ｉＰＳ細胞を用いた肝不全に対する移植療法の開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23591002
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構下志津病院(臨床研究部)
• 研究代表者: 富澤 稔 独立行政法人国立病院機構下志津病院(臨床研究部), その他部局等, その他 (90334193)
• 連携研究者: 大平 美紀 千葉県がんセンター(研究所), がんゲノムセ ンター・がんゲノム研究室, 室長 (20311384)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: iPS cells / 肝細胞 / 転写因子 / 増殖因子 / 糖新生 / 尿素サイクル

研究概要

Activin Aを主体とするiPS細胞のfeeder-free培地を開発した。肝細胞に特異的な転写因子C/EBP alpha, GATA4, HEX, FoxA2をiPS細胞に導入して培地にOncostatin M, EGF, RAを導入すると肝芽細胞に分化することを見いだした。ブドウ糖、アルギニンを除きガラクトース、オルニチンを添加した培地をiPS細胞とヒト初代培養肝細胞の共培養に添加すると、3日でiPS細胞が死滅し肝細胞のみを選択することが可能な培地(hepatocyte selection medium)を開発した。

研究成果

• [雑誌論文] Frizzled-2: A potential novel target for molecular pancreatic cancer therapy (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, YoshidaT.
  • 雑誌名: Oncology Lett 巻: 7 ページ: 74-78
• [雑誌論文] Activin A is essential for feeder-free culture of human induced pluripotent stem cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, Yoshida T.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 巻: 114 ページ: 584-588
• [雑誌論文] Survival of primary human hepatocytes and death of induced pluripotent stem cells in media lacking glucose and arginine (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, Yoshida T.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 8 ページ: e71897
• [雑誌論文] Niclosamide suppresses hepatoma cell proliferation via the Wnt pathway (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Motoyoshi Y, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, Yoshida T.
  • 雑誌名: OncoTargets and Therapy 巻: 6 ページ: 1685-1693
• [雑誌論文] Single-step protocol for the differentiation of human induced pluripotent stem cells into hepatic progenitor-like cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, Yoshida T.
  • 雑誌名: Biomed Rep 巻: 1 ページ: 18-22
• [雑誌論文] Insulin-like growth factor I receptor involvement in proliferation of NOR-P1 cells in serum-free media (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M., Shinozaki F., Sugiyama T., Yamamoto S., Sueishi M., Yoshida T.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 巻: 113 ページ: 2714-2720
• [雑誌論文] Plasmid DNA introduced into cultured cells with diagnostic ultrasound (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M., Shinozaki F., Sugiyama T., Yamamoto S., Sueishi M., Yoshida T.
  • 雑誌名: Oncology Rep 巻: 27 ページ: 1360-1364
• [雑誌論文] Activin A maintains pluripotency markers and proliferative potential of human induced pluripotent stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa, M., Shinozaki, F., Sugiyama, T., Yamamoto, S., Sueishi, M., and Yoshida, T.
  • 雑誌名: Exp Therap Med 巻: 2 ページ: 405-408
• [学会発表] iPS細胞が死滅し初代培養肝細胞が生存する培地 (2014)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、本吉慶史、杉山隆夫、山本重則、末石眞
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] iPS細胞が死滅し肝細胞が生存する培地の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第12回日本再生医療学会総会
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] iPS細胞が死滅し肝細胞が生存する培地の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第49回日本肝臓学会総会
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] iPS細胞が死滅し肝細胞が生存する培地 (2013)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第17回日本肝臓学会大会
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] iPS細胞から肝細胞分化を目指した転写因子の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第98回日本消化器病学会総会
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] Activin Aを主体とするヒトiPS細胞の無フィーダー培地の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第11回日本再生医学会総会
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] ヒトiPS細胞においてSox17の発現を亢進させる増殖因子の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第16回日本肝臓学会大会
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] 肝細胞分化を目指したヒトiPS細胞に対する増殖因子の分化誘導能の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 富澤稔、篠崎文信、杉山隆夫、山本重則、末石眞、吉田孝宣
  • 学会等名: 第15回日本肝臓学会大会
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Induced pluripotent stem cells maintained pluripotency markers with Activin A in feeder free culture
  • 著者名/発表者名: Tomizawa, M., Shinozaki, F,. Sugiyama, T., Yamamoto, S., Sueishi, M., Yoshida, T.
  • 学会等名: 10th Annual Meeting of International Society of Stem Cell Research (ISSCR)
• [図書] Induced pluripotent stem cells as a source of hepatocytes. In : Pluripotent stem cells, ed. Deepa Bhartiya and Nibedita Lenka, Rijeka, Croatia (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomizawa M, Shinozaki F, Sugiyama T, Yamamoto S, Sueishi M, Yoshida T.
  • 総ページ数: 517-528
  • 出版者: InTech
• [産業財産権] 胚性幹細胞から肝芽細胞を得る方法 (2013)
  • 発明者名: 富澤稔
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特許第5257971
  • 出願年月日: 2013-05-02
  • 外国
• [産業財産権] 多能性幹細胞から肝前駆細 胞への分化誘導方法 (2012)
  • 発明者名: 富澤稔
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2012-080708
  • 出願年月日: 2012-03-30
  • 外国
• [産業財産権] Composition for culturing pluripotent stem cells and use thereof (2012)
  • 発明者名: 富澤稔
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: US patent 13/331311
  • 出願年月日: 2012-06-28
  • 外国
• [産業財産権] 人工多能性幹細胞から分化した 肝細胞を含む細胞群から、肝細胞からなる 細胞培養物を得る方法 (2012)
  • 発明者名: 富澤稔
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2012-286978
  • 出願年月日: 2012-12-28
  • 外国