ＥＶＩ１癌遺伝子活性化によるゲノム不安定化の分子機構

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591548
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 久米 晃啓 自治医科大学, 医学部, 准教授 (10264293)
• キーワード: 遺伝子 / ゲノム / エピジェネティクス / ヒストン修飾

研究概要

近年注目されている発癌過程におけるエピジェネティックな変化の中でも、H3ヒストン第9位リジン（H3K9）のメチル化は動原体付着部近傍のヘテロクロマチン形成に必須であり、染色体分配の足場形成、ひいてはゲノム安定化に必須であるため興味深い。そこでH3K9を特異的にメチル化してモノメチルH3K9（H3K9me）・ジメチルH3K9（H3K9me2）を生成する酵素G9aと、H3K9me2にメチル基を付加してトリメチルH3K9（H3K9me3）を生成する酵素SUV39H1の作用意義について検討した。G9aを単独強制発現させてもHEK293細胞のH3K9のメチル化状態に変化はみられなかったが、H3K9me3のシグナルがSUV39H1の単独発現時に1.5-2倍、G9aとSUV39H1の共発現時には1.8-2.6倍と増加していた。そこでH3K9me3レベル上昇によりヘテロクロマチン蛋白HP-1αのドッキングサイトが形成されたと考え、HP-1αの変化を調べたところ、SUV39H1の強制発現により、細胞質～核可溶画分のHP-1αが消失し、ほぼクロマチン分画にしか認められなくなった。細胞内HP-1αの総量は変化していなかったので、この現象は主にHP-1αの局在変化を反映している。従来、SUV39H1の活性は精製ヒストンや合成ペプチドを基質としたin vitro実験では示されていたが、生細胞内の現象として生化学的に確かめられたのは初めてである。これに伴うHP-1αの局在変化についても、これまで詳細に示されたことはなく、新たな知見と言える。続いて、癌遺伝子EVI1の強制発現によるこれら事象への影響を検討したが、メチル化酵素の発現変動やHP-1αの局在変化は検出されなかった。以上の検討は主にイムノブロットによるものであり、免疫蛍光顕微鏡観察などで、さらに解析をすすめている。

研究成果

• [雑誌論文] Novel anti-tumor mechanism of galanin receptor type 2 in head and neck squamous cell carcinoma cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Uehara T, Kanazawa T, Mizukami H, Uchibori R, Tsukahara T, Urabe M, Kume A, Misawa K, Carey T, Suzuki M, Ichimura K, Ozawa K
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 105 ページ: 72-80
  • DOI: 10.1111/cas.12315
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of lymph node and lung metastases of endometrial cancer by muscle-mediated expression of soluble VEGF receptor-3 (2013)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Mizukami H, Saga Y, Takei Y, Urabe M, Kume A, Machida S, Fujiwara H, Suzuki M, Ozawa K
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 104 ページ: 1107-1111
  • DOI: doi: 10.1111/cas.12184
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD19 target-engineered T-cells accumulate at tumor lesions in human B-cell lymphoma xenograft mouse models (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukahara T, Ohmine K, Yamamoto C, Uchibori R, Ido H, Teruya T, Urabe M, Mizukami H, Kume A, Nakamura M, Mineno J, Takesako K, Riviere I, Sadelain M, Brentjens R, Ozawa K
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 438 ページ: 84-89
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.07.030
  • 査読あり
• [雑誌論文] An R132H mutation in isocitrate dehydrogenase 1 enhances p21 expression and inhibits phosphorylation of retinoblastoma protein in glioma cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyata S, Urabe M, Gomi A, Nagai M, Yamaguchi T, Tsukahara T, Mizukami A, Kume A, Ozawa K, Watanabe E
  • 雑誌名: Neurologia medico-chirurgica (Tokyo) 巻: 53 ページ: 645-654
  • 査読あり
• [学会発表] Accurate measurement of Nab status against AAV vector capsids and an approach toward managing its inhibitory effect (2013)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H, Mimuro J, Hishikawa S, Ikemoto T, Uchibori R, Tsukahara T, Urabe M, Kume A, Sakata A, Ohmori T, Madoiwa S, Sakata Y, Ozawa K.
  • 学会等名: European Society of Gene and Cell Therapy and French Society for Cell and Gene Therapy Collaborative Congress 2013
  • 発表場所: Madrid, Spain
  • 年月日: 2013-10-25
• [学会発表] Tumor targeting using CD19-specific CAR (chimeric antigen receptor) for B-cell lymphoma (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukahara T, Ohmine K, Uchibori R, Ido H, Urabe M, Mizukami H, Kume A, Nakamura M, Mineno J, Takesako K, Riviere I, Sadelain M, Brentjens R, Ozawa K.
  • 学会等名: American Society of Gene and Cell Therapy 16th Annual Meeting
  • 発表場所: Salt Lake City, UT, USA
  • 年月日: 2013-05-18
• [学会発表] Precise evaluation of Nab status against adeno-associated viral vectors and an approach toward managing its inhibitory effect (2013)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H, Mimuro J, Hishikawa S, Ikemoto T, Uchibori R, Tsukahara T, Urabe M, Kume A, Sakata A, Ohmori T, Madoiwa S, Sakata Y, Ozawa K.
  • 学会等名: American Society of Gene and Cell Therapy 16th Annual Meeting
  • 発表場所: Salt Lake City, UT, USA
  • 年月日: 2013-05-16