活性化マクロファージを標的とした不安定プラークの分子イメージングと治療法の開発

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591105
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 宮田 昌明 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (00347113)
• 研究分担者: 松山 隆美 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (30145479)
• キーワード: 葉酸レセプターβ / 活性化マクロファージ / 動脈硬化 / 分子イメージング

研究概要

本研究申請時の3つの研究項目ごとに最終年度の研究実績の概要を報告する。
①抗FRβ抗体を用いた動脈硬化の新規治療法の前臨床研究：12週齢のアポ蛋白E欠損マウス（apoE-KO）3匹に、3％ thioglycollate を腹膜投与し、4日後に滲出性腹膜マクロファージを回収し、抗FRβ抗体、抗F4/80抗体で染色し、フローサイトメトリーを用いてマクロファージにおけるFRβ発現細胞の割合を検討した結果、滲出性腹膜マクロファージにおけるFRβ発現細胞の割合は、95.4±1.3%であった。次に、滲出性腹膜マクロファージを抗FRβモノクローナル抗体に緑膿菌毒素を結合させたリコンビナントイムノトキシン(FRβイムノトキシン)とともに72時間及び96時間、37℃、5％CO2下で培養し、細胞を0.1％Triton X-100で処理した後、propidium iodineで染色し、アポトーシス細胞の割合を、フローサイトメトリーを用いて計測した。FRβイムノトキシン1000 ng/mlにおけるアポトーシス細胞の割合は、培養72時間後で67.4±6.3%、96時間後で77.4±3.3%であり、活性化マクロファージに対してFRβイムノトキシンはアポトーシスを誘導することが明らかにされた。
②可溶性FRβ測定系の確立と動脈硬化性疾患患者での測定：ヒトFRβモノクローナル抗体を用いたサンドイッチELISA測定法にて血清のFRβ濃度測定し、正常コントロールと比較し大動脈瘤患者ではFRβ濃度の高い症例を認めた。
③抗FRβモノクローナル抗体を用いた超音波分子イメージングの開発：抗FRβモノクローナル抗体をAlexa Fluor 488で標識し、MaestroTM in-vivo imaging systemを用い、25週のオスapoE KOマウス動脈硬化巣の蛍光イメージングの定量解析を行った。抗FRβ-Alexa488抗体投与1時間後、上行大動脈基部動脈硬化巣のシグナルは0.04±0.007であり、下行大動脈の非プラーク部分の0.003±0.002と比較し、有意に高値であった。

研究成果

• [雑誌論文] Atrial fibrillation-induced endothelial dysfunction improves after restoration of sinus rhythm. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshino S, Yoshikawa A, Hamasaki S, Ishida S, Oketani N, Saihara K, Okui H, Kuwahata S, Fujita S, Ichiki H, Ueya N, Iriki Y, Maenosono R, Miyata M, Tei C
  • 雑誌名: Int J Cardiol. 巻: 168 ページ: 1280-1285
  • DOI: 10.1016/j.ijcard.2012.12.006.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The incidence of asymptomatic cerebral microthromboembolism after atrial fibrillation ablation: comparison of warfarin and dabigatran. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ichiki H, Oketani N, Ishida S, Iriki Y, Okui H, Maenosono R, Namino F, Ninomiya Y, Miyata M, Hamasaki S, Tei C.
  • 雑誌名: Pacing Clin Electrophysiol 巻: 36 ページ: 1328-1335
  • DOI: 10.1111/pace.12195
  • 査読あり
• [雑誌論文] Influence of gefitinib and erlotinib on apoptosis and c-MYC expression in H23 lung cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Suenaga M, Yamamoto M, Tabata S, Itakura S, Miyata M, Hamasaki S, Furukawa T
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 33 ページ: 1547-1554
• [学会発表] Gender specific effects of Valsartan on fibrinolysis in hypertensive patients with metabolic syndrome. (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyata M, Hamasaki S, Tei C, Kagoshima Collaborate Trial in Metabolic Syndrome (KACT-Mets) Investigators.
  • 学会等名: European Society of CardiologyCongress 2013
  • 発表場所: Amsterdam
  • 年月日: 20130831-20130904
• [学会発表] シンポジウム７ アポ蛋白機能 「血管傷害と動脈硬化におけるアポ蛋白J（Clusterin）の作用」 (2013)
  • 著者名/発表者名: 宮田昌明
  • 学会等名: 第45回日本動脈硬化学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130718-20130719
  • 招待講演
• [備考] 活性化マクロファージを標的とした動脈硬化の新規診断・治療法の開発
  • URL: http://www.rdc.kagoshima-u.ac.jp/rdc/search/upload/miyata-med.pdf
• [備考] 鹿児島大学研究者総覧 宮田昌明
  • URL: http://kuris.cc.kagoshima-u.ac.jp/407594.html
• [備考] 鹿児島大学大学院 医歯学総合研究科 心臓血管・高血圧内科学
  • URL: http://www.kufm.kagoshima-u.ac.jp/~intmed1/
• [産業財産権] Therapeutic agent for arteriosclerosis or arteriosclerotic diseae, and diagnositic agent for arteriosclerosis or arteriosclerosic disease (2013)
  • 発明者名: 宮田昌明、松山隆美、永井 拓
  • 権利者名: 宮田昌明、松山隆美、永井 拓
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: US-2013-0230899-A1
  • 出願年月日: 2013-05-09
  • 外国