固形癌の細胞内キナーゼカスケード特異的活性化様式の解析と個別化抗癌療法への応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23590409
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 土橋 洋 自治医科大学, 医学部, 准教授 (90231456)
• 研究分担者: 遠藤 俊輔 自治医科大学, 医学部, 教授 (10245037) ; 柳川 天志 群馬大学, 医学部附属病院, 講師 (40400725) ; 北川 雅敏 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)
• キーワード: 肺癌 / 骨軟部肉腫 / Akt / mTOR / 遺伝子増幅 / 遺伝子多型 / シグナル伝達

研究概要

肺癌, 骨軟部腫瘍で増殖因子受容体の下流因子、Akt/mTORの遺伝子の数的異常、蛋白の過剰発現、活性化の解析を行った。
1. 肺癌のAkt異常： Aktの発現は肺癌全体の約60%、活性化とAkt1,2の発現は約40%で認められたが、Akt3発現は23%で有意に低かった。FISH解析により15%にAKT1/2遺伝子増幅、高レベルpolysomyが見られ、この群はAktの活性化を伴い、EGFR遺伝子の異常が無く、AKT-addictionが示唆された(2012年, 日本病理学会、日本癌学会発表, Hum. Pathol. 2012)。臨床病理学的にはAKT1の増加は腫瘍径と相関し、p-AktとAkt2の発現はリンパ節転移と有意に相関した。 2. 骨軟部肉腫ではAkt-mTOR系の活性化頻度が高く、total-Aktの発現は84%、活性化は71%、Akt1, Akt2 isoformは70%であった。特に悪性末梢神経鞘腫では40-60%に活性化があり、予後不良群であった(Clin. Can. Res., 2012)。AKT1/AKT2遺伝子増加は13%, 25%に見られたが全てpolysomyで、増幅例は無かった(2013年 日本病理学会、癌学会発表, Hum. Pathol. 2014)。 3. mTORで変動する因子：microarrayで抽出した肺癌でmTORの発現により変動する因子は、扁平上皮癌でmTORと拮抗し、浸潤先端部で発現が高かった。4. arrayで抽出した肺癌でAKT1、AKT2 の増加により変動するmRNA, microRNA(miRNA)はオーバーラップがあり、転移、間質との相互作用に関与する蛋白、メチル化やK-rasを制御するmiRNAが得られた。特に上皮間葉転換(EMT)に関与するmiRNA200は組織型別、Stage別に、それを制御するAKTが異なり、さらに多数症例での解析を行っている。 5. AKTsの多型と臨床的パラメータとの関連性の解析で、AKT3の複数多型部位と高血圧、肥満、糖尿病、AKT1の1部位で癌易罹患性に関連を認めた。多数症例での解析を浜松医大・椙村教授(連携研究者)と行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Significance of Akt activation and AKT gene increases in bone and soft tissue tumors. (2014)
  • 著者名/発表者名: Dobashi, Y., Sato, E., Oda, Y., Inazawa, J. and Ooi, A.
  • 雑誌名: Hum. Pathol. 巻: 45(1) ページ: 127-36
  • DOI: S0046-8177(13)00368-7 [pii]10.1016/j.humpath.2013.06.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intratumoral heterogeneous amplification of ERBB2 and subclonal genetic diversity in gastric cancers revealed by multiple ligation-dependent probe amplification and fluorescence in situ hybridization. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tajiri. R., Ooi. A., Fujimura, T., Dobashi, Y., Oyama, T., Nakamura, R. and Ikeda, H.
  • 雑誌名: Hum Pathol. 巻: 45(4) ページ: 725-34
  • DOI: S0046-8177(13)00481-4 [pii] 10.1016/j.humpath.2013.11.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic aberrations as the targets of oncology research: Involvement of paraffin-embedded tissues. (2014)
  • 著者名/発表者名: Dobashi. Y., Goto. A., Endo, T., and Ooi, A.
  • 雑誌名: Histol. Histopathol. 巻: 29(2) ページ: 191-205
  • DOI: HH-11-417 [pii]
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clonal profiling of mixed lobular and ductal carcinoma revealed by multiplex ligation-dependent probe amplification and fluorescence in situ hybridization. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tajiri, R., Inokuchi, M., Sawada-Kitamura, S., Kawashima, H., Nakamura, R., Oyama, T., Dobashi, Y., Ooi, A.
  • 雑誌名: Pathol. Int. 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Carcinoid tumor of the lung with massive ossification: report of a case showing the evidence of osteomimicry and review of the literature. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsubochi, H., Endo, S., Oda, Y. and Dobashi, Y.
  • 雑誌名: Int J Clin Exp Pathol . 巻: 6(5) ページ: 957-61
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic Significance of AKT/mTOR and MAPK Pathways and Antitumor Effect of mTOR Inhibitor in NF1-Related and Sporadic Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumors. (2013)
  • 著者名/発表者名: Endo M, Yamamoto H, Setsu N, Kohashi K, Takahashi Y, Ishii T, Iida K, Matsumoto Y, Hakozaki M, Aoki M, Iwasaki H, Dobashi Y, Nishiyama K, Iwamoto Y, Oda Y.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 巻: 19(2): ページ: 450-61
  • DOI: 1078-0432.CCR-12-1067 [pii]10.1158/1078-0432.CCR-12-1067
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of Long-Term Treatment with Ranirestat, a Potent Aldose Reductase Inhibitor, on Diabetic Cataract and Neuropathy in Spontaneously Diabetic Torii Rats. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ota, A., Kakehashi, A., Toyoda,F., Kinoshita, N., Shinmura, M., Takano, H., Obata, H., Matsumoto, T., Tsuji, J., Dobashi, Y., Fujimoto, W.Y., Kawakami, M. and Kanazawa, Y.
  • 雑誌名: Journal of Diabetes Research 巻: 1 ページ: 1-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Utility of Fluorescence in situ Hybridization to Detect MDM2 Amplification in Liposarcomas and their Morphological Mimics. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura, H., Dobashi, Y., Nojima, T., Nakamura, H., Yamamoto, N., Tsuchiya, H., Ikeda, H., Sawada-Kitamura, S., Oyama, T. and Ooi, A.
  • 雑誌名: Int J Clin Exp Pathol . 巻: 6(7) ページ: 1306-16
  • 査読あり
• [学会発表] FISHとMLPAを用いた胃癌におけるHER2遺伝子増幅の腫瘍内不均一性の検討. (2013)
  • 著者名/発表者名: 大井 章史、田尻 亮輔、中村 律子、尾山 武、藤村 隆、土橋 洋.
  • 学会等名: 第 72回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] Significance of Akt activation and AKT gene increases in bone and soft tissue tumors. (2013)
  • 著者名/発表者名: 土橋 洋、小田 義直、稲澤 譲治、大井 章史.
  • 学会等名: 第 72回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] 骨軟部腫瘍におけるAKT遺伝子の異常と蛋白活性化. (2013)
  • 著者名/発表者名: 土橋 洋、蛭田 昌宏、椙村 春彦、山田 茂樹、大井 章史.
  • 学会等名: 第 102回日本病理学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20130606-20130608
• [学会発表] Utility of FISH to Detect MDM2 Amplification in Liposarcomas and their Morphologic Mimics. (2013)
  • 著者名/発表者名: 大井 章史、土橋 洋、野島 孝之、池田 博子、北村 星子、尾山 武.
  • 学会等名: 第 102回日本病理学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20130606-20130608