血中小麦アレルゲン定量法の開発とその臨床応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591621
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 松尾 裕彰 広島大学, 医歯薬保健学研究科, 教授 (60346385)
• 研究分担者: 三原 祥嗣 広島大学, 医歯薬保健学研究科, 准教授 (90325168)
• キーワード: 食物アレルギー / アレルゲン

研究概要

小麦依存性運動誘発アナフィラキシー（WDEIA）は、小麦を摂取後に運動することによりアナフィラキシーなどの重篤な症状が誘発される食物アレルギー疾患である。我々はこれまでの研究で、消化管からのアレルゲンの吸収増加が、WDEIAにおける症状誘発要因の一つであることを明らかにしている。今年度は、ラット好塩基球細胞（RBL-2H3）の脱顆粒を指標にした血中小麦アレルゲンの生物学的活性定量法の構築を目的に、鶏卵アレルゲンであるオボアルブミン(OVA)特異IgEを保有するラットの感作条件を決定した。OVA感作したBrown Norwayラットの血清を用いてRBL-2H3細胞をIgE感作し、OVA刺激による脱顆粒反応を評価した結果、10%血清で感作し10μg/mLのOVA刺激で脱顆粒反応が起きることを確認した。血中の抗原濃度は数ng/mLと推測されるため、さらに感度を上げる必要かあることが分かった。
加水分解小麦含有石鹸の使用により発症したWDEIAの原因抗原は、通常のWDEIAの主要原因抗原であるω5-グリアジンとは異なることが示唆された。そこで、加水分解小麦によるWDEIAの原因抗原解析を行い、主要抗原がγ-グリアジンであることを明らかにすると共に、そのIgE結合エピトープ（QPQQPFP）を同定した。加水分解小麦中ではIgE結合エピトープのグルタミン（Q）はグルタミン酸（E）へ加水分解されていることから、エピトープ配列のQをEに置換したペプチド（EPEEPFP）を合成しIgEの結合性を調べた。その結果、Eへ置換したペプチドに対するIgEの強い結合が認められたことから、感作エピトープはEPEEPFPであると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Aspirin augments IgE-mediated histamine release from human peripheral basophils via Syk kinase activation (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsuo H, Yokooji T, Morita H, Ooi M, Urata K, Ishii K, Takahagi S, Yanase Y, Hiragun T, Mihara S, Hide M
  • 雑誌名: Allergol Int 巻: 62(4) ページ: 503-11
  • DOI: 10.2332/allergolint.13-OA-0536
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum gliadin monitoring extracts patients with false negative results in challenge tests for the diagnosis of wheat-dependent exercise-induced anaphylaxis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kohno K, Matsuo H, Takahashi H, Niihara H, Chinuki Y, Kaneko S, Honjoh T, Horikawa T, Mihara S, Morita E
  • 雑誌名: Allergol Int. 巻: 62 ページ: 229-238
  • DOI: 10.2332/allergolint.12-OA-0495
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intestinal absorption of lysozyme, an egg-white allergen, in rats: Kinetics and effect of NSAIDs. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yokooji T, Hamura K, Matsuo H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 438 ページ: 61-65
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.07.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] The sensitivity and clinical course of patients with wheat-dependent exerc- ise-induced anaphylaxis sensitized to hydrolyzed wheat protein in facial soap - secondary publication. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hiragun M, Ishii K, Hiragun T, Shindo H, Mihara S, Matsuo H, Hide M.
  • 雑誌名: Allergol Int. 巻: 62 ページ: 351-358
  • DOI: 10.2332/allergolint.13-OA-0553
  • 査読あり
• [雑誌論文] ミソプロストールとクロモグリク酸ナトリウムにより誘発が抑制されたエビによる食物依存性運動誘発アナフィラキシーの1例. (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田流音，船坂陽子，藤本和久，長田真一，菊地伊豆実，原田晋，松尾裕彰，川名誠司
  • 雑誌名: 皮膚科の臨床 巻: 55 ページ: 883-887
• [雑誌論文] 【すべては経皮感作から始まる】 経皮感作による小麦アレルギー (2013)
  • 著者名/発表者名: 森田 栄伸, 千貫 祐子, 松尾 裕彰
  • 雑誌名: 皮膚アレルギーフロンティア 巻: 11 ページ: 141-144
• [学会発表] ラット消化管における卵白リゾチーム吸収に及ぼす非ステロイド性抗炎症薬 (NSAIDs)の影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松尾裕彰、横大路智治、羽村光
  • 学会等名: 第43回日本皮膚アレルギー・接触皮膚炎学会総会学術大会
  • 発表場所: 金沢市
  • 年月日: 20131129-20131201
• [学会発表] 小児の即時型小麦アレルギーにおける原因抗原の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田玲子,長尾みづほ,貝沼圭吾,松田幹,横大路智治,松尾裕彰,藤澤隆夫
  • 学会等名: 第63回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131128-30
• [学会発表] 非ステロイド性抗炎症薬による食物アレルゲンの吸収増加機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横大路智治,羽村光,松尾裕彰
  • 学会等名: 第63回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131128-30
• [学会発表] 非ステロイド性抗炎症薬の服用による食物アレルゲンの吸収増加機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横大路智治,羽村光,松尾裕彰
  • 学会等名: 膜シンポジウム2013
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20131107-08
• [学会発表] 非ステロイド性抗炎症薬の服用による食物アレルゲンの吸収増加機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横大路智治,羽村光,厳原美穂,松尾裕彰
  • 学会等名: 日本膜学会第35年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130520-21
• [学会発表] 加水分解小麦感作による小麦依存性運動誘発アナフィラキシーの原因抗原の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横大路智治,栗原早紀,千貫祐子,原田晋,高橋仁,森田栄伸,石井香,平郡真記子,秀道広,松尾裕彰
  • 学会等名: 第25回日本アレルギー学会春季臨床大会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 20130511-12