡味裕・(他8名)・小野珠乙・松原悠子・韮澤圭二郎・田上貴寛
    • 学会等名
      第60回北信越畜産学会
    • 発表場所
      NOSAI長野会館
    • 年月日
      2011.11.11
  • [備考]

    • URL

      http://soar-rd.shinshu-u.ac.jp/profile/ja.WFfCPpkh.html?id=WFfCPpkh&lng=ja

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公開日: 2013-07-10  

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