研究課題
宿主肝細胞に組み込まれたHBV遺伝子は宿主遺伝子とキメラを形成し，その遺伝子発現を修飾し，細胞の増殖や維持に影響を及ぼしうることが明らかになっている．このHBVと宿主のキメラ遺伝子が肝細胞増殖に及ぼす影響をin vitroで検討し，肝発癌におけるHBV組み込みの意義と癌治療の標的分子としての基礎的検討をすることを目的とした．我々が開発したHBV-Alu PCR（Minami et al. Genomics 1995）を用いて，慢性肝炎から肝癌まで種々のstageのB型肝炎組織でHBV組み込みを同定し，HBV-宿主キメラ遺伝子をクローニングした．これらの塩基配列をGenBankで検討し，HBV組み込み近傍にある宿主遺伝子の同定を行った．AXIN1，CTNND2，ODZ2などの細胞増殖に関連した遺伝子の近傍にHBV組み込みのある症例のあることがわかった．1症例につき1-6種類のクローンが同定でき，一部で定量を行ったところ，肝細胞5,000個あたり50-70個の同じ組み込みを持つ細胞集団がクローナルに存在した．これらの組み込み遺伝子はcommon fragile site近傍に多い傾向が認められた．さらにキメラ遺伝子の同定を高頻度にする目的で，linker-primerを用いたHBV-宿主キメラ遺伝子の同定方法（Tamori et al. Clin Can Res 2005. Ferber et al. Oncogene 2003.）を試みた．我々が行っているHBV-Alu PCRによるHBV組み込みの解析より，クローン同定の効率は劣るが，我々の方法では，同定できないクローンも得られる可能性があると思われた．また，これまで行ってきた肝炎，肝癌組織での検討に加え，HBV陽性ヒト肝癌細胞株での組み込みの同定を試みた．一部の症例でHBV陽性のフラグメントが検出された．
2: おおむね順調に進展している
組み込みHBVのクローニングが進行している．
23年度，24年度に引き続き，キメラ遺伝子の同定を進める．これまでの肝炎，肝癌組織での検討に加えて，ヒト肝癌細胞株でのキメラ遺伝子の同定を進める．
遺伝子クローニングに関連した消耗品や外部への解析発注の費用が主となる．
すべて 2013 2012
すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 3件)
Liver International
巻: 33 ページ: 301-311
10.1111/liv.12033.
日本臨牀
巻: 70 ページ: 609-613
化学療法の領域
巻: 28 ページ: 146-150
Hepatology Research
巻: 42 ページ: 966-873
10.1111/j.1872-034X.2012.01016.x.
World Journal of Gastroenterology
巻: 18 ページ: 1926-1932
10.3748/wjg.v18.i16.1926.
