食物アレルギー経口免疫療法の作用機序に関する免疫学的解析

2011 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 23591555
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 柘植 郁哉 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (00231431)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2014-03-31
• キーワード: 経口免疫療法 / 鶏卵アレルギー / アレルゲン特異的T細胞 / 低アレルゲン化食品 / 好塩基球活性化試験

研究概要

より安全な経口免疫療法の確立を目指して、オボムコイドを減量し、かつ、加熱して低アレルゲン化した鶏卵を用いた免疫療法を試みた。同時に、作用機序を明らかにして経口免疫療法の改良に役立てるべく、各種免疫学的解析を行った。 　4-19歳の鶏卵アレルギー児80例（男43、女37）を対象に経口免疫量免疫療法を行った。低アレルゲン化鶏卵全量摂取が可能であった群の検討では、4週間のプラセボ対照試験で、プラセボ群の加熱卵白負荷試験陰性化率（以下陰性化率）が3.3%(1/30)、実薬群が20.8%（10/48）で、実薬群で有意に陰性化率が高かった。その後は、2ヵ月で34.1%、3ヵ月で76.4%が陰性化し、6ヵ月までに全例が陰性化した。全量摂取が不可能なため減量して施行した群は、10ヵ月で50%の陰性化率であった。実薬群７例、プラセボ2例に軽度の有害事象が認められたが、治療は要しなかった。　免疫学的な検索では、特異的IgEには変化が見られなかったが、卵白およびオボムコイド特異的IgG・IgG4は治療2ヵ月の時点で増加が認められた。卵白及びオボムコイドによる好塩基球活性化は、治療3ヵ月の時点でCD203c最高陽性％の低下が認められた。また卵白特異的T細胞の解析では、治療に伴い、卵白刺激により誘導される細胞質内IFN-γ陽性CD4+T細胞、およびIL-17陽性CD4+T細胞の低下が認められた。培養上清中のサイトカインの検討からはIFN-γの有意な低下、TGF-βの増加の傾向が認められた。サイトカイン関連遺伝子発現の検討では、治療に伴いSuppressor of cytokine signalling （SOCS）-１、SOCS-5発現が増加していた。　低アレルゲン化鶏卵を用いた免疫療法は安全かつ有効であるが、低アレルゲン化鶏卵にすら反応する重症例の対処法など、さらに検討すべき課題も残された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究は、経口免疫療法の作用機序や耐性獲得の機構を明らかにすることにより、安全で有効なアレルゲン特異的免疫療法を開発することを目的として、アレルゲン特異的T細胞応答並びに好塩基球の活性化を以下のように解析するものである。　これまでに、(1)緩徐増量法(2) 低アレルゲン化食品による免疫療法を行い、作用機序を検討する目的で、１アレルゲン特異的T細胞応答の検討として(1)CFSE dilution assay、(2)培養上清中のサイトカイン(3)サイトカインやサイトカインシグナルに関与するmRNAの発現２好塩基球活性化の検討ではCD203ｃの発現を指標とした塩基球活性化試験を行い、上述したような成果を上げてきた。活性化抗原CD154を用いたアレルゲン特異的T細胞応答の検討は、これまでにアッセイ法を確立して、食物アレルギー患者を対象に有用性が確認できたので、今後、経口免疫療法の対象者で解析して、治療による変化を検討していく。

今後の研究の推進方策

今後も、アレルゲン特異的経口免疫療法の臨床試験参加者を対象に、同様の免疫学的解析を行う。　経口免疫療法としては、これまでに行った免疫療法に、加水分解乳、酵素処理魚肉エキスによる免疫療法を加え、以下の治療法を行う。(1)緩徐増量法;卵白、牛乳、小麦アレルギー患者を対象に、少量より開始し2-4週間ごとに緩徐に増量する。(2)アレルゲン化食品による免疫療法；オボムコイド減量加熱全卵、加水分解乳、酵素処理魚肉エキスなどの、アレルギー患者でも摂取可能な低アレルゲン化食品を継続的に摂取する。

次年度の研究費の使用計画

経口免疫療法としては、(1)緩徐増量法（卵白、牛乳、小麦アレルギー患者を対象に、少量より開始し2-4週間ごとに緩徐に増量する）(2)アレルゲン化食品による免疫療法（オボムコイド減量加熱全卵、加水分解乳、酵素処理魚肉エキスなどの、アレルギー患者でも摂取可能な低アレルゲン化食品を継続的に摂取する）を行う。　同時に、これらの臨床試験に参加する食物アレルギー患者を対象に、１アレルゲン特異的T細胞応答の検討として(1)CFSE dilution assay、(2)活性化抗原CD154を用いたアレルゲン特異的T細胞応答の検討、(3)培養上清中のサイトカイン、(4)サイトカインやサイトカインシグナルに関与するmRNAの発現、２好塩基球活性化の検討ではCD203ｃの発現を指標とした塩基球活性化試験を行う。特に１アレルゲン特異的T細胞応答の検討では、新たにアッセイ系を確立した(2)活性化抗原CD154を用いたアレルゲン特異的T細胞応答の検討を中心に解析する。

研究成果

• [雑誌論文] A patient with salmon roe allergy showing taxonomy-unrelated cross-reactivity with sea urchin roe. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Tanaka K, Inuo C, Tsuge I, Urisu A.
  • 雑誌名: Ann Allergy Asthma Immunol. 巻: 107 ページ: 283-284
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of FOXP3-negative regulatory T-like (CD4(+)CD25(+)CD127(low)) cells in patients with immune dysregulation, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked syndrome. (2011)
  • 著者名/発表者名: Otsubo K, Kanegane H, Kamachi Y, Kobayashi I, Tsuge I, Imaizumi M, Sasahara Y, Hayakawa A, Nozu K, Iijima K, Ito S, Horikawa R, Nagai Y, Takatsu K, Mori H, Ochs HD, Miyawaki T.
  • 雑誌名: Clin Immunol. 巻: １４１ ページ: 111-120
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-10 signaling in hyper-IgE syndrome results in impaired generation of tolerogenic dendritic cells and induced regulatory T cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito M, Nagasawa M, Takada H, Hara T, Tsuchiya S, Agematsu K, Yamada M, Kawamura N, Ariga T, Tsuge I, Nonoyama S, Karasuyama H, Minegishi Y.
  • 雑誌名: J Exp Med. 巻: 208 ページ: 235-249
  • 査読あり
• [雑誌論文] 食物アレルギーに対する経口免疫療法の現状と将来 安全性と有効性の追求、当科での取り組みを含めて (2011)
  • 著者名/発表者名: 柘植郁哉、宇理須厚雄
  • 雑誌名: アレルギー・免疫 巻: 18 ページ: 1118-1125
• [雑誌論文] 経口免疫療法の今後の方向性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柘植郁哉、宇理須厚雄
  • 雑誌名: 臨床免疫・アレルギー科 巻: 55 ページ: 651-656
• [学会発表] 食物アレルギーの経口免疫療法 ;オボムコイド減量加熱全卵を用いた経口免疫療法の免疫学的検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柘植郁哉, 田中健一, 野村孝泰, 犬尾千聡, 湯川牧子, 高松伸枝, 小倉和郎, 成瀬徳彦, 平田典子, 鈴木聖子, 安藤仁志, 近藤康人, 宇理須厚雄, 山田一恵, 小林幸子, 木村守
  • 学会等名: 第６１回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011．11.12