ゼブラフィッシュを用いた遺伝性不整脈の病態解明と治療法の確立

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591078
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 蒲生 忠継 金沢大学, 大学病院, 医員 (10579634)
• 研究分担者: 林 研至 金沢大学, 大学病院, 助教 (00422642) ; 今野 哲雄 金沢大学, 医学系, 助教 (50377389)
• キーワード: 遺伝性不整脈 / ゼブラフィッシュ

研究概要

(1) 遺伝性不整脈症例のサンプル収集：我々はH25年度の1年間に、QT延長症候群16症例、Brugada症候群3症例、若年発症（60歳未満）の心房細動5症例、若年発症（60歳未満）および家族性徐脈1症例のgenome DNAおよび臨床データを新たに集積した。
(2) 遺伝性不整脈の遺伝子変異検索および臨床像の把握：集積した先天性不整脈患者とその家族の末梢白血球よりリンパ球ゲノムDNAを抽出し、遺伝子解析を行った。H25年度の1年間にQT延長症候群3人およびその家族2人に3種類の遺伝子変異を、心房細動3人に1種類の遺伝子変異を新たに同定した。
(3) 同定された遺伝子変異の実験モデルによる機能解析：同定された原因遺伝子変異のうち心筋イオンチャネル遺伝子について、動物培養細胞に変異チャネルを発現させ、パッチクランプ法で遺伝子変異が臨床病型を引き起こすメカニズムを解明した。H25年度の間にQT延長症候群の3種類の遺伝子変異、心房細動の1種類の遺伝子変異の機能解析を新たに行った。
(4) ゼブラフィッシュを用いた機能解析：本年度、受精48時間後のゼブラフィッシュ初期胚の心電図を初めて測定することができた。LQTS症例で認められる遺伝子変異の50%を占めるKCNH2遺伝子（IKｒ）変異の病的意義について、ゼブラフィッシュ初期胚にKCNH2のアンチセンスモルフォリノを注入したところ、48時間後に房室ブロックあるいは心停止が認められた。さらに、当科で同定したKCNH2変異の病的意義について、モルフォリノと変異mRNAを同時に注入し、正常を示すゼブラフィッシュの割合の評価を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Impact of fluoroscopically-visible fluttering flap on clinical diagnosis of acute aortic dissection. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka Y, Sakata K, Kawashiri MA, Nakanishi C, Konno T, Yoshimuta T, Hayashi K, Tomita S, Watanabe G, Yamagishi M.
  • 雑誌名: J Am Coll Cardiol. 巻: ６３ ページ: e31
  • DOI: 10.1016/j.jacc.2013.10.094.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vascular endothelial growth factor-bound stents: application of in situ capture technology of circulating endothelial progenitor cells in porcine coronary model. of (2014)
  • 著者名/発表者名: Takabatake S, Hayashi K, Nakanishi C, Hao H, Sakata K, Kawashiri MA, Matsuda T, Yamagishi M.
  • 雑誌名: J Interv Cardiol 巻: １ ページ: 63-72
  • DOI: 10.1111/joic.12087
  • 査読あり
• [雑誌論文] Current perspectives in genetic cardiovascular disorders: from basic to clinical aspects (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawashiri MA, Hayashi K, Konno T, Fujino N, Ino H, Yamagishi M.
  • 雑誌名: Heart Vessels 巻: 29 ページ: 129-41
  • DOI: 10.1007/s00380-013-0391-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sarcomere gene mutations are associated with increased cardiovascular events in left ventricular hypertrophy: results from multicenter registration in Japan. (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujita T, Fujino N, Anan R, Tei C, Kubo T, Doi Y, Kinugawa S, Tsutsui H, Kobayashi S, Yano M, Asakura M, Kitakaze M, Komuro I, Konno T, Hayashi K, Kawashiri MA, Ino H, Yamagishi M.
  • 雑誌名: JACC Heart Fail. 巻: ６ ページ: 459-66
  • DOI: 10.1016/j.jchf.2013.08.007.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Non-synonymous single-nucleotide variations of the human oxytocin receptor gene and autism spectrum disorders: a case-control study in a Japanese population and functional analysis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ma WJ, Hashii M, Munesue T, Hayashi K, Yagi K, Yamagishi M, Higashida H, Yokoyama S.
  • 雑誌名: Mol Autism 巻: 4 ページ: 22
  • DOI: 10.1186/2040-2392-4-22
  • 査読あり
• [学会発表] Mechanisms of fever-induced QT prolongation in a patient with a KCNH2 G584S mutation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kenshi Hayashi, Tadashi Nakajima, Shoichi Tange, Hidekazu, Ino, Noboru Fujino, Tetsuo Konno, Toyonobu Tsuda, Yoshihiro Tanaka, Masa-aki Kawashiri, Yoshiaki Kaneko, Masahiko Kurabayashi, Masakazu Yamagishi
  • 学会等名: The 78th Annual Scientific Meeting of the Japanese Circulation Society
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（東京）
  • 年月日: 20140321-20140323
• [学会発表] Impact of New LQTS Diagnostic Criteria on Detection of Long QT Syndrome with Carrying Gene Mutations. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kenshi Hayashi, Noboru Fujino, Tetsuo Konno, Toyonobu Tsuda, Yoko Imi-hashida, Takekatsu Saito, Kunio Ohta, Hidekazu Ino, Masa-aki Kawashiri, and Masakazu Yamagishi.
  • 学会等名: American Heart Association SCIENTIFIC SESSIONS
  • 発表場所: Dallas Convention Center （Dallas, TX. USA)
  • 年月日: 20131116-20131120
• [図書] 最新医学 (2013)
  • 著者名/発表者名: 林 研至
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: 最新医学社