| 研究概要 |
本研究計画の最終年度は、共同研究者から提供を受けた健常人血液試料 (n=479) 中の葉酸類（葉酸、FA；テトラヒドロ葉酸、THF；５－メチルテトラヒドロ葉酸、5-MTHF；５－ホルミルテトラヒドロ葉酸、5-FTHF）の定量を行った。その結果（中央値、括弧内は第1四分位点、Q1および第3四分位点、Q3）は、5-MTHFで477検体から186.0 nM (Q1=121.27 nM, Q3=246.06 nM)、5-FTHFで455検体から 3.61 nM (Q1=2.15 nM, Q3=6.21 nM),
FAで399 検体から13.82 nM (Q1=3.48 nM, Q3=7.31 nM)および THF で353 検体から 13.82 nM (Q1=7.88, Q3=45.27 nM) であった。本結果は全血中総葉酸の内、5-MTHFがその主要な成分を占めており（割合７９％）、これは既報（８５．９％）と一致していた。
研究機関を通してヒト全血中４種の葉酸類の定量が可能なLC-MS/MS法を開発することができた。本法は全血中葉酸類の定量に十分な感度（LOD at S/N=3：0.13-1.10 nM)を有しており、正確さおよび日内・日間測定精度などのバリデーションも良好であった。本法は簡便かつ迅速であり、日常分析における総葉酸類の定量に有用であるのみならず、５-MTHFおよびTHFの定量が可能であったことから、葉酸代謝酵素の１つであるMTHFR変異のスクリーニングにも適用可能であると考えている。
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