ＭＤ分子による免疫応答制御機構

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 23590564
• 研究機関: 愛知医科大学
• 研究代表者: 高村 祥子 (赤司 祥子) 愛知医科大学, 医学部, 教授 (00325599)
• キーワード: MD-1 / RP105 / 脂質レセプター

研究概要

当研究課題での研究計画は以下のとおりである。
１．脂質代謝・運搬に対するMD-1の役割　２．エンドトキシンショックにおけるMD-1の重要性　３．MD-1と自己免疫疾患との関連　４．脂質会合分子MD分子群の機能解析　５ 脂質会合機能とTLR応答および抗体産生機能との関与
本年度はこのうち主に１．の発展としてリゾリン脂質受容体を介する反応と免疫応答に関して結果を得た。MD-1がリゾリン脂質とも結合することを見出したことや、リゾリン脂質受容体抑制剤の中でＢ細胞に影響するものがあることなどから、リゾリン脂質受容体のコンディショナルノックアウトマウスを入手し解析を行った。このマウスではワイルドタイプに比べＢ細胞の活性化や増殖反応が低下していた。ノックアウトマウス由来のＢ細胞では成熟Ｂ細胞が減少し未熟Ｂ細胞が増加しており、Ｂ細胞の分化成熟にも差を認めた。また脂質受容体阻害剤でもＢ細胞受容体を介する活性化が抑制された。さらにそれぞれの抗体を用いた免疫沈降により、この脂質受容体とＢ細胞受容体とが会合していることを見出した。以上より脂質受容体を介するシグナルはＢ細胞受容体を介する増殖・活性化・成熟に重要であることが今回判明した（2013年免疫学会にて発表）。
また昨年２．の計画の発展として、自己免疫疾患モデルマウスとMD-1欠失マウスを掛け合わせたマウスでは、ワイルドタイプ掛け合わせ群にくらべリンパ腫大・脾腫等の症状の差を認めた。このことからMD-1がリゾリン脂質と結合することや、前述の脂質受容体によるＢ細胞応答制御と、リンパ腫増大とが関係あるかどうか、さらに検討を進めていく（研究期間延長申請済み）。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

MD-1が脂質をポケットに抱合することの意義がこれまでわからなかったが、MD-1がリゾリン脂質とも結合すること、リゾリン脂質受容体がＢ細胞応答に重要であるという結果をコンディショナルノックアウトマウスから得られたことから、RP105/MD-1によるB細胞活性化にもリゾリン脂質受容体が関与する可能性が高まってきた。

今後の研究の推進方策

昨年２．の計画の発展として、自己免疫疾患モデルマウスとMD-1欠失マウスを掛け合わせたマウスでは、ワイルドタイプ掛け合わせ群に比べリンパ腫大・脾腫等の症状の差を認めていた。このことからMD-1がリゾリン脂質と結合することや、前述の脂質受容体によるB細胞応答制御と、リンパ腫増大とが関係あるかどうか、さらに検討を進めていく（研究期間延長申請済み）。

次年度の研究費の使用計画

平成25年度中に完了予定であったＭＤ分子の免疫応答制御機構の結果が発展し、腫瘍化との関係も含めた解析が必要となってきたため、実験研究計画の変更をせざるを得なかった。また、腫瘍化との関係も含めた解析手法にあたっては、当初計画していたものとは異なる他の見解が出つつあり、研究結果の広がりを含めて、研究計画を延長し追加実験の必要が生じてきたこと等の理由から、未使用額が発生した。
この為未使用額は腫瘍化との関係も含めた解析に必要な消耗品費および成果発表に必要な経費に充てることとしたい。

研究成果

• [雑誌論文] The attenuated inflammation of MPL is due to the lack of CD14-dependent tight dimerization of the TLR4/MD2 complex at the plasma membrane. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanimura N, Saitoh SI, Ohto U, Akashi-Takamura S, Fujimoto Y, Fukase K, Shimizu T, Miyake K.
  • 雑誌名: Int Immunol. 巻: 1 ページ: 1-8
  • DOI: doi: 10.1093/intimm/dxt071
  • 査読あり
• [雑誌論文] 敗血症性ショックに関与するToll-like Receptorの機能 (2014)
  • 著者名/発表者名: 高村（赤司）祥子
  • 雑誌名: 化学療法の領域 巻: 30 ページ: 40-47
• [雑誌論文] Primary tumours modulate innate immune signalling to create pre-metastatic vascular hyperpermeability foci. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hiratsuka S, Ishibashi S, Tomita T, Watanabe A, Akashi-Takamura S, Murakami M, Kijima H, Miyake K, Aburatani H, Maru Y.
  • 雑誌名: Nat Commun. 巻: 4 ページ: 1-10
  • DOI: doi: 10.1038/ncomms2856
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum amyloid A3 binds MD-2 to activate p38 and NF-κB pathways in a MyD88-dependent manner. (2013)
  • 著者名/発表者名: Deguchi A, Tomita T, Omori T, Komatsu A, Ohto U, Takahashi S, Tanimura N, Akashi-Takamura S, Miyake K, Maru Y.
  • 雑誌名: J Immunol. 巻: 191 ページ: 1856-64
  • DOI: doi: 10.4049/jimmunol.1201996
  • 査読あり
• [雑誌論文] Noncanonical inflammasome activation by intracellular LPS independent of TLR4. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kayagaki N, Wong MT, Stowe IB, Ramani SR, Gonzalez LC, Akashi-Takamura S, Miyake K, Zhang J, Lee WP, Muszyński A, Forsberg LS, Carlson RW, Dixit VM.
  • 雑誌名: Science. 巻: 341 ページ: 1246-9
  • DOI: doi: 10.1126/science.1240248
  • 査読あり
• [学会発表] S1P1 IS REQUIRED FOR B CELL RECEPTOR- AND TOLL-LIKE RECEPTOR-MEDIATED
  • 著者名/発表者名: Sachiko Akashi-Takamura1, Natsuko Yamakawa2, Natsuko Tanimura1, Takuma Shibata1, Takeaki Amiya3,4, Yosuke Kurashima3,4, Jun Kunisawa3 Hiroshi Kiyono4, Kazuhiro Suzuki5, Junichi Kikuta6, Masaru Ishii6, Richard L.Proia7, Yasuo Okamoto8, Yoh Takuwa8, and Kensuke Miyake1
  • 学会等名: エンドトキシン・自然免疫研究会
  • 発表場所: 滋賀県大津市
• [学会発表] S1P1 is required for B cell activation by B cell receptor or Toll-like receptor
  • 著者名/発表者名: Sachiko Akashi-Takamura, Natsuko Yamakawa, Natsuko Tanimura, Takuma Shibata, Takeaki Amiya, Yosuke Kurashima, Jun Kunisawa, Hiroshi Kiyono, Kazuhiro Suzuki, Junichi Kikuta, Masaru Ishii, Richard L.Proia, Yoh Takuwa, and Kensuke Miyake
  • 学会等名: 日本免疫学会総会
  • 発表場所: 千葉県（幕張メッセ）
• [学会発表] Cell surface TLR3 on CD8-positive dendritic cells and an essential role of the cleaved N-fragment of TLR3 ectodomain in polyI:C sensing
  • 著者名/発表者名: Murakami Yusuke, Yuji Motoi, Shibata Takuma, Fukui Ryutaro, Onji Masahiro, Kanno Atsuo, Yamakawa Natsuko, Takamura Sachiko, Miyake Kensuke
  • 学会等名: 日本免疫学会総会
  • 発表場所: 千葉県（幕張メッセ）