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2012 年度 実施状況報告書

新旧両世界のウズラの遺伝資源の保存と活用

研究課題

研究課題/領域番号 23580367
研究機関信州大学

研究代表者

小野 珠乙  信州大学, 農学部, 教授 (10177264)

キーワードコリンウズラ / ニホンウズラ / 遺伝資源 / 実験動物化 / 胚培養 / 新世界ウズラ / 旧世界ウズラ / 染色体
研究概要

「ウズラ」と呼称される種は系統発生的には,コリンウズラ(Colinus virginianus)やウロコウズラ(Callipepla squamata)等,キジ目ナンベイウズラ科に分類される新世界ウズラとニホンウズラ(Coturnix japonica)やヒメウズラ(Coturnix chinensis)等,キジ目キジ科に分類される旧世界ウズラが存在する。実験動物は目的に応じて多くの種が用意されることが望ましいので,コリンウズラ,ウロコウズラ,ニホンウズラ(産卵用タイプと肉用タイプ)について比較検討した。
1.肉用タイプのニホンウズラメスと産卵用タイプの系統から性染色体性劣性アルビノ系統オスを交配して,肉用タイプのニホンウズラにアルビノ遺伝子を導入した。これをさらに累進交雑して,性判定が容易で,扱いやすい大型サイズのアルビノ羽装の系統が造成された。野生型羽装産卵タイプのウズラ始原生殖細胞を造成した肉用タイプアルビノウズラに導入したところドナー由来の羽装を示す次世代が1個体(1/39)産出された。2.コリンウズラとニホンウズラの胚培養システムを簡略化して一段階で孵化させるシステムを開発し,従来法に準ずる孵化率を得た。すなわち,前者では簡略法および従来法でそれぞれ孵化率31%(16/51)および37%(27/73),後者ではそれぞれ27%(14/52)および40%(26/65)であり,有意差はなかった。3.新たに導入した白色羽装のコリンウズラの形質はさらなる解析が必要であるが優性形質である可能性が高い。4.ウロコウズラの染色体DNA反復配列(CSQ-BamHI)は、カンムリウズラおよびコリンウズラの 反復配列(CCA-BamHI、CVI-MspI)と高い相同性を示した。 また,CSQ-BamHIの染色体上の分布は、同じ属のカンムリウズラにおける分布と類似していた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

新旧両世界ウズラの生物学的特性を明らかにして実験動物化をするために,小規模研究室における飼育体制を開発することと,卵用ニホンウズラ,肉用ニホンウズラおよびコリンウズラの新鮮および凍結融解した生殖細胞の移植と個体発現を目指すことが目的であった。新規設計した大型ウズラ用の飼育ケージにより容易にケージ内繁殖ができた。生殖細胞の移植と個体発現に関しては,基礎段階である胚培養条件をさらに改良簡易化して,肉用タイプのニホンウズラ卵殻(卵重で15g)を代理卵殻に用いることにより一段階で孵化まで導けるようになった。産卵タイプ(野生型羽装)のウズラ始原生殖細胞を造成した肉用タイプアルビノウズラに導入したところドナー由来の羽装を示す次世代が1個体(1/39)産出された。本年度,白色羽装のコリンウズラ1ペアから増産を試み,8羽となった。白色羽装のコリンウズラの形質はさらなる解析が必要であるが優性形質である可能性が高い。導入したウロコウズラは産卵したが,受精卵が得られなかった。

今後の研究の推進方策

扱いやすい大型サイズのアルビノ羽装の系統が造成されたことから,この系統を生殖細胞移植のレシピエントに用いて,導入生殖細胞の次世代発現を目指す。新世界ウズラに属するウロコウズラ,白色系コリンウズラを増殖して,生物学的特性を明らかにし,実験動物としての特性を明らかにする。
ウロコウズラとコリンウズラの雑種個体(オス)を2羽入手したので,これの染色体分析と,雑種再現,雑種の妊性確認を試みる。
新旧両世界のウズラ類の始原生殖細胞の別個体へのの移植と個体発現を目指す。胚発生初期(始原生殖細胞血中循環期)の胚周縁静脈から血液を採取し,免疫磁気ビーズ法,ナイコデンツ濃度勾配遠心分離法,ACK赤血球溶血除去法で始原生殖細胞と血球を分離し,始原生殖細胞画分を液体窒素下で凍結保存する。
レシピエントの生殖細胞除去として,孵卵前にブスルファン投与,孵卵前および始原生殖細胞血中循環期に軟X線照射することによりほとんど胚発生の正常な進行を阻害せずにレシピエント胚の始原生殖細胞を減少させる方法を新旧両世界ウズラ類に適用する。
国内外の研究者に新旧両世界のウズラ類を広く研究に活用してもらうよう広報する予定である。

次年度の研究費の使用計画

ウズラ類飼育のための飼料(40万円程度),飼育管理補助のための謝金(10万円程度),PCR用タックポリメラーゼ等の試薬・消耗品類(20万円程度),国内及び国際学会での研究発表のための旅費等(20万円程度)に使用する計画である。大型備品の購入計画はない。

  • 研究成果

    (14件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (10件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Culture System for Bobwhite Quail Embryos from the Blastoderm Stage to Hatching2013

    • 著者名/発表者名
      Kato, A., Miyahara, D., Kagami, H., Atsumi, Y., Mizushima, S., Shimada, K. and Ono, T.
    • 雑誌名

      Journal of Poultry Science

      巻: 50 ページ: 155-158

    • DOI

      10.2141/ jpsa.0120131

    • 査読あり
  • [雑誌論文] X-irradiation removes endogenous primordial germ cells (PGCs) and increases germline transmission of donor PGCs in chimeric chickens2012

    • 著者名/発表者名
      Nakamura, Y., Usui, F., Miyahara, D., Mori, T., Ono, T., Kagami, H., Takeda, K., Nirasawa, K. and Tagami, T.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 58 ページ: 432-437

    • DOI

      10.1262/jrd.2012-045

    • 査読あり
  • [学会発表] 長期培養したニワトリ始原生殖細胞の機能解析2013

    • 著者名/発表者名
      宮原大地・森貴史・牧野龍一・中村隼明・小野珠乙・韮澤圭二郎・大石勲・田上貴寛・ 鏡味裕
    • 学会等名
      日本家禽学会春季大会
    • 発表場所
      広島市
    • 年月日
      20130329-20130329
  • [学会発表] 顕微授精法により作出されたGFP発現ウズラの発生率と遺伝子導入効率2013

    • 著者名/発表者名
      水島秀成・佐藤暁・柴小菊・稲葉一男・檜山源・小野珠乙・島田清司・笹浪知宏
    • 学会等名
      日本家禽学会春季大会
    • 発表場所
      広島市
    • 年月日
      20130329-20130329
  • [学会発表] ウズラ精子由来卵子活性化因子の同定2013

    • 著者名/発表者名
      水島秀成・佐藤暁・檜山源・柴小菊・稲葉一男・道羅英夫・小野珠乙・島田清司・笹浪知宏84.
    • 学会等名
      日本畜産学会第116回大会
    • 発表場所
      広島市
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] Basic information and embryo culture of the bobwhite quail2012

    • 著者名/発表者名
      Kato, A., Tsuruta, Y., Miyahara, D., Kagami, H., Atsumi, Y., Fujiwara, A. and Ono, T.
    • 学会等名
      15th AAAP Animal Science Congress
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      20121126-20121130
  • [学会発表] Effects of sperm pretreatment on efficiency of intracytoplasmic sperm injection (ICSI)-mediated gene transfer in quail2012

    • 著者名/発表者名
      Mizushima, S., Sato, A., Ono, T., Shimada, K. and Sasanami, T.
    • 学会等名
      15th AAAP Animal Science Congress
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      20121126-20121130
  • [学会発表] ウズラ卵細胞質内精子注入法を介した外来遺伝子導入法の改良2012

    • 著者名/発表者名
      佐藤暁・笹浪知宏・小野珠乙・島田清司・水島秀成
    • 学会等名
      日本家禽学会秋季大会
    • 発表場所
      高松
    • 年月日
      20120906-20120907
  • [学会発表] Studies on oocyte activation, embryonic development and gene transduction by intracytoplasmic sperm injection (ICSI) method in birds2012

    • 著者名/発表者名
      Shimada, K., Ono, T. and Mizushima, S.
    • 学会等名
      10th International Symposium on Avian Endocrinology
    • 発表場所
      Gifu, Japan
    • 年月日
      20120605-20120609
  • [学会発表] Analysis of cell cycle regulation during quail embryo development2012

    • 著者名/発表者名
      Mizushima, S., Sasanami, T., Kansaku, N., Ono, T. and Shimada, K.
    • 学会等名
      10th International Symposium on Avian Endocrinology
    • 発表場所
      Gifu, Japan
    • 年月日
      20120605-20120609
  • [学会発表] Novel methodology of ICSI-assisted embryo development toward ex ovo hatching in quail2012

    • 著者名/発表者名
      Kang, K. S., Mizushima, S., Ono, T., Jin, S., Yoo M., Han, J. Y. and Shimada, K.
    • 学会等名
      10th International Symposium on Avian Endocrinology
    • 発表場所
      Gifu, Japan
    • 年月日
      20120605-20120609
  • [学会発表] Fertilization and development capability of quail oocytes after ovulation2012

    • 著者名/発表者名
      Min, Y., Mizushima, S., Ono, T., Kang, K. S., Jin, S.,Kim, M. H., Han, J. Y. and Shimada, K.
    • 学会等名
      10th International Symposium on Avian Endocrinology
    • 発表場所
      Gifu, Japan
    • 年月日
      20120605-20120609
  • [図書] 畜産学入門 (第6章1項 家畜の改良技術 分担執筆)2012

    • 著者名/発表者名
      小野珠乙(唐澤豊・大谷元・菅原邦生編)
    • 総ページ数
      306 pp. 203-208
    • 出版者
      文永堂
  • [備考] 信州大学農学部動物発生遺伝学研究室

    • URL

      http://karamatsu.shinshu-u.ac.jp/lab/ono_kagami/hasseiken.htm

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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