癌幹細胞をターゲットにした肺癌分子標的治療の開発

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591136
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 瀧口 裕一 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30272321)
• キーワード: メトホルミン / ゲフィチニブ / 癌幹細胞 / 肺癌 / 細胞株 / アポトーシス / 細胞周期

研究概要

平成24年度までの研究により、メトホルミンがヒト腺癌の幹細胞に対して効果を有することを示してきたが、本年度はその詳細な機序を明らかにするために実験を行った。とりわけ薬剤耐性と癌幹細胞性および上皮間葉移行（EMT）との関係を明らかにした。
PC9細胞以外に、HCC0827、HCC4006細胞（以上、EGFR変異陽性）、A549細胞（EGFR変異陰性）の肺腺癌細胞を用いた。これらの細胞に対してメトホルミン以外に、transforming growth factor (TGF) β、mTOR阻害薬、dimethyl sulfoxide (DMSO)、histon deacethyl carboxylase (HDAC) 阻害薬、heat shock protein (HSP) 阻害薬などのEMTを修飾するとされる薬剤を使用し、形態、E-cadherin発現低下、N-cadherin、vimentin、fibronectinの発現亢進などの解析により、EMT形質を獲得したことを確認した。EMT形質を獲得した細胞ではゲフィチニブ、シスプラチンなどに対する薬剤感受性が低下し、EMTを抑制した細胞では薬剤耐性獲得が抑制される傾向が認められた。
一方、in vivoにおける解析には、抗癌薬で縮小した腫瘍における生存癌細胞の同定が必要であり、この実験を可能とするために、PC9細胞にルシフェラーゼ遺伝子を導入し、蛍光顕微鏡で観察できる実験系を作成した。
これらの成果は3つの原著論文（英文）および関連論文として公表した。

研究成果

• [雑誌論文] CD90 Is a Diagnostic Marker to Differentiate Between Malignant Pleural Mesothelioma and Lung Carcinoma With Immunohistochemistry. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kawamura, K., Hiroshima, K., Suzuki, T., Chai, K., Yamaguchi, N., Shingyoji, M., Yusa, T., Tada, Y., Takiguchi, Y., Tatsumi, K., Shimada, H. and Tagawa, M.
  • 雑誌名: Am. J. Clin. Pathol. 巻: 140 ページ: 544-549
  • DOI: 10.1309/ajcpm2z4ngiipbge
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of metformin on residual cells after chemotherapy in a human lung adenocarcinoma cell line. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kitazono, S., Takiguchi, Y., Ashinuma, H., Saito-Kitazono, M., Kitamura, A., Chiba, T., Sakaida, E., Sekine, I., Tada, Y., Kurosu, K., Sakao, S., Tanabe, N., Iwama, A., Yokosuka, O. and Tatsumi, K.
  • 雑誌名: Int. J. Oncol. 巻: 43 ページ: 1846-1854
  • DOI: 10.3892/ijo.2013.2120
  • 査読あり
• [雑誌論文] A microarray-based gene expression analysis to identify diagnostic biomarkers for unknown primary cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurahashi, I., Fujita, Y., Arao, T., Kurata, T., Koh, Y., Sakai, K., Matsumoto, K., Tanioka, M., Takeda, K., Takiguchi, Y., Yamamoto, N., Tsuya, A., Matsubara, N., Mukai, H., Minami, H., Chayahara, N., Yamanaka, Y., Miwa, K., Takahashi, S., Takahashi, S., Nakagawa, K. and Nishio, K.
  • 雑誌名: PloS one 巻: 8 ページ: e63249
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0063249
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interferon-β Produces Synergistic Combinatory Anti-Tumor Effects with Cisplatin or Pemetrexed on Mesothelioma Cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Li, Q., Kawamura, K., Yang, S., Okamoto, S., Kobayashi, H., Tada, Y., Sekine, I., Takiguchi, Y., Shingyouji, M., Tatsumi, K., Shimada, H., Hiroshima, K. and Tagawa, M.
  • 雑誌名: PloS one 巻: 8 ページ: e72709
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0072709
  • 査読あり
• [雑誌論文] Metformin, a Diabetes Drug, Eliminates Tumor-Initiating Hepatocellular Carcinoma Cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Saito, T., Chiba, T., Yuki, K., Zen, Y., Oshima, M., Koide, S., Motoyama, T., Ogasawara, S., Suzuki, E., Ooka, Y., Tawada, A., Tada, M., Kanai, F., Takiguchi, Y., Iwama, A. and Yokosuka, O.
  • 雑誌名: PloS one 巻: 8 ページ: e70010
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0070010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipocalin-2 is associated with radioresistance in oral cancer and lung cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Shiiba, M., Saito, K., Fushimi, K., Ishigami, T., Shinozuka, K., Nakashima, D., Kouzu, Y., Koike, H., Kasamatsu, A., Sakamoto, Y., Ogawara, K., Uzawa, K., Takiguchi, Y. and Tanzawa, H.
  • 雑誌名: Int. J. Oncol. 巻: 42 ページ: 1197-1204
  • DOI: 10.3892/ijo.2013.1815
  • 査読あり
• [学会発表] Targeting HDACs to overcome cisplatin resistance in malignant plural mesothelioma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Baird, Anne-Marie Jennings, Cormac J McDonagh Lauren Flynn Louise O'Donnell, Eimear Barr, Martin Santoni-rugiu, Eric Hanse, Finn K Kurz, Thomas Takiguchi, Yuichi Thomas, Warren Zimling, Zarah G O'Byrne, Kenneth Gray, Steven
  • 学会等名: 15th World Conference on Lung Cancer
  • 発表場所: Sydney, Australia
  • 年月日: 20131027-20131030
• [学会発表] Anti-tumor effects of Ad-p53 on INK4A/ARF-defective mesothelioma are influenced positively by small G protein inhibitors but negatively by heat shock protein 90 inhibitors. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tagawa, Masatoshi Chai, Kuan Jiang, Yuanyan Kawamura, Kiyoko Yang, Shan Ogino, Atsushi Yamaguchi, Naoto Kato, Kazunori Tada, Yuji Takiguchi, Yuichi Tatsumi, Koichiro Shimada, Hideki Hiroshima, Kenzo Kubo, Shuji
  • 学会等名: American Society of Gene & Cell Therapy. 16th Annual Meeting. 2013
  • 発表場所: Salt Lake, Utah, USA
  • 年月日: 20130515-20130518