| 研究概要 |
変異型KRAS、変異型EGFRを標的とした免疫療法を開発するために、健常者の血液を用いて、変異型KRAS、変異型EGFR由来ペプチドのCTL誘導能を検討した。具体的には、１．変異型KRAS（G12V, G12R, G12D, G12C, G13D)、変異型EGFR（exon21 L858R、exon19 E746-A750del、T790M)からモチーフ検索プログラムを用いて、突然変異配列を含み、かつ、HLA-A24, HLA-A2, HLA-A11に結合すると予測されるペプチドを２１種類選択した。２．HLA-A24, HLA-A2, HLA-A11を強制発現した細胞株（T2細胞あるいはRMA-S細胞）を用いて、合成ペプチド２１種の各HLA分子への結合能を解析した。１種のペプチドがHLA-A24に、６種のペプチドがHLA-A2に、７種のペプチドがHLA-A11に結合することが確認された。３．HLA-A24陽性健常者３人の末梢血Ｔ細胞を、HLA-A24への結合能が確認された合成ペプチド（１種）と共培養したが、ペプチド特異的なCTL株を誘導できなかった。HLA-A2陽性の健常者５人の末梢血Ｔ細胞を、HLA-A2への結合能が確認された合成ペプチド（６種）と共培養したところ、５人中２人において２種のペプチドに対する特異的なCTL株を誘導できた。現在、この誘導したペプチド特異的CTL株を用いて各種癌細胞株を標的とした機能解析（51Cr遊離試験）を実施中である。また、同様にHLA-A11陽性の健常者血液からペプチド特異的なCTL株を誘導できるかどうか検討中である。４．EGFR T790M変異に特異的なCTL細胞株の機能解析を実施するために、EGFR T790M変異を有する細胞株（NCI H1975）にHLA-A2遺伝子をtransfectした細胞株を作製した。
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