汎用難燃物質の発達期暴露により重症化したウイルス性肺炎でのＩＬ－２４の作用の解析

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23590161
• 研究機関: 九州保健福祉大学
• 研究代表者: 渡辺 渡 九州保健福祉大学, 薬学部, 教授 (50399218)
• 研究分担者: 黒川 昌彦 九州保健福祉大学, 薬学部, 教授 (80186527) ; 吉田 裕樹 九州保健福祉大学, 薬学部, 講師 (90469411)
• キーワード: TBBPA / RSV / IL-24

研究概要

汎用臭素化難燃物質テトラブロモビスフェノールA（以下、TBBPAと略す）を周産期に曝露させたマウスにおいて、RSウイルスによる肺炎が増悪化するとともに特異的にIL-24発現が上昇する機構を解明することを研究の目的とした。
RSウイルス感染培養マクロファージ細胞RAW264.7細胞において、TBBPAを曝露してRSウイルス感染後2日後からIL-24の発現上昇が顕著になるのに対して、TNF-aは感染24時間以内に上昇し、2日後にはタンパク質レベルで抑制されていることが判明した。これより、IL-24は炎症惹起の誘導物質ではなく作用物質として初期の炎症を抑制することが示唆された。この効果を確認するためにIL-24 siRNA導入を実施して同様の試験を実施したが、検証ができなかった。
本研究期間を通じて、まず免疫組織染色法によりタンパク質レベルでRSウイルス感染病態におけるIL-24の標的を見出すことができた。そして、RAW264.7細胞を用いて、TBBPA本体がリアルタイムPCRとウェスタンブロット法でIL-24のmRNAとタンパク質発現上昇に作用していることを明らかとした。このIL-24の上昇とTNF-aの抑制がリンクしていることを明らかにしたが、RNAiが本試験系では期待通りにワークせず、IL-24の感染細胞内での働きをクリアにすることができなかった。これにより、計画書で提案したIL-24プロモーター等を用いたレポータージーンアッセイ系の構築まで到達することができなかった。
TBBPAは周産期における作用ばかりではなく、成体マウスのRSウイルス感染病態も悪化させ、特にT細胞系の質的な変化をもたらせることが分かってきた。この現象へのIL-24の関与も今後検証していき、環境衛生分野における汎用臭素化難燃物質の規制だけでなくRSウイルス感染病理にも重要な情報を提供していきたい。

研究成果

• [雑誌論文] Perinatal exposure to insecticide methamidophos suppressed production of proinflammatory cytokines responding to virus infection in lung tissues in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Watanabe,W., Yoshida, H., Hirose, A., Akashi, T., Takeshita, T., Kuroki, N., Shibata, A., Hongo, S., Hashiguchi, S., Konno, K., Kurokawa, M.
  • 雑誌名: BioMed. Res. Int. 巻: 0 ページ: 151807-151814
  • DOI: 10.1155/2013/151807
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of Brazilian propolis on exacerbation of respiratory syncytial virus infection in mice exposed to tetrabromobisphenol A, a brominated flame retardant. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takeshita, T., Watanabe, W., Toyama, S., Hayashi, Y., Honda, S., Sakamoto, S., Matsuoka, S., Yoshida, H., Takeda, S., Hidaka, M., Tsutsumi, S., Yasukawa, K., Park, Y.K., Kurokawa, M.
  • 雑誌名: Evid.-Based Compl. Alt. Med. 巻: 0 ページ: 698206-698212
  • DOI: 10.1155/2013/698206
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of oral administration of probiotics from Mongolian dairy products on Th1 immune response in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takeda, S., Kawahara, S., Hidaka, M., Yoshida, H., Watanabe, W., Takeshita, M., Kikuchi, Y., Bumbein, D., Muguruma, M., Kurokawa, M.
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem. 巻: 77 ページ: 1372-1378
  • 査読あり
• [学会発表] 多層型カーボンナノチューブ曝露によるRSウイルス感染免疫への影響
  • 著者名/発表者名: 橋口誠子、吉田裕樹、徳田健治、紺野克彦、明石 敏、広瀬明彦、黒川昌彦、渡辺 渡
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本（市民体育館）
• [学会発表] Perinatal exposure to an insecticide methamidophos affected the immune redponse to virus infection in the next generation of mice.
  • 著者名/発表者名: Wataru Watanabe, Hiroki Yoshida, Akihiko Hirose, Masahiko Kurokawa
  • 学会等名: EUROTOX2013
  • 発表場所: スイス（インターラーケン国際会議場）
• [備考] 九州保健福祉大学薬学部生化学講座・微生物学研究室
  • URL: http://biochem-kuhw.org/