セラミド・アラキドン酸代謝制御物質の創出と肺疾患への応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23590106
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 村山 俊彦 千葉大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (90174317)
• キーワード: セラミド / セラミド代謝酵素 / アラキドン酸 / セラミダーゼ / 肺線維症 / 肺がん細胞

研究概要

平成２５年度は，交付申請書に記載したように，平成２３年度，平成２４年度に開始した研究を継続発展させた．また肺がんモデル細胞を用いた研究に加えて，マウスに肺がん細胞を移植したり発がん性化学物質４－ＮＱＯ投与することで肺がんモデル動物を作成することを試みた．得られた成果の概要を以下に記載する．
細胞質alpha型ホスホリパーゼＡ２(cPLA２alpha)活性に対する新規合成セラミド誘導体の網羅的解析を進め，新規のcPLA2alpha活性阻害作用を有する誘導体を見出した．この成果は学会発表するとともに英文論文として公表した．この研究を展開する中で細胞内ゴルジ装置を安定的に標識でき細胞毒性が少ない新規化合物を見出し特許申請を行った．また，セラミド代謝酵素であるセラミダーゼの解析を行い，肺がんモデル細胞でるＡ５４９細胞においてc-Src型チロシンキナーゼにより正に制御されていることを明らかにした．現在セラミドキナーゼ，グルコース付加酵素などの活性制御機構と誘導体による活性修飾を検討している．
肺線維化に関する研究ではヒトの肺由来線維芽細胞を用いて研究を進め，スフィンゴシン－１ーリン酸（Ｓ１Ｐ）が，Ｓ１Ｐ３受容体を介して線維化促進作用を示し，Ｓ１Ｐ１受容体を介した場合にはアラキドン酸－プロスタノイド系を介して線維化抑制方向に作用することを見出した．線維化に関してＳ１Ｐが二面性の作用を示すことを初めて明らかにした．肺がんモデル細胞でのアラキドン酸代謝，セラミド代謝とそれに対する新規合成セラミド誘導体を検討している．肺気道過敏症モデルマウスを薬物投与により作製したが気道閉塞などの反応性が安定しなかった．また肺がんモデルマウスの作成にあたっても，肺がんの出現率にばらつきが大きく今後のさらなる検討が必要であった．

研究成果

• [雑誌論文] A novel indole compound, AWT-489, inhibits prostaglandin D2-induced CD55 expression by acting on DP prostanoid receptors as an antagonist in LS174T human colon cancer cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Oyama S, Fujino H, Yamazaki R, Okura I, Regan JW, Awata A, Arai T, Murayama T.
  • 雑誌名: Arch. Biochem. Biophys. 巻: 541 ページ: 21-29
  • DOI: org/10.1016/j.abb.2013.10.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of sphingolipids in arachidonic acid metabolism. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakamura H, Murayama T.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Sci. 巻: 124 ページ: 307-312
  • DOI: 10.1254/jphs.13R18CP
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of alkaline ceramidase activity by the c-Src-mediated pathway. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H, Toyomura K, Matsuzaki W, Okamoto A, Yamaguchi N, Nakamura H, Murayama T.
  • 雑誌名: Arch. Biochem. Biophys. 巻: 550-551 ページ: 12-19
  • DOI: 10.1016/j.abb.2014.03.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lactosylceramide interacts with and activates cytosolic phospholipase A2alpha. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakamura H, Moriyama Y, Makiyama T, Emori S, Yamashita H, Yamazaki R, Murayama T.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 288 ページ: 23264-23272
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.491431
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of cyclooxygenase-2 expression by prostaglandin E2 stimulation of the prostanoid EP4 receptor via coupling to Galpha-i and transactivation of the epidermal growth factor receptor in HCA-7 human colon cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshida K, Fujino H, Otake S, Seira N, Regan JW, Murayama T.
  • 雑誌名: Eur. J. Pharmacol. 巻: 718 ページ: 408-417
  • DOI: org/10.1016/j/ejphar.2013.08.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bee venom phospholipase A2-induced phasic contractions in mouse rectum: independent roles of eicosanoid and gap junction proteins and their loss in experimental colitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nomura R, Yanagihara M, Sato H, Matsumoto K, Tashima K, Horie S, Chen S, Fujino H, Ueno K, Murayama T.
  • 雑誌名: Eur. J. Pharmacol. 巻: 718 ページ: 314-322
  • DOI: org/10.1016/j/ejphar.2013.08.015
  • 査読あり
• [学会発表] ラクトシルセラミドによる細胞質型ホスホリパーゼA2活性化機構の解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中村浩之，森山友太，牧山智彦，江森俊介，山下尚大，山崎璃沙，村山俊彦
  • 学会等名: 日本薬学会第１３４年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] 肺線維化への免疫抑制剤の影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山崎璃沙，松澤康雄，川島辰夫，柳原まどか，中村浩之，藤野裕道，村山俊彦
  • 学会等名: 第８７回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20140319-20140321
• [学会発表] 新規インドール化合物AWT-489はDPプロスタノイド受容体にアンタゴニストとして作用しCD55発現を抑制する (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤野裕道，大山聡美，山崎璃沙，大蔵伊織，John W REGAN，阿波田篤子，荒井孝義，村山俊彦
  • 学会等名: 第８７回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20140319-20140321
• [学会発表] TGF-beta1による肺線維化への免疫抑制剤の影響
  • 著者名/発表者名: 山崎璃沙，松澤康雄，川島辰夫，柳原まどか，中村浩之，藤野裕道，村山俊彦
  • 学会等名: 第１２８回日本薬理学会関東部会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] スフィンゴ脂質によるマスト細胞脱顆粒反応調節機構の解明
  • 著者名/発表者名: 牧山智彦，中村浩之，村山俊彦
  • 学会等名: 次世代を担う創薬・医療薬理シンポジウム２０１３
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] 細胞内コレステロール輸送に対するスフィンゴミエリンの関与
  • 著者名/発表者名: 鰐川雅裕，中村浩之，藤野裕道，村山俊彦
  • 学会等名: 第５７回日本薬学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京