Ｃ型肝炎ウイルス持続感染培養肝細胞を用いた持続感染と代謝異常の機構解明

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23590551
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 杉山 和夫 慶應義塾大学, 医学部, 特任准教授 (10242520)
• 連携研究者: 齋藤 英胤 慶應義塾大学, 薬学部, 教授 (80186949)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: C型肝炎ウイルス / ペントースリン酸経路 / コレステロール / 脂肪酸 / Nrf2 / メタボローム / 脂肪滴

研究概要

本研究ではHCVの持続感染による代謝異常を解明するために、HCV持続感染培養肝細胞(HPI細胞)を樹立した。この細胞では著しい脂肪滴の蓄積が認められたので、マイクロアレイとメタボロームの統合的解析を試みた。その結果、HPI細胞では律速酵素の発現亢進を伴うコレステロール、脂肪酸の増加が認められた。また、ペントースリン酸経路が亢進し、NADPHの産生亢進も認められた。TCA回路も亢進しており著しい代謝亢進状態にあった。また、転写因子Nrf2の恒常的リン酸化が糖脂質代謝を恒常的に亢進させていると考えられた。
以上よりHPI細胞はHCVのウイルス学的解析および肝代謝解析のツールとして有用である。

研究成果

• [雑誌論文] Prominent Steatosis with Hypermetabolism of the Cell Line Permissive for Years of Infection with Hepatitis C Virus (2014)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama K, Ebinuma H, Nakamoto N, Sakasegawa N, Murakami Y, Chu P, Usui S, Ishibashi Y, Wakayama Y, Taniki N, Murata H, Saito Y, Fukasawa M, Saito K, Yamagishi Y, Wakita T, Takaku H, Hibi T, Saito H, Kanai T
  • 雑誌名: PLoS One
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0094460
  • 査読あり
• [雑誌論文] Free cholesterol accumulation in hepatic stellate cells : Mechanism of liver fibrosis aggravation in nonalcoholic steatohepatitis in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita K, Teratani T, Suzuki T, Shimizu M, Sato H, Narimatsu K, Okada Y, Kurihara C, Irie R, Yokoyama H, Shimamura K, Usui S, Ebinuma H, Saito H, Watanabe C, Komoto S, Kawaguchi A, Nagao S, Sugiyama K, Hokari R, Kanai T, Miura S, Hibi T
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 59(1) ページ: 154-69
  • DOI: 10.1002/hep.26604
  • 査読あり
• [雑誌論文] HCV infection induces inflammatory cytokines and chemokines mediated by the cross-talk between hepatocytes and stellate cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishitsuji H, Funami K, Shimizu Y, Ujino S, Sugiyama K, Seya T, Takaku H, Shimotohno K
  • 雑誌名: J Virol 巻: 87 ページ: 8169-8178
  • DOI: 10.1128/JVI.00974-13
  • 査読あり
• [雑誌論文] p53/p66Shc-mediated signaling contributes to the progression of non-alcoholic steatohepatitis in humans and mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomita K, Teratani T, Suzuki T, Oshikawa T, Yokoyama H, Shimamura K, Nishiyama K, Mataki N, Irie R, Minamino T, Okada Y, Kurihara C, Ebinuma H, Saito H, Shimizu I, Yoshida Y, Hokari R, Sugiyama K, Hatsuse K, Yamamoto J, Kanai T, Miura S, Hibi T
  • 雑誌名: J Hepatol 巻: 57 ページ: 837-843
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2012.05.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] A high-cholesterol diet exacerbates liver fibrosis in mice via accumulation of free cholesterol in hepatic stellate cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Teratani T, Tomita K, Suzuki T, Oshikawa T, Yokoyama H, Shimamura K, Tominaga S, Hiroi S, Irie R, Okada Y, Kurihara C, Ebinuma H, Saito H, Hokari R, Sugiyama K, Kanai T, Miura S, Hibi T
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 142 ページ: 152-164
  • DOI: 10.1053/j.gastro.2011.09.049
  • 査読あり
• [学会発表] メタボローム・トランスクリプトーム統合的解析によるC型肝炎肝脂肪蓄積の機構解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤,日比紀文
  • 学会等名: 第16回日本肝臓学会大会(JDDW 2013)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131009-12
• [学会発表] HCV研究私の研究とSerendipity、C型肝炎ウイルス持続感染培養肝細胞の樹立と応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤,日比紀文
  • 学会等名: 第39回日本肝臓学会東部会
  • 発表場所: 東京(シンポジウム)
  • 年月日: 20121206-07
• [学会発表] Usefulness of A Long-term (Over 2 years) Cultured Cell Clone Persistently and Productively Infected with HCV (2012)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama K, Saito H, Sakasegawa N, Murakami Y, Ebinuma H, Nakamoto N, Usui S, Ishibashi Y, Chu P, Wakayama Y, Saito Y, Kanai T, Hibi T
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 20121109-13
• [学会発表] New Insights on Hepatic Inflammatory Pseudotumor by Gd-EOB-DTPA MR Imaging (2012)
  • 著者名/発表者名: Usui S, Chu P, Wakayama Y, Ishibashi Y, Nakamoto N, Yamagishi Y, Masugi Y, Ebinuma H, Sugiyama K, Tanimoto A, Kanai T, Saito H, Hibi T
  • 学会等名: ACG 2012 Annual Scientific Meeting
  • 発表場所: Las Vegas, USA
  • 年月日: 20121019-24
• [学会発表] 新たなHCV研究ツールとしてのHCV持続感染培養肝細胞およびその治癒細胞の樹立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤、酒瀬川典子、村上優子、海老沼浩利、中本伸宏、梅田瑠美子、碓井真吾、石橋由佳、ちょ柏松、若山遊子、齋藤義正、日比紀文
  • 学会等名: 第48回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢(ワークショップ)
  • 年月日: 20120607-08
• [学会発表] Age and the liver stiffness measured by Fibroscan are significant predictive values for hepatoma development in chronic liver diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishibashi Y, Ebinuma H, Sugiyama K, Nakamoto N, Yamagishi Y, Usui S, Cho HS, Umeda R, Wakayama Y, Takaishi H, Kanai T, Sakamoto M, Saito H, Hibi T
  • 学会等名: 62nd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, USA
  • 年月日: 20111104-08
• [学会発表] Significant and continuous elevation of serum total cholesterol levels in patients with chronic hepatitis C who achieved sustained virological response by peginterferon and rivabirin treatment (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebinuma H, Saito H, Sugiyama K, Nakamoto N, Yamagishi Y, Usui S, Cho HS, Umeda R, Ishibashi Y, Wakayama Y, Kanai T, Hibi T
  • 学会等名: 62nd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, USA
  • 年月日: 20111104-08
• [学会発表] キメラHCV(1b/2a)持続感染細胞のメタボローム解析(Metabolome analysis of the cultured hepatocytes persistently infected with Chimeric HCV (1b/2a) (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤、海老沼浩利、高久洋、日比紀文
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20111003-05
• [学会発表] Nrf2/sMaf転写因子複合体はHCVによる肝細胞脂肪蓄積に関与する (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、海老沼浩利、酒瀬川典子、齋藤義正、金井隆典、日比紀文、齋藤英胤
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20111003-05
• [図書] がん生物学イラストレイティド, 腫瘍ウイルス(肝炎ウイルス) (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫, (渋谷正史,湯浅保仁編)
  • 総ページ数: 32-42
  • 出版者: 羊土社