• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2013 年度 実績報告書

猫ひっかき病の特異抗原別ELISAによる新血清診断法の確立と病態解明への応用

研究課題

研究課題/領域番号 23590673
研究機関山口大学

研究代表者

常岡 英弘  山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40437629)

研究分担者 市原 清志  山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10144495)
キーワードBartonella henselae / ELISA
研究概要

本研究の目的は猫ひっかき病(CSD)の病原体で培養困難なBartonella henselaeに対する血清IgG抗体価を高感度に測定できるELISAの確立である。申請者らはB. henselae菌体成分のN-ラウロイル-サルコシン(以下サルコシン)処理液(上清液)が抗原として優れていることを見出した。本研究ではその抗原をさらに二次元電気泳動やウエスタンブロット法で解析し、イオン交換カラムクロマトグラフィ(DEAE)法で、特異性の高い蛋白成分を精製・解析することを試みた。
まず菌体サルコシン処理上清液を二次元電気泳動法で解析したところ、多種類の蛋白成分が検出され、Dnak,GroEL,Tuf,RL9,GroEsなど8種類の蛋白が同定されたが不要な蛋白が多いため、CSD患者に特異的に反応する抗原蛋白の同定・検出は困難であった。
そこでさらにこの抽出液をDEAE法で精製した。その結果、サルコシン抽出液はB. henselae菌体を超音波処理せず、直接にサルコシン液で連続抽出したほうが優れていることが明らかとなった。また抽出回数によりその抗原成分も異なり、一回目の抽出液のDEAE法では陰性検体と反応する蛋白成分が主に245mM以下で抽出された。一方、CSD患者血清と反応する特異性の高い蛋白成分は2~4回目抽出液の245-295mMNaCL溶液中に多く含まれていることが判明した。
今後はこの精製液を大量生産すると同時にこの抗原液の解析により、種々の特異性の高い抗原蛋白の精製が可能となり、高感度ELISAの確立が期待される。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2013

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] 中心静脈カテーテル挿入部の感染予防におけるマキシマルプレコーションの評価2013

    • 著者名/発表者名
      鶴岡恵子、常岡英弘
    • 雑誌名

      環境感染誌

      巻: 28 ページ: 348-354

    • DOI

      10.4058/jsei.28.348

    • 査読あり
  • [学会発表] 抗リン脂質抗体症候群患者における動脈硬化性病変発症機序の解明2013

    • 著者名/発表者名
      本木由香里
    • 学会等名
      第102回 日本病理学会総会
    • 発表場所
      札幌(ロイトン札幌)
    • 年月日
      20130607-20130607

URL: 

公開日: 2015-05-28  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi