ＮＳＡＩＤ潰瘍のなりやすさとは？：ＣＯＸ２ ＤＮＡメチル化へのピロリ菌感染の関与

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23590928
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 安田 宏 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (80262129)
• 研究分担者: 伊東 文生 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (90223180)
• キーワード: COX2 / ピロリ菌 / DNAメチル化 / スナネズミ

研究概要

［目的］シクロオキシゲナーゼ（以下COX）は胃粘膜防御機構や発癌への関与している。COX2は潰瘍治癒に重要である。COX2のプロモーター領域にはCGIが存在しepigeneticな発現制御を受ける可能性がある。潰瘍治癒における背景胃粘膜COX2メチル化とその意義をヒトおよびピロリ菌（以下HP）感染モデル動物であるスナネズミ（以下MG）で検討した。
［方法］①COX2のDNAメチル化は内視鏡下に生検鉗子で採取した胃前庭部粘膜組織よりDNAを抽出して、バイサルファイト・パイロシークエンス法で定量的に解析した。②HP感染モデル動物であるMGを用いて、COX2メチル化と、酢酸潰瘍時のHP感染の有無によるCOX2発現について検討した。
[成果]①HP陽性例では陰性例と比べてCOX2のDNAメチル化が有意に亢進していた。除菌例では陽性例と比べて有意に低値であった。②COX2DNAが高度にメチル化したヒト胃癌細胞であるKATOIII細胞で検討すると、脱メチル化剤5-aza-dCで同細胞はCOX2mRNA発現が回復した。③DNA walking法でMGのCOX-2ゲノムのプロモーター領域をクローニングした。MGではヒトよりも豊富なCpG islandを認めた。HP感染MG胃粘膜および、MG由来胃癌細胞MGC1/2細胞を用いてCOX-2プロモーター領域を検索するとCGIにメチル化を認めた。MGC1/2細胞でも5-aza-dC添加でCOX2mRNA発現が著明に増強した。④HP感染・非感染MGに酢酸潰瘍を作成し経時的な治癒過程と潰瘍辺縁でのCOX2mRNAの発現を検討した。HP感染MGでは潰瘍治癒は非感染MGと比べて遷延している一方で、COX2発現は低値であった。
[結論]COX2DNAプロモーター領域はHP感染によりDNAメチル化が亢進していた。HP感染における潰瘍治癒の遷延に関与している可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] An updated review of gastric cancer in the next-generation sequencing era: Insights from bench to bedside and vice versa. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hiroyuki Yamamoto, Yoshiyuki Watanabe, Tadateru Maehata, Ryo Morita, Yoshihito Yoshida, Ritsuko Oikawa, Shinya Ishigooka, Shun-Ichiro Ozawa, Yasumasa Matsuo, Kosuke Hosoya, Masaki Yamashita, Hiroaki Taniguchi, Katsuhiko Nosho, Hiromu Suzuki, Hiroshi Yasuda, Yasuhisa Shinomura, Fumio Itoh.
  • 雑誌名: World Journal of Gastroenterology 巻: 20 ページ: 3927-3937
  • DOI: 10.3748/wjg.v20.i14.3927
  • 査読あり
• [雑誌論文] COX-2 gene promoter methylation in patients infected with Helicobacter pylori. (2013)
  • 著者名/発表者名: Michikawa Y, Yasuda H, Watanabe Y, Oikawa R, Ohishi Y, Maehata T, Itoh F
  • 雑誌名: Clinical Medicine Insights: Gastroenterology 巻: 6 ページ: 13-19
  • DOI: 10.4137/CGast.S11917
  • 査読あり