ハプロ一致移植後再発ＨＬＡ－ＬＯＨ白血病細胞におけるＮＫ細胞傷害メカニズムの解明

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591536
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 高橋 義行 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40432273)
• 研究分担者: 小島 勢二 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20313992)
• キーワード: 白血病 / NK細胞 / GVL効果 / KIR

研究概要

One Lambda社の抗HLA抗体および白血病に発現する表面マーカーに対する抗体による４カラーフローサイトメトリー法を用い、ハプロ移植後の患者末梢血液細胞において患者とドナー間で不一致HLA発現のモニタリングを経時的に行い、キメリズム解析、微小残存腫瘍、微小再発の同定に有用であることを確認できた。
ハプロ一致移植後にHLA-LOHを生じて再発した白血病においてドナーNK細胞の傷害活性の初診時白血病と比較した変化をCr release assay法により検討し、５例中３例でHLA-LOHを生じた白血病細胞がNK細胞に対する感受性が上昇していることが証明できた。
LOHを起こした患者由来白血病細胞に対するドナー由来NK細胞のキラー活性の上昇はKiller Immunoglobulin-like Receptor(KIR)に代表される抑制受容体と、同じくNK細胞上に発現する活性化受容体へ入るシグナルのバランスにより決定されると考えられ、LOHを起こす前と後で白血病細胞側にそれぞれのNK細胞受容体のリガンド（HLA, MICA/B, ULBP1-3）の発現量を同定し、変化を検討した。少なくとも患者１名でULBP2の発現がHLA-LOH後に上昇していた。
ドナー由来ＣＤ158aおよびＣＤ158b陽性NK細胞群のうち患者血液細胞に障害活性を持つアロ反応性NK細胞を同定するため、CD3,CD56,抑制性KIR受容体（ＣＤ158aおよびＣＤ158bなど）との多重染色により、患者HLAで抑制シグナルの入らないドナー由来アロ反応性NK分画を同定する方法を確立し、１０人のKIRリガンド不一致臍帯血移植後にアロ反応性NK細胞が有意に上昇することを示した（p=0.001）。また、アロNK反応性NK細胞の上昇とともに、末梢血NK細胞の患者由来PHA-Blastの障害活性が上昇することも示した。

研究成果

• [雑誌論文] PBSCT is associated with poorer survival and increased chronic GvHD than BMT in Japanese paediatric patients with acute leukaemia and an HLA-matched sibling donor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Shinzato A, Tabuchi K, Atsuta Y, Inoue M, Inagaki J, Yabe H, Koh K, Kato K, Ohta H, Kigasawa H, Kitoh T, Ogawa A, Takahashi Y, Sasahara Y, Kato S, and Adachi S.
  • 雑誌名: Pediatr Blood Cancer. 巻: 60(9) ページ: 1513-1519
  • DOI: 10.1002/pbc.24524
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exome sequencing identifies secondary mutations of SETBP1 and JAK3 in juvenile myelomonocytic leukemia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakaguchi H, Okuno Y, Muramatsu H, Yoshida K, Shiraishi Y, Takahashi M, Kon A, Sanada M, Chiba K, Tanaka H, Makishima H, Wang X, Xu Y, Doisaki S, Hama A, Nakanishi K, Takahashi Y, Yoshida N, Maciejewski JP, Miyano S, Ogawa S, Kojima S.
  • 雑誌名: Nat Genet. 巻: 45(8) ページ: 937-941
  • DOI: 10.1038/ng.2698
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rabbit antithymocyte globulin and cyclosporine as first-line therapy for children with acquired aplastic anemia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Muramatsu H, Sakata N, Hyakuna N, Hamamoto K, Kobayashi R, Ito E, Yagasaki H, Ohara A, Kikuchi A, Morimoto A, Yabe H, Kudo K, Watanabe K, Ohga S, Kojima S, Japan Childhood Aplastic Anemia Study G.
  • 雑誌名: Blood 巻: 121(5) ページ: 862-863
  • DOI: 10.1182/blood-2012-11-465633
  • 査読あり
• [学会発表] Sequential autologous SCT/KIR mismatched cord blood transplantation for high-risk or recurrent neuroblastoma.
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y.
  • 学会等名: The 4th Mini-symposium of Samsung Children's Cancer Center.
  • 発表場所: Seoul, Korea
• [学会発表] Unmanipulated HLA Haploidentical Bone Marrow Transplantation Combined With PBSC With The Options Of Donor Virus Specific CTLs and Mesenchymal Stem Cells Infusion.
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Kawashima N, Narita A, Sakaguchi H, Muramatsu H, Hama A, Kojima S.
  • 学会等名: The 55th ASH Annual Meeting and Exposition.
  • 発表場所: New Orleans, USA
• [学会発表] HLA haploidentical SCT with the options of donor's virus specific CTLs and mesenchymal stem cells.
  • 著者名/発表者名: 高橋 義行、川島 希、成田 敦、坂口 大俊、土居崎 小夜子、村松 秀城、中西 康詞、濱 麻人、小島 勢二.
  • 学会等名: 第75回日本血液学会学術集会.
  • 発表場所: ロイトン札幌、札幌
• [学会発表] 小児ハイリスク神経芽腫に対する同種臍帯血移植の解析. Allogeneic cord blood transplantation for children with high risk neuroblastoma.
  • 著者名/発表者名: 高橋 義行、松本 公一、藤崎 弘之、岩崎 史記、橋井 佳子、中村 和弘、杉田 完爾、矢部 普正、加藤 剛二、高梨 美乃子、熱田 由子、井上 雅美.
  • 学会等名: 第55回日本小児血液・がん学会学術集会.
  • 発表場所: ヒルトン福岡シーホーク、福岡