上咽頭がん幹細胞におけるＥＢウィルス感染の関与

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23590443
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 飯笹 久 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教 (80306662)
• キーワード: EBウイルス / 幹細胞

研究概要

Epstein-Barrウイルス(EBV)陽性上咽頭がん細胞株C666-1からの、EBV陰性細胞株樹立を再度試みた。薬剤処理や限界希釈法を組み合わせ株化を試みたが、陰性株樹立はできなかった。FISH法による解析ではバーキットリンパ腫細胞株Akata（0-40コピー/細胞）と比較して、C666-1細胞1つあたり大量のEBV（50-100コピー／細胞）が存在した。またAkataと異なりEBVがない細胞は認められなかった。これらの結果は、C666-1の細胞増殖はEBウイルスに依存することを示唆している。また、EBV感染がヒト上皮細胞に与える影響を解析するために、ヒト乳腺上皮不死化細胞株MCF10AにEBVを感染させたところ、E-cadherinの発現は減少しなかったが、その局在は細胞外から細胞内へと変化し、E-cadherinを基質とするユビキチンリガーゼの発現が上昇していた。これらの結果は、EBV感染上皮細胞ではE-cadherinの局在異常を介して、上皮間葉系移行が成立していることを示している。現在、より詳細な分子機構を解析中である（第10回EBウイルス研究会にて発表）。
次に、がん幹細胞集団を分離するために幹細胞特異的転写因子SOX2プロモーターの解析を行い、SOX2プロモーター活性はSOX2遺伝子の発現と相関性があり、プロモーター活性陽性細胞は、高いSphere formation活性を有していた（Liang S et al, Biochem Biophys Res Commun. 2013）。更にSOX2プロモーター結合タンパク質を同定し、同定した因子がSOX2プロモーターの活性を抑制し、Sphere formation活性やSide population活性などの、がん幹細胞に特徴的な活性の制御を行なっていることが明らかとなった（投稿中）。

研究成果

• [雑誌論文] Basic Fibroblast Growth Factor Is Essential to Maintain Endothelial Progenitor Cell Phenotype in TR-BME2 Cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sai Y, Nishimura T, Muta M, Iizasa H, Miyata T, Nakashima E.
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: 37 ページ: 688-693
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and characterization of human breast cancer cells with SOX2 promoter activity. (2013)
  • 著者名/発表者名: Liang S, Furuhashi M, Nakane R, Nakazawa S, Goudarzi H, Hamada J, Iizasa H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 437 ページ: 205-211
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.06.038.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypoxia affects in vitro growth of newly established cell lines from patients with malignant pleural mesothelioma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Goudarzi H, Hida Y, Takano H, Teramae H, Iizasa H, Hamada J.
  • 雑誌名: Biomed Res 巻: 34 ページ: 13-21
  • 査読あり
• [雑誌論文] Estrogen receptor α induction by mitoxantrone increases Abcg2 expression in placental trophoblast cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Oda K, Nishimura T, Higuchi K, Ishido N, Ochi K, Iizasa H, Sai Y, Tomi M, Nakashima E.
  • 雑誌名: J Pharm Sci 巻: 102 ページ: 3364-3372
  • DOI: 10.1002/jps.23549.
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAR1 forms a complex with Dicer to promote microRNA processing and RNA-induced gene silencing. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ota H, Sakurai M, Gupta R, Valente L, Wulff BE, Ariyoshi K, Iizasa H, Davuluri RV, Nishikura K.
  • 雑誌名: Cell 巻: 153 ページ: 575-589
  • DOI: 10.1016/j.cell.2013.03.024.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of in vitro cell motility and invasiveness of human malignant pleural mesothelioma cells through the HIF-1α-MUC1 pathway. (2013)
  • 著者名/発表者名: Goudarzi H, Iizasa H, Furuhashi M, Nakazawa S, Nakane R, Liang S, Hida Y, Yanagihara K, Kubo T, Nakagawa K, Kobayashi M, Irimura T, Hamada J.
  • 雑誌名: Cancer Lett 巻: 339 ページ: 82-91
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2013.07.020.
  • 査読あり
• [学会発表] RNA編集と遺伝子発現制御. (2013)
  • 著者名/発表者名: 飯笹久.
  • 学会等名: 第３６回分子生物学会年会 ワークショップ“RNAの包括的解析による細胞制御機構と疾患病態解明
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（神戸市）
  • 年月日: 20131203-20131206
  • 招待講演
• [学会発表] RNA結合タンパク質p54nrbは、SOX2プロモーター制御を介してSOX2の発現を抑制する. (2013)
  • 著者名/発表者名: 梁珊珊、藏滿保宏、廣瀬哲郎、古橋昌子、中根梨恵、中澤誠多朗、中村和行、浜田淳一、飯笹久.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] ヒト乳がん細胞株から分離したSOX2プロモーター活性陽性細胞の解析. (2013)
  • 著者名/発表者名: 飯笹久、梁珊珊、古橋昌子、中根梨恵、中澤誠多朗、浜田淳一.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] ピロリ菌感染が胃粘膜上皮細胞へのEBウイルス感染増殖を促進する. (2013)
  • 著者名/発表者名: 林秦弘、西川潤、地主将久、飯笹久、高田賢蔵.吉山裕規.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] RNA結合タンパク質p54nrbは、SOX2の転写翻訳抑制を介して乳癌幹細胞様活性を制御する. (2013)
  • 著者名/発表者名: 梁珊珊、藏滿保宏、廣瀬哲郎、古橋昌子、中根梨恵、中澤誠多朗、中村和行、浜田淳一、飯笹久.
  • 学会等名: 第15回RNAミーティング
  • 発表場所: 県民文化会館ひめぎんホール （松山市）
  • 年月日: 20130724-20130726
• [学会発表] EBV感染によるヒト上皮細胞の極性喪失について. (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉山裕規、飯笹久、呉里美、坂井香織、藤田奈々、林泰弘、南保明日香、高田賢蔵.
  • 学会等名: 第10回EBウイルス研究会
  • 発表場所: キャンパスプラザ京都（京都市）
  • 年月日: 20130712-20130712
• [図書] “MicroRNAs and oncogenic human viruses.” MicroRNAs: Key Regulators of Oncogenesis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Thirion M, Kanda T, Murakami Y, Ochiya T and Iizasa H.
  • 総ページ数: 433
  • 出版者: Springer