|
我々は、細胞内Caストアの枯渇によって活性化される細胞膜に発現するCaチャネルであるOraiについて、アレルギー担当細胞であるマスト細胞での役割を検討してきた。Oraiの３つのサブタイプのうち、Orai２だけが分泌小胞に局在することを明らかにした。
平成２５年度は、Orai２が細胞刺激に伴う細胞内CaストアからのCa放出を制御するメカニズムについて検討した。そのために、Orai２と相互作用するTRP(transient receptor potential)チャネル、TRPC１との相互作用を検討したが、マスト細胞におけるOrai２との相互作用を確認することはできなかった。そこで、Orai２による細胞内CaストアからのCa放出制御にOrai２のCaチャネルとしての作用、およびOraiの活性化に必須のタンパク質STIMとの相互作用が必要であるかどうかを検討することとした。そのために、STIMなしに恒常的活性化型となる変異をOrai２に導入したもの（Orai２(G135D)）、およびSTIMとの相互作用ができなくなる変異をOrai２に導入したもの（Orai２(W113P)）を発現させた。その結果、恒常的活性化型をマスト細胞に発現させると、恒常的なCa流入による細胞毒性により、メカニズム解明に至らなかった。STIMとの相互作用ができないものについては、現在検討を続けている。
研究期間全体として、分泌小胞に局在するOrai２がマスト細胞の抗原刺激によるエクソサイトーシスを正に制御すること、抗原刺激による細胞内CaストアからのCa放出は制御するが、タプシガルギンによるCa放出には影響しないこと、細胞外からのCa流入への関与は少ないことを明らかにした。CaストアからのCa放出の機構については明らかにならなかったが、Oraiの新しい機能を見出した意義は大きい。
|
