病理組織標本を用いた生体ステロイドのメタボライト・プロファイリング技術の開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23590051
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 本多 彰 東京医科大学, 医学部, 教授 (10468639)
• 研究分担者: 宮﨑 照雄 東京医科大学, 医学部, 講師 (60532687)
• 連携研究者: 山下 幸和 東北薬科大学, 薬学部, 教授 (80382670)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: ステロイド / LC-MS/MS

研究概要

病理組織標本を含む生体サンプルからステロイドを抽出し，高感度・高精度に一斉分析する方法を開発した。内部標準ステロイドを添加して水酸化カリウム／エタノール中で加水分解し，n-ヘキサンと酢酸エチルによる抽出を行った。ピコリン酸エステルに誘導体化後，高速液体クロマトグラフィー・陽イオンエレクトロスプレーイオン化・タンデムマススペクトロメトリー(HPLC-PESI-MS/MS)に導入し，ステロール，酸化ステロール，副腎ステロイド，神経ステロイドなどを同時定量することが可能になった。ホルマリン固定とマイヤーヘマトキシリンによる染色は，病理組織標本でのステロイド分析結果に有意な影響を及ぼさなかった。

研究成果

• [雑誌論文] A new cholesterol biosyhthesis and absorption disorder with epilepsy, hypogonadism and cerebro-cerebello-bulbar degeneration (2014)
  • 著者名/発表者名: Korematsu S, Uchiyama S, Honda A, Izumi T.
  • 雑誌名: Pediatr. Neurol 巻: 50 ページ: 601-604
  • DOI: 10.1016/j.pediatrneurol.2014.01.050
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased serum oxysterol concentrations in patients with chronic hepatitis C virus infection (2014)
  • 著者名/発表者名: Ikegami T, Honda A, Miyazaki T, Kohjima M, Nakamuta M, Matsuzaki Y.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 446 ページ: 736-740
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.01.176
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Niemann-Pick C1 Like 1 (NPC1L1) inhibitor Ezetimibe improves metabolic disease via decreased Liver X Receptor (LXR) activity in liver of obese male mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Sugizaki T, Watanabe M, Horai Y, Kaneko-Iwasaki N, Arita E, Miyazaki T, Morimoto K, Honda A, Irie J, Itoh H.
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: (Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Absence of Nceh1 augments 25-hydroxycholesterol-induced ER stress and apoptosis in macrophages (2014)
  • 著者名/発表者名: Sekiya M, Yamamuro D, Ohshiro T, Honda A, Takahashi M, Kumagai M, Sakai K, Nagashima S, Tomoda H, Igarashi M, Okazaki H, Yagyu H, Osuga JI, Ishibashi S.
  • 雑誌名: J. Lipid Res 巻: (Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anticholestatic effects of bezafibrate in patients with primary biliary cirrhosis treated with ursodeoxycholic acid (2013)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Ikegami T, Nakamuta M, Miyazaki T, Iwamoto J, Hirayama T, Saito Y, Takikawa H, Imawari M, Matsuzaki Y.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 57 ページ: 1931-1941
  • DOI: 10.1002/hep.26018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bile acid malabsorption deactivates pregnane X receptor in patients with Crohn's disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto J, Saito Y, Honda A, Miyazaki T, Ikegami T, Matsuzaki Y.
  • 雑誌名: Inflamm. Bowel Dis 巻: 19 ページ: 1278-1281
  • DOI: 10.1097/MIB.0b013e318281f423
  • 査読あり
• [雑誌論文] FGF15/19 protein levels in the portal blood do not reflect changes in the ileal FGF15/19 or hepatic CYP7A1 mRNA levels (2013)
  • 著者名/発表者名: Shang Q, Guo GL, Honda A, Saumoy M, Salen G, Xu G.
  • 雑誌名: J. Lipid Res 巻: 54 ページ: 2606-2614
  • DOI: 10.1097/MIB.0b013e318281f423
  • 査読あり
• [雑誌論文] 7-Dehydrocholesterol metabolites produced by sterol 27-hydroxylase (CYP27A1) modulate liver X receptor activity (2013)
  • 著者名/発表者名: Endo-Umeda K, Yasuda K, Sugita K, Honda A, Ohta M, Ishikawa M, Hashimoto Y, Sakaki T, Makishima M.
  • 雑誌名: J. Steroid Biochem. Mol. Biol 巻: 140 ページ: 7-16
  • DOI: 10.1016/j.jsbmb.2013.11.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased serum liver X receptor ligand oxysterols in patients with non-alcoholic fatty liver disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Ikegami T, Hyogo H, Honda A, Miyazaki T, Tokushige K, Hashimoto E, Inui K, Matsuzaki Y, Tazuma S.
  • 雑誌名: J. Gastroenterol 巻: 47 ページ: 1257-1266
  • DOI: 10.1007/s00535-012-0585-0
  • 査読あり
• [学会発表] 慢性C型肝炎患者に見られる血清コレステロール値低下のメカニズム (2013)
  • 著者名/発表者名: 池上正,本多彰,松﨑靖司
  • 学会等名: 第21回日本消化器関連学会週間(ワークショップ)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-10-10
• [学会発表] 加齢と生活習慣病によるコレステロール(CHOL)代謝の変化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 本多彰,池上正,宮﨑照雄,松﨑靖司
  • 学会等名: 第13回日本抗加齢医学会総会(シンポジウム)
  • 発表場所: 橫浜
  • 年月日: 2013-06-29
• [学会発表] Combination therapy of primary biliary cirrhosis with ursodeoxycholic acid and a dual PPARα/PXR agonist, bezafibrate (2012)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Ikegami T, Miyazaki T, Nakamuta M, Takikawa H, Matsuzaki Y.
  • 学会等名: 第22回International Bile Acid Meeting (Falk Symposium)
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 20120614-15
• [学会発表] Increased serum liver X receptor ligand oxysterols in patients with non-alcoholic fatty liver disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Ikegami T, Honda A, Miyazaki T, Matsuzaki Y, Hyogo H, Tazuma S, Tokushige K, Hashimoto E, Inui K.
  • 学会等名: 第22回International Bile Acid Meeting (Falk Symposium)
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 20120614-15
• [学会発表] NAFLD患者血清における酸化ステロール上昇とその意義 (2012)
  • 著者名/発表者名: 池上正,本多彰,松﨑靖司
  • 学会等名: 第16回日本肝臓学会大会(ワークショップ)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2012-10-10
• [学会発表] クローン病における低コレステロール血症の発症機序と栄養指標としての意義について (2012)
  • 著者名/発表者名: 岩本淳一,本多彰,松﨑靖司
  • 学会等名: 第20回日本消化器関連学会週間(パネルディスカッション)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2012-10-10
• [学会発表] アルコール性脂肪肝患者の血清脂質メタボローム解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 本多彰,松﨑靖司
  • 学会等名: 第12回日本抗加齢医学会総会(シンポジウム)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2012-06-23