ｃ－ｍｙｃ遺伝子転写抑制因子のスプライシング変異機序の解明と癌医療への応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23591891
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 松下 一之 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90344994)
• 研究分担者: 野村 文夫 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80164739) ; 佐藤 守 千葉大学, 医学部附属病院, 寄附研究部門教員 (20401002)
• キーワード: がん診断 / バイオマーカー / 癌治療

研究概要

我々は、癌組織ではc-myc 遺伝子の転写抑制因子FIR(FBP interacting repressor)の転写抑制部位が欠損した複数のスプライシング変異体（FIRΔs）が高発現し、そのために癌では正常型FIR の機能が阻害され、その結果TFIIH/p89/ERCC3/XPB のDNA ヘリカーゼ機能を抑制できずにc-myc 遺伝子の持続的な賦活化が惹起されることを明らかにした。このように、癌における特定の遺伝子の高発現状態の維持や調節機構の破綻は、近年「がん遺伝子依存 (oncogene addiction)」と表現されている。本研究では、「がん遺伝子依存」の状態となっているタンパク質（ペプチド断片）を質量分析技術を用いて（抗体を用いない方法で）検出する方法を検討した。具体的には癌組織中に高発現しているFIR やFIRΔs、これらに結合する蛋白質複合体等の超微量核蛋白質を血液中に検出して、新規の腫瘍マーカー候補を同定する。すでに癌組織で高発現が確認されている蛋白質やペプチドを高感度に血液中に検出することにより、従来のバイオマーカーよりも感度・特異度ともに優れた癌早期診断法を開発することを目指した研究である。そのための方法論（質量分析装置や血清の前処理技術）も整備・確立されている。さらに、FIR によるアポトーシス誘導は「がんにおけるc-myc 遺伝子依存 (oncogene addiction)」を遮断することがその主な原因と考えられる。FIR によるアポトーシス誘導を利用した、FIR 遺伝子導入による癌治療の可能性についても検討した。

研究成果

• [雑誌論文] Discovery of colorectal cancer biomarker candidates by membrane proteomic analysis and subsequent verification using selected reaction monitoring and tissue microarray analysis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kume H, Muraoka S, Kuga T, Adachi J, Narumi R, Watanabe S, Kuwano M, Kodera Y, Matsushita K, Fukuoka J, Masuda T, Ishihama Y, Matsubara H, Nomura F, and Tomonaga T.
  • 雑誌名: Mol Cell Proteomics. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Change in albumin measurement method affects diagnosis of nephrotic syndrome. (2014)
  • 著者名/発表者名: Seimiya M, Ohno S, Asano H, Fujiwara K, Yoshida T, Sawabe Y, Sogawa K, Ogawa M, Matsushita K, Takizawa H, Yokosuka O, Nomura F.
  • 雑誌名: Clinical Laboratory 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lamin B2 prevents chromosome instability by ensuring proper mitotic chromosome segregation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kuga T, Nie H, Kazami T, Satoh M, Matsushita K, Nomura F, Maeshima K, Nakayama Y, Tomonaga T.
  • 雑誌名: Oncogenesis. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Application of proteomic technologies to discover and identify biomarkers for periodontal diseases in gingival crevicular fluid: A review (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchida S, Satoh M, Sogawa K, Kawashima Y, Kado S, Ishige T, Beppu M, Sawai S, Nishimura M, Kodera Y, Matsushita K, Nomura F.
  • 雑誌名: Proteomics-Clinical Applications 巻: - ページ: 2339-50
  • DOI: 10.1002/pmic.201200510
  • 査読あり
• [雑誌論文] Non-transmissible Sendai virus vector encoding c-myc suppressor FBP-interacting repressor for cancer therapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsushita K, Shimada H, Ueda Y, Inoue M, Hasegawa M, Tomonaga T, Matsubara H, and Nomura F.
  • 雑誌名: World J of Gastroenterology. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human apolipoprotein E resequencing by proteomic analysis and its application to serotyping. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishimura M, Satoh M, Nishimura S, Kakinuma S, Sato K, Sawai S, Matsushita K, Kado S, Kodera Y, Nomura F.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: - ページ: e85356
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0085356. eCollection 2014.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transbronchial biopsy needle rinse solution used for comprehensive biomarker testing in patients with lung cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakairi Y, Sato K, Itoga S, Saegusa F, Matsushita K, Nakajima T, Yoshida S, Takiguchi Y, Nomura F, Yoshino I.
  • 雑誌名: J Thorac Oncol. 巻: 9(1) ページ: 26-32
  • DOI: 10.1097/JTO.0000000000000024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Alternative splicing of FBP-interacting repressor coordinates c-Myc, P27Kip1/cyclinE and Ku86/XRCC5 expression as a molecular sensor for bleomycin-induced DNA damage pathway. (2013)
  • 著者名/発表者名: Rahmutulla B, Matsushita K, Satoh M, Seimiya M, Tsuchida S, Kubo S, Shimada H, Otsuka M, Miyazaki M, and Nomura F.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Japanese Society of Laboratory Medicine (JSLM), The Committee for Standardization, Japan. Evaluation of various storage conditions of laboratory testing samples. (2013)
  • 著者名/発表者名: Furuta K, Hashiguchi T, Hidaka Y, Kang D, Ikeda K, Maekawa M, Matsumoto H, Matsushita K, Okubo S, Tsuchiya T.
  • 雑誌名: Cryobiology 巻: - ページ: 439-440
  • 査読あり
• [雑誌論文] he FLS (Fatty liver Shionogi) mouse reveals local expressions of lipocalin-2, CXCL1 and CXCL9 in the liver with non-alcoholic steatohepatitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Semba T, Nishimura M, Nishimura S, Ohara O, Ishige T, Ohno S, Nonaka K, Sogawa K, Satoh M, Sawai S, Matsushita K, Imazeki F, Yokosuka O, Nomura F.
  • 雑誌名: BMC Gastroenterol. 巻: 13 ページ: 120-127
  • DOI: 10.1186/1471-230X-13-120.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clathrin heavy chain is a useful immunohistochemical marker for esophageal squamous intraepithelial neoplasia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tokita K, Seimiya M, Matsushita K, Tomonaga T, Onodera K, Ohki S, Tohru T, Uesato M, Shimada H, Matsubara H, Nakatani Y, Nomura F.
  • 雑誌名: Esophagus 巻: - ページ: 1-6
  • DOI: 10.1007/s10388-013-0381-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Application of quantitative proteomic analysis using tandem mass tags for discovery and identification of novel biomarkers in periodontal disease. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsuchida S, Satoh M, Kawashima Y, Sogawa K, Kado S, Sawai S, Motoi N, Ogita M, Takeuchi Y, Kobyashi H, Aoki A, Kodera Y, Matsushita K, Izumi Y, Nomura F.
  • 雑誌名: Proteomics 巻: 13 ページ: 2339-2350
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interactions between SAP155 and FUSE-binding protein-interacting repressor bridges c-Myc and P27Kip1 expression. (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsushita K, Tamura M, Tanaka N, Tomonaga T, Matsubara H, Shimada H, Levens D, He L, Liu J, Yoshida M, and Nomura F.
  • 雑誌名: Mol Cancer Res. 巻: 11 ページ: 689-98
  • DOI: 10.1158/1541-7786.MCR-12-0673.
  • 査読あり
• [学会発表] 当院におけるリンチ症候群に対するMSI (microsatellite instability) 検査の立ち上げについて (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、糸賀 栄、宮内英聡、鈴木一史、太田 聡、中谷行雄、松原久裕、野村文夫
  • 学会等名: 先端応用外科例会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 20131202-20131203
• [学会発表] リスク低減両側卵巣卵管全摘出術を施行し右卵管漿液性上皮内腺癌（STIC）を認めたBRCA1遺伝子変異陽性HBOCの一例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、石川博士、長嶋 健、清川貴子、中谷 行雄、生水真紀夫、野村文夫
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第５８回大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20131121-20131122
• [学会発表] 千葉大学病院におけるLynch症候群に対するMSI（microsatellite instability）検査の立ち上げについて (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、佐藤 謙一、石毛崇之、糸賀 栄、野村文夫
  • 学会等名: 日本臨床検査医学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131031-20131103
• [学会発表] 臨床検体の網羅的な保存（いわゆるバイオバンク）による医学研究支援についてー検査部からみた臨床検体の精度管理・保存法の標準化の必要性ー (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、澤部祐司、野村文夫
  • 学会等名: 日本臨床検査自動化学会第４５回大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20131011-20131013
• [学会発表] Interactions between SAP155 and FUSE-binding protein-interacting repressor bridges c-Myc and P27Kip1 expression. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kazuyuki Matsushita, Minoru Yoshida, Mamoru Satoh, Hisahiro Matsubara, Hideaki Shimada, Takeshi Tomonaga , Fumio Nomura.
  • 学会等名: 72st JCA meeting.
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20131004-20131006
• [学会発表] Interactions between SAP155 and FUSE-binding protein-interacting repressor bridges c-Myc and P27Kip1 expression revealed by GeLC-MS approach (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsushita K, Satoh M, Tomonaga T and Nomura F
  • 学会等名: Human Proteome Organization (HUPO)
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20130914-18
• [学会発表] SAP155-mediated c-myc suppressor FBP-interacting repressor splicing variants as colon cancer screening biomarkers (2013)
  • 著者名/発表者名: Kajiwara T, Matsushita K, Itoga S, Nomura F
  • 学会等名: Am Assoc Clinical Chem.
  • 発表場所: Houston, USA
  • 年月日: 20130729-20130801
• [学会発表] Highly sensitive detection of EGFR mutations using Bronchoscopic Ultra-Micro Sampling in patients with Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC). (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato K, Itoga S, Sakairi Y, Ishige T, Matsushita K, Yoshino I, Nomura F
  • 学会等名: Am Assoc Clinical Chem.
  • 発表場所: Houston, USA
  • 年月日: 20130729-20130801
• [学会発表] High-throughput screening of ALK, RET, and ROS1 fusion transcripts in non-small cell lung cancer (NSCLC) by multiplex real-time RT-PCR high-resolution melting curve analysis (2013)
  • 著者名/発表者名: Itoga S, Sato K, Sakairi Y, Ishige T, Matsushita K, Yoshino I, Nomura F
  • 学会等名: Am Assoc Clinical Chem.
  • 発表場所: Houston, USA
  • 年月日: 20130729-20130801
• [学会発表] 大腸癌新規腫瘍マーカー候補：末梢血中のc-myc転写抑制因子FIRのスプライシングバリアントFIRΔexon2 mRNAの検出 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、石塚寿子、糸賀 栄、野村文夫
  • 学会等名: 第20回日本遺伝子診療学会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 20130718-20130720
• [学会発表] RCA1 変異陽性HBOCに対してリスク低減予防的両側卵巣卵管全摘出術を施行し卵管漿液性上皮内腺癌（STIC）を認めた一例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、宇津野恵美、石川博士、糸賀 栄、長田久夫、長嶋 健、西村 基、澤井 摂、楯 真一、清川貴子、高橋葉子、太田 聡、中谷行雄、生水真紀夫、野村文夫
  • 学会等名: 第37回日本遺伝カウンセリング学会
  • 発表場所: 川崎
  • 年月日: 20130621-20130622
• [学会発表] SAP155と FUSE-binding protein-interacting repressor の相互作用は細胞周期と増殖をリンクする (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下 一之、吉田 稔、長田裕之、野村 文夫
  • 学会等名: 日本がん分子標的治療研究会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20130614-20130615
• [学会発表] リスク低減両側卵巣卵管全摘出術を施行し右卵管漿液性上皮内腺癌（STIC）を認めたBRCA1遺伝子変異陽性HBOCの一例
  • 著者名/発表者名: 松下一之、宇津野恵美、小原令子、石川博士、長嶋 健、清川貴子、中谷 行雄、生水真紀夫、野村文夫
  • 学会等名: 第１９回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 別府
• [図書] 「内科」増大号。RAS遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐藤謙一、松下一之、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。P53遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、糸賀 栄、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。サイトケラチン19mRNA遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石毛崇之、松下一之
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。EGFR遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐藤謙一、松下一之、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。ALK融合遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 糸賀 栄、松下一之、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。c-Kit遺伝子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 「内科」増大号。マイクロサテライト不安定性（MSI）遺伝子。 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松下一之、野村文夫
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 南江堂
• [備考] 千葉大学大学院医学研究院分子病態解析学
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/moldiag/