高等真核生物の染色体安定化を司る新規ＲＮＡ干渉複合体ＤＲＨ－３・Ｅ１の機能研究

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23590074
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 豊橋技術科学大学
• 研究代表者: 浴 俊彦 豊橋技術科学大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (40192512)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: ダイサー関連ヘリカーゼ / RNA干渉 / 線虫 / タンパク質機能解析

研究概要

本研究では、研究代表者が初めて見いだした、線虫の染色体動態制御と生殖細胞形成に必須なダイサー関連ヘリカーゼ DRH-3、およびDRH-3と相互作用する新規Tudorドメインタンパク質E1の分子機能解明を目指した。両遺伝子の変異体作成（計10種類）を行い、野生型と各種変異型のHisおよびGSTタグ融合タンパク質を調製し、生化学的解析を進めた。精製タンパク質を用いたプルダウン法により、野生型DRH-3とE1が結合することを初めて実証した。さらに遺伝学的解析により、DRH-3とE1が同じ経路で機能することを、細胞生物学的解析により、DRH-3とE1が細胞核内に局在する可能性をそれぞれ示した。

研究成果

• [雑誌論文] Trapping DNA replication origins from the human genome (2013)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Eki, Yasufumi Murakami and Fumio Hanaoka
  • 雑誌名: Genes(Basel) 巻: 4(2) ページ: 198-225
  • DOI: 10.3390/genes4020198
  • 査読あり
• [雑誌論文] Profiling nematode communities in unmanaged flowerbed and agricultural field soils in Japan by DNA barcode sequencing (2012)
  • 著者名/発表者名: Hisashi Morise, Erika Miyazaki, Shoko Yoshimitsu, and Toshihiko Eki
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(12), e51785 ページ: 12
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0051785
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of DNA damages in Saccharomyces cerevisiae caused by non-thermal atmospheric pressure plasmas (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Yamaguchi, Hachiro Yasuda, Toshihiko Eki, Hirofumi Kurita, Kazunori Takashima, and Akira Mizuno
  • 雑誌名: J. Inst. Electrostat. Jpn 巻: 35(1) ページ: 8-13
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sensitive detection of chemical-induced genotoxicity by the Cypridina secretory luciferase reporter assay using DNA repair-deficient strains of Saccharomyces cerevisiae (2011)
  • 著者名/発表者名: Yukari Ochi, Harumi Sugawara, Mio Iwami, Megumi Tanaka and Toshihiko Eki
  • 雑誌名: Yeast 巻: 28(4) ページ: 265-278
  • 査読あり
• [学会発表] 線虫の染色体動態制御に関与する新規Tudorドメインタンパク質の調製と解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 洲崎和真
  • 学会等名: 日本薬学会第134回年会
  • 発表場所: 熊本市総合体育館(熊本市)
  • 年月日: 2014-03-28
• [学会発表] 染色体動態制御に必須な線虫RNA干渉タンパク質DRH-3の分子機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 渡部周二
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(神戸市)
  • 年月日: 2013-12-03
• [学会発表] 染色体動態制御に必須な線虫RNA干渉タンパク質DRH-3の機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 渡部周二
  • 学会等名: 第77回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
  • 発表場所: 名古屋大学(名古屋市)
  • 年月日: 2013-05-25
• [学会発表] 線虫C. elegansの染色体安定化に関わるDRH-3タンパク質の機能解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 堀岡敬太
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: マリンメッセ福岡(福岡市)
  • 年月日: 2012-12-14
• [学会発表] Systematic screening for RNAi-related proteins that interact with a novel Dicer-like RNA helicase DRH-3 in C. elegans (2012)
  • 著者名/発表者名: Keita Horioka
  • 学会等名: The Irago conference (The Asia-Pacific Interdisciplinary Research Conference (AP-IRC2012))
  • 発表場所: Tahara (Aichi, Japan)
  • 年月日: 2012-11-15
• [学会発表] Further characterization of a novel Dicer-like RNA helicase DRH-3 in C. elegans (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀岡敬太
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市)
  • 年月日: 2011-12-16
• [学会発表] Systematic screening for RNAi-related proteins that interact with a novel Dicer-like RNA helicase DRH-3 in C. elegans (2011)
  • 著者名/発表者名: Keita Horioka
  • 学会等名: The Asia-Pacific Interdisciplinary Research Conference 2011 (AP-IRC 2011)
  • 発表場所: Toyohashi (Aichi, Japan)
  • 年月日: 2011-11-17
• [学会発表] Further characterization of drh-3 RNAi-treated nematode C. elegans (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Eki
  • 学会等名: The Asia-Pacific Interdisciplinary Research Conference 2011 (AP-IRC 2011)
  • 発表場所: Toyohashi (Aichi, Japan)
  • 年月日: 2011-11-17
• [図書] バイオセンサの先端科学技術と新製品への応用開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 浴俊彦,他
  • 出版者: 技術情報協会(印刷中)
• [図書] 分子細胞生物学事典 (2013)
  • 著者名/発表者名: 浴俊彦,他
  • 総ページ数: 330-339, 391-425, 442-456
  • 出版者: みみずく舎(医事評論社)
• [図書] キーワードで理解するシグナル伝達キーワード事典 (2012)
  • 著者名/発表者名: 浴俊彦,他
  • 総ページ数: 126-141
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 理工系学生のための生命科学・環境科学 (2011)
  • 著者名/発表者名: 浴俊彦,他
  • 総ページ数: 34-59
  • 出版者: 東京化学同人
• [図書] Ecotoxicology Around the Grobe (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Eki,他
  • 総ページ数: 1-52
  • 出版者: Nova Science Publishers
• [図書] Advances in Genetics Research, Volume 3 (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Eki,他
  • 総ページ数: 167-203
  • 出版者: Nova Science Publishers
• [備考]
  • URL: http://ens.tut.ac.jp/molgenetics/