| 研究概要 |
カロリ病は肝内胆管の進行性の嚢状拡張をきたす疾患で，常染色体劣性多発嚢胞腎の肝胆管病変として,近年，多発性嚢胞腎の病態形成におけるAKT-mTORシグナリングの関与が注目されている．本年度は，カロリ病動物モデルとして確立されているpolycystic kidney(PCK)ラットを用い， mTOR阻害薬による胆管上皮細胞の増殖抑制効果を検討した．免疫染色でラット肝組織切片に対しp-AKT, p-mTORを検討した．また，PCKラットの培養胆管上皮細胞（biliary epithelial cell, BEC）にmTOR阻害薬（sirolimus [SL], everolimus [EL], PP242）を作用させ，細胞増殖活性,アポトーシス，オートファジーおよび嚢胞（spheroid）形成に及ぼすmTOR阻害薬の効果を検討した．免疫染色による検討の結果, PCKラットの胆管細胞でp-AKTとp-mTORの発現が正常ラットより亢進していた．SL, EL, PP242はいずれもBECの細胞増殖を抑制し，ウエスタンブロットでp-AKT, p-mTOR, p-P70S6Kの発現は抑制された．3次元培養でPP242はC-BECの嚢胞形成を抑制したが，SLとELに嚢胞形成の抑制効果はなかった．SL, EL, PP242はC-BECのアポトーシスを誘導し，PP242のみがオートファジーも誘導した．mTORにはmTORC1とmTORC2の2種類の複合体が存在し，SLとELはmTORC1阻害薬，PP242はmTORC1+C2阻害薬である.今回の検討結果から，mTORC1+C2の双方を阻害することがPCKラットの胆管拡張の抑制により有効と考えられた．
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